中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
主要缩略语英文索引 | 第15-17页 |
第1章 前言 | 第17-21页 |
第2章 实验材料 | 第21-25页 |
2.1 主要实验仪器 | 第21页 |
2.2 支原体菌株 | 第21页 |
2.3 实验主要试剂 | 第21-23页 |
2.4 培养基及溶液配制 | 第23-25页 |
2.4.1 0.4%酚红溶液的配制 | 第23页 |
2.4.2 50%无菌葡萄糖的配制 | 第23页 |
2.4.3 支原体PPLO肉汤培养基 | 第23页 |
2.4.4 支原体固体培养基 | 第23页 |
2.4.5 0.5%结晶紫溶液的配制方法 | 第23-24页 |
2.4.6 50χTAE | 第24页 |
2.4.7 1.5%琼脂糖凝胶 | 第24页 |
2.4.8 100ml5%的无菌甘油 | 第24页 |
2.4.9 100ml蔗糖-蛋黄保存剂 | 第24-25页 |
第3章 实验方法 | 第25-35页 |
3.1 Mp的复苏、固体培养、液体培养、PCR鉴定、冻存 | 第25-27页 |
3.1.1 Mp复苏 | 第25页 |
3.1.2 Mp固体培养 | 第25页 |
3.1.3 Mp液体培养 | 第25页 |
3.1.4 PCR鉴定 | 第25-26页 |
3.1.5 Mp冻存 | 第26-27页 |
3.2 Mp和Mp生物被膜的培养 | 第27页 |
3.3 Mp菌株的筛选 | 第27-28页 |
3.4 Mp生物被膜形成中的蛋白表达差异研究 | 第28页 |
3.5 RT-qPCR定量检测Mp生物被膜相关目的基因mRNA的表达水平 | 第28-32页 |
3.5.1 引物设计与合成 | 第28-29页 |
3.5.2 RNA抽提及检测 | 第29-30页 |
3.5.3 RNA琼脂糖凝胶电泳及结果判断 | 第30页 |
3.5.4 反转录 | 第30-31页 |
3.5.5 RT-qPCR检测 | 第31-32页 |
3.6 西奈芬净对Mp生物被膜形成的作用 | 第32页 |
3.7 迷迭香酸对Mp生物被膜形成的作用 | 第32-33页 |
3.8 统计学分析 | 第33-35页 |
第4章 实验结果 | 第35-63页 |
4.1 Mp的复苏及培养 | 第35-36页 |
4.1.1 Mp液体培养 | 第35页 |
4.1.2 Mp固体培养 | 第35-36页 |
4.2 Mp的PCR鉴定结果 | 第36页 |
4.323 株Mp菌株生物被膜形成能力的检测 | 第36-39页 |
4.3.1 MpM129结晶紫染色后光学显微镜观察 | 第36-37页 |
4.3.2 MpM129生物被膜的半定量分析 | 第37页 |
4.3.3 23株Mp菌株结晶紫染色后光学显微镜观察 | 第37-38页 |
4.3.4 23株Mp菌株生物被膜的半定量分析 | 第38-39页 |
4.4 TMT蛋白质组定量分析 | 第39-51页 |
4.4.1 蛋白质的鉴定 | 第39-42页 |
4.4.2 蛋白质定量 | 第42-45页 |
4.4.3 生物信息学分析 | 第45-51页 |
4.5 RT-qPCR验证主要差异蛋白 | 第51-56页 |
4.5.1 RNA的检测 | 第51页 |
4.5.2 PCR产物电泳 | 第51-53页 |
4.5.3 RT-qPCR检测8种基因mRNA在Mp生物被膜菌和浮游菌间的表达 | 第53-56页 |
4.6 西奈芬净、迷迭香酸对Mp生物被膜形成的作用 | 第56-63页 |
4.6.1 西奈芬净对MpM129生物被膜形成量的影响 | 第56页 |
4.6.2 西奈芬净处理Mp后结晶紫染色结果观察 | 第56-57页 |
4.6.3 西奈芬净处理Mp后的半定量分析 | 第57-58页 |
4.6.4 西奈芬净对7个基因mRNA表达水平的影响 | 第58-59页 |
4.6.5 迷迭香酸对MpM129生物被膜形成量的影响 | 第59-60页 |
4.6.6 迷迭香酸处理Mp后结晶紫染色结果观察 | 第60页 |
4.6.7 迷迭香酸处理Mp后的半定量分析 | 第60-61页 |
4.6.8 迷迭香酸对7个基因mRNA表达水平的影响 | 第61-63页 |
第5章 讨论 | 第63-67页 |
第6章 结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
附录 | 第75-77页 |
综述 | 第77-89页 |
参考文献 | 第84-89页 |
攻读硕士学位期间的主要研究成果 | 第89-91页 |
致谢 | 第91页 |