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甲羟戊酸途径合成β-榄香烯的相关代谢酶的体外重组表达及催化研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1 绪论第12-26页
    1.1 β-榄香烯第12-16页
        1.1.1 β-榄香烯概述第12-13页
        1.1.2 β-榄香烯抗肿瘤机制第13-15页
        1.1.3 β-榄香烯合成方法第15-16页
    1.2 萜类化合物生物合成第16-21页
        1.2.1 萜类化合物及其生物合成途径第16-19页
        1.2.2 萜类化合物生物合成实例第19-21页
    1.3 体外多酶催化第21-24页
        1.3.1 体外多酶催化概述第21-22页
        1.3.2 体外多酶催化的研究现状第22页
        1.3.3 多酶催化体系的构建策略第22-24页
    1.4 论文研究意义及研究内容第24-26页
2 MVA途径相关酶基因的克隆、表达和纯化第26-40页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验材料第26-28页
        2.2.1 菌株第26页
        2.2.2 试剂第26-27页
        2.2.3 主要仪器设备第27-28页
        2.2.4 常用溶液配制方法第28页
    2.3 实验方法第28-33页
        2.3.1 质粒pMBIS的提取第28-29页
        2.3.2 MVA途径生成β-榄香烯前体物质FPP的五个酶基因的克隆第29-30页
        2.3.3 重组质粒的构建第30-32页
        2.3.4 重组菌株的诱导表达第32页
        2.3.5 目的蛋白纯化第32-33页
    2.4 结果与讨论第33-40页
        2.4.1 MVA途径生成β-榄香烯前体物质FPP的五个酶基因的克隆第34页
        2.4.2 MVA途径生成β-榄香烯前体物质FPP的关键酶基因在宿主菌BL21(DE3)体内的表达第34-36页
        2.4.3 蛋白纯化结果第36-38页
        2.4.4 小结第38-40页
3 吉马烯A合酶基因(GAS)的克隆、表达和纯化第40-43页
    3.1 引言第40页
    3.2 实验材料第40页
        3.2.1 菌株第40页
        3.2.2 试剂第40页
        3.2.3 主要仪器设备第40页
    3.3 实验方法第40-41页
        3.3.1 吉马烯A合酶基因(GAS)的表达第40页
        3.3.2 吉马烯A合酶的纯化第40-41页
    3.4 结果与讨论第41-43页
        3.4.1 GAS的表达第41-42页
        3.4.2 GAS的纯化第42页
        3.4.3 小结第42-43页
4 体外多酶催化反应第43-45页
    4.1 引言第43页
    4.2 实验材料第43页
        4.2.1 试剂第43页
        4.2.2 主要仪器设备第43页
    4.3 实验方法第43-44页
        4.3.1 底物甲羟戊酸的制备第43页
        4.3.2 体外多酶催化反应第43-44页
        4.3.3 产物的检测第44页
    4.4 结果与讨论第44-45页
5 结论与展望第45-46页
    5.1 结论第45页
    5.2 展望第45-46页
参考文献第46-54页
附录 :作者简介第54页

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