| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 核酸检测意义 | 第10页 |
| 1.2 现有核酸检测方法 | 第10-18页 |
| 1.2.1 荧光法检测核酸 | 第10-14页 |
| 1.2.2 电化学法检测核酸 | 第14-16页 |
| 1.2.3 比色法检测核酸 | 第16-18页 |
| 1.2.4 化学发光法检测核酸 | 第18页 |
| 1.3 化学发光在核酸分析中的应用 | 第18-22页 |
| 1.3.1 以生物酶为催化剂的检测方法 | 第19页 |
| 1.3.2 以DNA模拟酶为催化剂的检测方法 | 第19-22页 |
| 1.4 本论文研究意义及内容 | 第22-24页 |
| 第2章 基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme的化学发光检测miRNAs | 第24-46页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第25-27页 |
| 2.2.1 仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.2 试剂 | 第26-27页 |
| 2.3 实验步骤 | 第27-32页 |
| 2.3.1 基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme测定miRNA-21 | 第27页 |
| 2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳验证激活产物 | 第27-28页 |
| 2.3.3 紫外可见分光光度计验证分子内G-四聚体的形成 | 第28页 |
| 2.3.4 ThT验证分子间G-四聚体的形成 | 第28页 |
| 2.3.5 基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme体系影响因素的研究 | 第28-30页 |
| 2.3.6 单端封闭与两端封闭体系检测miRNA-21的线性 | 第30页 |
| 2.3.7 两端封闭体系检测miRNA-21的选择性 | 第30-31页 |
| 2.3.8 细胞的培养及miRNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第32-45页 |
| 2.4.1 CHA方案设计与实验的初步现象 | 第32-34页 |
| 2.4.2 分子间G-四聚体的形成与CHA循环效率 | 第34-35页 |
| 2.4.3 验证激活产物与分子内G-四聚体的形成 | 第35-36页 |
| 2.4.4 基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme体系的条件优化 | 第36-40页 |
| 2.4.5 基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme体系的重复性 | 第40页 |
| 2.4.6 两端封闭体系的封闭和激活效率 | 第40-41页 |
| 2.4.7基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme检测miRNA-21 | 第41-42页 |
| 2.4.8 不同CHA传感体系对核酸测定的比较 | 第42-43页 |
| 2.4.9 基于CHA和两端封闭发卡型DNAzyme体系的选择性 | 第43页 |
| 2.4.10 肿瘤细胞中miRNA-21的检测 | 第43-45页 |
| 2.5 结论 | 第45-46页 |
| 第3章 dsDNA-SYBR Green I光敏催化化学发光体系构建及应用 | 第46-67页 |
| 3.1 引言 | 第46-47页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第47-48页 |
| 3.2.1 仪器 | 第47页 |
| 3.2.2 试剂 | 第47-48页 |
| 3.3 实验步骤 | 第48-53页 |
| 3.3.1 光敏催化化学发光体系检测BRCA1基因的初步现象 | 第48-49页 |
| 3.3.2 光敏催化化学发光体系氧化机理的研究过程 | 第49-50页 |
| 3.3.3 紫外可见分光光度计验证K_3[Fe(CN)_6]的生成 | 第50页 |
| 3.3.4 光敏催化化学发光体系影响因素的研究过程 | 第50-52页 |
| 3.3.5 光敏催化化学发光体系检测BRCA1、BRCA2、p53基因 | 第52页 |
| 3.3.6 光敏催化化学发光体系检测BRCA1、p53基因的选择性 | 第52-53页 |
| 3.3.7 血清样品对体系的干扰分析 | 第53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-66页 |
| 3.4.1 dsDNA-SG光敏催化化学发光体系构建 | 第53-54页 |
| 3.4.2 dsDNA-SG光敏催化化学发光体系机理验证 | 第54-57页 |
| 3.4.3 光敏催化化学发光体系的条件优化 | 第57-60页 |
| 3.4.4 光敏催化化学发光体系检测BRCA1基因的重复性 | 第60-61页 |
| 3.4.5 光敏催化化学发光体系检测肿瘤标志物基因的线性 | 第61-63页 |
| 3.4.6 不同传感体系对DNA测定的比较 | 第63页 |
| 3.4.7 dsDNA-SG光敏催化化学发光体系的选择性 | 第63-65页 |
| 3.4.8 血清样品对体系的干扰分析 | 第65-66页 |
| 3.5 结论 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 攻读学位期间取得学术成果 | 第77页 |
