致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 绪论 | 第12-26页 |
1.1 β-榄香烯 | 第12-16页 |
1.1.1 β-榄香烯概述 | 第12-13页 |
1.1.2 β-榄香烯抗肿瘤机制 | 第13-15页 |
1.1.3 β-榄香烯合成方法 | 第15-16页 |
1.2 萜类化合物生物合成 | 第16-21页 |
1.2.1 萜类化合物及其生物合成途径 | 第16-19页 |
1.2.2 萜类化合物生物合成实例 | 第19-21页 |
1.3 体外多酶催化 | 第21-24页 |
1.3.1 体外多酶催化概述 | 第21-22页 |
1.3.2 体外多酶催化的研究现状 | 第22页 |
1.3.3 多酶催化体系的构建策略 | 第22-24页 |
1.4 论文研究意义及研究内容 | 第24-26页 |
2 MVA途径相关酶基因的克隆、表达和纯化 | 第26-40页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验材料 | 第26-28页 |
2.2.1 菌株 | 第26页 |
2.2.2 试剂 | 第26-27页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.2.4 常用溶液配制方法 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-33页 |
2.3.1 质粒pMBIS的提取 | 第28-29页 |
2.3.2 MVA途径生成β-榄香烯前体物质FPP的五个酶基因的克隆 | 第29-30页 |
2.3.3 重组质粒的构建 | 第30-32页 |
2.3.4 重组菌株的诱导表达 | 第32页 |
2.3.5 目的蛋白纯化 | 第32-33页 |
2.4 结果与讨论 | 第33-40页 |
2.4.1 MVA途径生成β-榄香烯前体物质FPP的五个酶基因的克隆 | 第34页 |
2.4.2 MVA途径生成β-榄香烯前体物质FPP的关键酶基因在宿主菌BL21(DE3)体内的表达 | 第34-36页 |
2.4.3 蛋白纯化结果 | 第36-38页 |
2.4.4 小结 | 第38-40页 |
3 吉马烯A合酶基因(GAS)的克隆、表达和纯化 | 第40-43页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 实验材料 | 第40页 |
3.2.1 菌株 | 第40页 |
3.2.2 试剂 | 第40页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第40页 |
3.3 实验方法 | 第40-41页 |
3.3.1 吉马烯A合酶基因(GAS)的表达 | 第40页 |
3.3.2 吉马烯A合酶的纯化 | 第40-41页 |
3.4 结果与讨论 | 第41-43页 |
3.4.1 GAS的表达 | 第41-42页 |
3.4.2 GAS的纯化 | 第42页 |
3.4.3 小结 | 第42-43页 |
4 体外多酶催化反应 | 第43-45页 |
4.1 引言 | 第43页 |
4.2 实验材料 | 第43页 |
4.2.1 试剂 | 第43页 |
4.2.2 主要仪器设备 | 第43页 |
4.3 实验方法 | 第43-44页 |
4.3.1 底物甲羟戊酸的制备 | 第43页 |
4.3.2 体外多酶催化反应 | 第43-44页 |
4.3.3 产物的检测 | 第44页 |
4.4 结果与讨论 | 第44-45页 |
5 结论与展望 | 第45-46页 |
5.1 结论 | 第45页 |
5.2 展望 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
附录 :作者简介 | 第54页 |