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猪巨噬细胞感染不同基因型弓形虫后的转录组研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
缩略语表第12-14页
1.文献综述第14-22页
    1.1 弓形虫概述第14-16页
        1.1.1 弓形虫的特征第14页
        1.1.2 弓形虫的生活史第14-15页
        1.1.3 弓形虫的流行及危害第15-16页
    1.2 弓形虫免疫学第16-20页
        1.2.1 先天性免疫第16-17页
        1.2.2 获得性免疫第17-18页
        1.2.3 IFN-γ诱导的效应机制第18-19页
        1.2.4 Ⅰ型干扰素第19页
        1.2.5 宿主NF-κB反应第19-20页
    1.3 转录组测序的应用第20-22页
2.研究目的和意义第22-23页
3.材料和方法第23-40页
    3.1 实验材料第23-25页
        3.1.1 实验动物第23页
        3.1.2 虫株、菌株和细胞第23页
        3.1.3 载体和质粒第23-24页
        3.1.4 引物第24-25页
    3.2 主要仪器和试剂第25-27页
        3.2.1 主要仪器第25页
        3.2.2 主要试剂第25-26页
        3.2.3 主要溶液的配置第26-27页
    3.3 实验方法第27-40页
        3.3.1 弓形虫速殖子的培养与收集第27-28页
        3.3.2 弓形虫速殖子总RNA的提取第28页
        3.3.3 转录组测序第28-31页
        3.3.4 cDNA的制备第31-32页
        3.3.5 Real-timePCR反应第32页
        3.3.6 数据分析方法第32-33页
        3.3.7 小鼠感染实验第33页
        3.3.8 哺乳动物细胞的复苏与传代培养第33-34页
        3.3.9 GRA15调控NF-κB信号通路的机制研究第34-38页
        3.3.10 GRA15电转染RAW264.7细胞第38-40页
4.结果与分析第40-64页
    4.1 样品RNA质量检测的结果第40页
    4.2 测序数据质量情况汇总第40-42页
    4.3 参考序列比对分析第42页
    4.4 基因表达水平分析第42页
    4.5 RNA-seq整体质量评估第42-43页
    4.6 差异表达分析第43-45页
        4.6.1 差异表达基因的列表第43-44页
        4.6.2 差异基因的聚类分析第44-45页
    4.7 生物信息学分析第45-56页
        4.7.1 弓形虫RH组6小时和NC组比较的生物信息学分析第45-46页
        4.7.2 弓形虫RH组12小时和NC组比较的生物信息学分析第46-47页
        4.7.3 弓形虫RH组24小时和NC组比较的生物信息学分析第47-48页
        4.7.4 弓形虫HB1组6小时和NC组比较的生物信息学分析第48-50页
        4.7.5 弓形虫HB1组12小时和NC组比较的生物信息学分析第50-51页
        4.7.6 弓形虫HB1组24小时和NC组比较的生物信息学分析第51-52页
        4.7.7 弓形虫Me49组6小时和NC组比较的生物信息学分析第52-53页
        4.7.8 弓形虫Me49组12小时和NC组比较的生物信息学分析第53-54页
        4.7.9 弓形虫Me49组24小时和NC组比较的生物信息学分析第54-56页
    4.8 涉及免疫途径的差异基因分析第56-57页
    4.9 Real-timePCR验证差异表达基因的表达水平第57页
    4.10 不同基因型弓形虫对小鼠先天性免疫细胞因子的影响第57-60页
    4.11 GRA15对宿主免疫途径的影响第60-64页
        4.11.1 GRA15对NF-κB信号通路中IκB的影响第60-61页
        4.11.2 GRA15对小鼠RAW264.7细胞的先天性免疫细胞因子的影响第61-64页
5.讨论第64-70页
    5.1 转录组数据分析讨论第64-66页
    5.2 不同基因型弓形虫株对小鼠脾脏的细胞因子的影响第66页
    5.3 GRA15对NF-κB信号通路的影响第66-67页
    5.4 GRA15对RAW264.7细胞的免疫因子的影响第67-70页
6.结论第70-71页
参考文献第71-82页
致谢第82-83页

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