| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略对照表 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 结直肠癌简介 | 第11页 |
| 1.2 结直肠癌的治疗 | 第11-13页 |
| 1.3 5-氟尿嘧啶(5-Fu) | 第13-14页 |
| 1.3.1 5-氟尿嘧啶(5-Fu)的物化特性 | 第13-14页 |
| 1.3.2 5-氟尿嘧啶(5-Fu)的作用机制 | 第14页 |
| 1.4 结直肠癌的5-FU耐药 | 第14-16页 |
| 1.5 新一代测序技术 | 第16-17页 |
| 1.6 研究的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 结肠癌HCT-8细胞5-Fu耐药株的构建 | 第19-25页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂与仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.3 实验所需溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.3 方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第21页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第21-22页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第22页 |
| 2.3.4 结肠癌HCT-8细胞5-Fu耐药株的构建 | 第22页 |
| 2.3.5 细胞耐药性的测定 | 第22-23页 |
| 2.4 结果 | 第23-24页 |
| 2.4.1 细胞的形态特征 | 第23-24页 |
| 2.4.2 细胞耐药指数的计算 | 第24页 |
| 2.5 小结 | 第24-25页 |
| 第三章 细胞样本全转录组测序以及5-Fu耐药相关基因的筛选 | 第25-39页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 材料 | 第25-27页 |
| 3.2.1 主要试剂与仪器 | 第25-26页 |
| 3.2.2 PCR反应预混液的配制 | 第26-27页 |
| 3.3 方法 | 第27-30页 |
| 3.3.1 转录组测序 | 第27-28页 |
| 3.3.2 基因表达量及差异分析 | 第28页 |
| 3.3.3 差异基因功能注释 | 第28-29页 |
| 3.3.4 差异基因表达量验证 | 第29页 |
| 3.3.5 甲基化测序分析及TCGA数据分析 | 第29-30页 |
| 3.4 结果 | 第30-38页 |
| 3.4.1 测序数据的质量评估 | 第30页 |
| 3.4.2 差异基因筛选 | 第30-31页 |
| 3.4.3 差异基因功能注释和富集分析 | 第31-35页 |
| 3.4.4 差异基因表达验证 | 第35-37页 |
| 3.4.5 耐药相关基因的筛选 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 WNT6基因的细胞功能学验证 | 第39-52页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 材料 | 第39-42页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第39页 |
| 4.2.2 主要试剂与仪器 | 第39-42页 |
| 4.3 方法 | 第42-45页 |
| 4.3.1 RNA干扰效率的测定 | 第42-43页 |
| 4.3.2 RNA干扰实验对细胞耐药性的影响 | 第43页 |
| 4.3.3 细胞凋亡实验分析 | 第43-44页 |
| 4.3.4 细胞周期实验 | 第44-45页 |
| 4.3.5 细胞迁移实验 | 第45页 |
| 4.4 结果 | 第45-51页 |
| 4.4.1 RNA干扰效率 | 第45-46页 |
| 4.4.2 WNT6敲减对细胞存活率的影响 | 第46-47页 |
| 4.4.3 WNT6敲减对细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
| 4.4.4 WNT6敲减对细胞周期的影响 | 第48-50页 |
| 4.4.5 WNT6敲减对细胞迁移能力的影响 | 第50-51页 |
| 4.5 小结 | 第51-52页 |
| 全文总结 | 第52-53页 |
| 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |