| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 氨基酸及其缩写 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-17页 |
| 1 防御素研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1 防御素概述 | 第12-14页 |
| 1.2 鱼类β-防御素研究进展 | 第14-15页 |
| 2 巨噬细胞研究进展 | 第15-16页 |
| 3 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 团头鲂β-防御素1重组表达和合成多肽的制备 | 第17-29页 |
| 1 材料和方法 | 第17-23页 |
| 1.1 实验材料和仪器 | 第17页 |
| 1.2 溶液和培养基 | 第17-18页 |
| 1.3 引物合成 | 第18页 |
| 1.4 多肽合成 | 第18-19页 |
| 1.5 重组原核表达载体构建 | 第19-21页 |
| 1.5.1 MaBD1基因PCR扩增 | 第19页 |
| 1.5.2 PCR产物回收与纯化 | 第19-20页 |
| 1.5.3 MaBD1PCR产物与pET-32a双酶切 | 第20页 |
| 1.5.4 MaBD1与pET-32a载体的连接以及pET-32a-MaBD1转化 | 第20-21页 |
| 1.5.5 pET-32a-MaBD1重组原核表达质粒的PCR鉴定 | 第21页 |
| 1.6 pET-32a-MaBD1重组原核表达载体诱导表达、纯化及检测 | 第21-22页 |
| 1.6.1 pET-32a-MaBD1重组原核表达载体诱导表达 | 第21页 |
| 1.6.2 MaBD1重组融合蛋白分离纯化 | 第21-22页 |
| 1.6.3 MaBD1重组融合蛋白肠激酶酶切及MaBD1重组蛋白纯化 | 第22页 |
| 1.6.4 MaBD1重组蛋白Western-blot检测 | 第22页 |
| 1.7 MaBD1重组蛋白抑菌活性分析 | 第22-23页 |
| 2 实验结果 | 第23-27页 |
| 2.1 MaBD1多肽合成 | 第23页 |
| 2.2 重组原核表达载体pET-32a-MaBD1的构建 | 第23-24页 |
| 2.3 重组表达质粒PCR鉴定 | 第24-25页 |
| 2.4 MaBD1重组融合蛋白表达及肠激酶酶切和纯化 | 第25页 |
| 2.5 MaBD1重组蛋白Westernblot检测 | 第25-26页 |
| 2.6 MaBD1重组蛋白抗菌活性检测 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 团头鲂β-防御素1对白细胞和巨噬细胞的体外趋化作用 | 第29-40页 |
| 1 材料与方法 | 第29-34页 |
| 1.1 实验材料和仪器 | 第29-30页 |
| 1.2 试剂的配制 | 第30页 |
| 1.3 引物合成 | 第30页 |
| 1.4 实验方法 | 第30-34页 |
| 1.4.1 头肾白细胞的分离 | 第30-31页 |
| 1.4.2 白细胞超显微结构观察 | 第31页 |
| 1.4.3 头肾巨噬细胞贴壁纯化 | 第31页 |
| 1.4.4 荧光定量PCR鉴定巨噬细胞 | 第31-33页 |
| 1.4.5 MaBD1对白细胞和巨噬细胞体外趋化作用 | 第33-34页 |
| 1.4.6 MaBD1趋化位点分析 | 第34页 |
| 1.5 数据分析 | 第34页 |
| 2 实验结果 | 第34-38页 |
| 2.1 团头鲂头肾白细胞观察和鉴定 | 第34-36页 |
| 2.2 团头鲂巨噬细胞观察和鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.1 巨噬细胞形态学鉴定 | 第36页 |
| 2.2.2 巨噬细胞分子生物学鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 MaBD1对白细胞和巨噬细胞体外趋化结果 | 第37-38页 |
| 2.4 MaBD1趋化功能位点分析结果 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 团头鲂β-防御素1对白细胞和巨噬细胞体内趋化作用 | 第40-47页 |
| 1 材料和方法 | 第40-43页 |
| 1.1 实验材料和仪器 | 第40页 |
| 1.2 引物合成 | 第40-41页 |
| 1.3 实验方法 | 第41-43页 |
| 1.3.1 MaBD1对白细胞和巨噬细胞体内趋化作用 | 第41-42页 |
| 1.3.2 MaBD1对促炎细胞因子IL-1β和TNF-α表达的影响 | 第42-43页 |
| 1.4 数据分析 | 第43页 |
| 2 实验结果 | 第43-45页 |
| 2.1 MaBD1对白细胞和巨噬细胞体内趋化结果 | 第43-44页 |
| 2.2 MaBD1对IL-1β和TNF-α基因表达的影响 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 作者简历及发表论文情况 | 第59-60页 |
| 个人资料 | 第59页 |
| 教育经历 | 第59页 |
| 在读期间发表的学术成果 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
