| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语/符号说明 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 研究现状、成果 | 第14-17页 |
| 研究目的、方法 | 第17-20页 |
| 一、间充质干细胞来源Exosomes的分离与提纯 | 第20-34页 |
| 1.1 对象和方法 | 第21-26页 |
| 1.1.1 实验相关仪器和设备 | 第21-22页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 1.1.3 主要液体配制 | 第22-23页 |
| 1.1.4 间充质干细胞的原代培养 | 第23页 |
| 1.1.5 MSCs传代、纯化和扩增 | 第23-24页 |
| 1.1.6 间充质干细胞的鉴定 | 第24页 |
| 1.1.7 间充质干细胞来源外泌体的分离、纯化与保存 | 第24-25页 |
| 1.1.8 间充质干细胞来源外泌体的鉴定 | 第25页 |
| 1.1.9 蛋白浓度测定 | 第25-26页 |
| 1.2 结果 | 第26-28页 |
| 1.2.1 BM-MSCs的获取 | 第26页 |
| 1.2.2 骨髓来源间充质干细胞的鉴定 | 第26-27页 |
| 1.2.3 间充质干细胞来源exosomes的鉴定 | 第27-28页 |
| 1.2.4 Exosomes的浓度测定 | 第28页 |
| 1.3 讨论 | 第28-32页 |
| 1.3.1 Exosomes的分离与鉴别 | 第28-30页 |
| 1.3.2 Exosomes来源细胞的选择 | 第30-32页 |
| 1.4 小结 | 第32-34页 |
| 二、角膜移植排斥模型的建立以及治疗途径的探索 | 第34-49页 |
| 2.1 对象和方法 | 第34-39页 |
| 2.1.1 动物模型 | 第34-35页 |
| 2.1.2 建立Wistar/Lewis大鼠角膜移植模型 | 第35页 |
| 2.1.3 临床观察及排斥评估 | 第35-36页 |
| 2.1.4 结膜下注药动物模型的建立 | 第36页 |
| 2.1.5 尾静脉注药动物模型的建立 | 第36-37页 |
| 2.1.6 局部点眼动物治疗模型的建立 | 第37页 |
| 2.1.7 排斥模型的分组与干预 | 第37-38页 |
| 2.1.8 冰冻切片的取材以及制作 | 第38页 |
| 2.1.9 DAPI染色 | 第38页 |
| 2.1.10 Exosomes染色 | 第38-39页 |
| 2.2 结果 | 第39-43页 |
| 2.2.1 大鼠角膜移植排斥模型的建立 | 第39页 |
| 2.2.2 角膜移植排斥治疗模型的建立 | 第39-40页 |
| 2.2.3 各组大鼠角膜植片的存活时间 | 第40页 |
| 2.2.4 Exosomes抑制角膜移植排斥反应的路径比较 | 第40-41页 |
| 2.2.5 Exosomes有效浓度筛选 | 第41页 |
| 2.2.6 Exosomes的作用时间 | 第41页 |
| 2.2.7 MSCs与MSCs来源exosomes的比较 | 第41-42页 |
| 2.2.8 结膜下MSCs的结局 | 第42页 |
| 2.2.9 结膜下Exosomes的结局 | 第42-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-47页 |
| 2.3.1 动物模型的选取 | 第43-44页 |
| 2.3.2 Exosomes的治疗途径探索 | 第44-46页 |
| 2.3.3 细胞治疗与囊泡治疗的比较 | 第46-47页 |
| 2.4 小结 | 第47-49页 |
| 三、MSCs来源exosome对角膜移植排斥的作用研究 | 第49-78页 |
| 3.1 对象和方法 | 第49-57页 |
| 3.1.1 角膜RNA芯片制备、检测以及验证 | 第49-51页 |
| 3.1.2 病理组织学观察 | 第51-52页 |
| 3.1.3 角膜组织总蛋白的提取 | 第52页 |
| 3.1.4 ELISA检测细胞因子的分泌 | 第52页 |
| 3.1.5 角膜mRNA的表达 | 第52-55页 |
| 3.1.6 流式细胞术测定CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞 | 第55-57页 |
| 3.2 结果 | 第57-72页 |
| 3.2.1 基因芯片 | 第57页 |
| 3.2.2 芯片数据的质量评估 | 第57-60页 |
| 3.2.3 显著性差异分析 | 第60页 |
| 3.2.4 显著性差异基因的生物信息分析 | 第60-62页 |
| 3.2.5 差异基因的IPA分析 | 第62-67页 |
| 3.2.6 基因芯片的Real-timePCR验证 | 第67-68页 |
| 3.2.7 MSCs-exo抑制T细胞应答 | 第68-69页 |
| 3.2.8 免疫组织学观察 | 第69-71页 |
| 3.2.9 MSCs-exo对局部以及全身CD4+T细胞因子的作用 | 第71页 |
| 3.2.10 MSCs上调调节性T细胞 | 第71-72页 |
| 3.3 讨论 | 第72-77页 |
| 3.3.1 基因芯片技术及其在角膜疾病中的应用 | 第72-74页 |
| 3.3.2 角膜移植排斥机制 | 第74-77页 |
| 3.4 小结 | 第77-78页 |
| 全文结论 | 第78-79页 |
| 论文创新点 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-94页 |
| 综述 角膜移植免疫排斥的研究进展 | 第94-107页 |
| 综述参考文献 | 第102-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 个人简历 | 第108页 |
