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肺炎支原体生物被膜相关蛋白初步研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
主要缩略语英文索引第15-17页
第1章 前言第17-21页
第2章 实验材料第21-25页
    2.1 主要实验仪器第21页
    2.2 支原体菌株第21页
    2.3 实验主要试剂第21-23页
    2.4 培养基及溶液配制第23-25页
        2.4.1 0.4%酚红溶液的配制第23页
        2.4.2 50%无菌葡萄糖的配制第23页
        2.4.3 支原体PPLO肉汤培养基第23页
        2.4.4 支原体固体培养基第23页
        2.4.5 0.5%结晶紫溶液的配制方法第23-24页
        2.4.6 50χTAE第24页
        2.4.7 1.5%琼脂糖凝胶第24页
        2.4.8 100ml5%的无菌甘油第24页
        2.4.9 100ml蔗糖-蛋黄保存剂第24-25页
第3章 实验方法第25-35页
    3.1 Mp的复苏、固体培养、液体培养、PCR鉴定、冻存第25-27页
        3.1.1 Mp复苏第25页
        3.1.2 Mp固体培养第25页
        3.1.3 Mp液体培养第25页
        3.1.4 PCR鉴定第25-26页
        3.1.5 Mp冻存第26-27页
    3.2 Mp和Mp生物被膜的培养第27页
    3.3 Mp菌株的筛选第27-28页
    3.4 Mp生物被膜形成中的蛋白表达差异研究第28页
    3.5 RT-qPCR定量检测Mp生物被膜相关目的基因mRNA的表达水平第28-32页
        3.5.1 引物设计与合成第28-29页
        3.5.2 RNA抽提及检测第29-30页
        3.5.3 RNA琼脂糖凝胶电泳及结果判断第30页
        3.5.4 反转录第30-31页
        3.5.5 RT-qPCR检测第31-32页
    3.6 西奈芬净对Mp生物被膜形成的作用第32页
    3.7 迷迭香酸对Mp生物被膜形成的作用第32-33页
    3.8 统计学分析第33-35页
第4章 实验结果第35-63页
    4.1 Mp的复苏及培养第35-36页
        4.1.1 Mp液体培养第35页
        4.1.2 Mp固体培养第35-36页
    4.2 Mp的PCR鉴定结果第36页
    4.323 株Mp菌株生物被膜形成能力的检测第36-39页
        4.3.1 MpM129结晶紫染色后光学显微镜观察第36-37页
        4.3.2 MpM129生物被膜的半定量分析第37页
        4.3.3 23株Mp菌株结晶紫染色后光学显微镜观察第37-38页
        4.3.4 23株Mp菌株生物被膜的半定量分析第38-39页
    4.4 TMT蛋白质组定量分析第39-51页
        4.4.1 蛋白质的鉴定第39-42页
        4.4.2 蛋白质定量第42-45页
        4.4.3 生物信息学分析第45-51页
    4.5 RT-qPCR验证主要差异蛋白第51-56页
        4.5.1 RNA的检测第51页
        4.5.2 PCR产物电泳第51-53页
        4.5.3 RT-qPCR检测8种基因mRNA在Mp生物被膜菌和浮游菌间的表达第53-56页
    4.6 西奈芬净、迷迭香酸对Mp生物被膜形成的作用第56-63页
        4.6.1 西奈芬净对MpM129生物被膜形成量的影响第56页
        4.6.2 西奈芬净处理Mp后结晶紫染色结果观察第56-57页
        4.6.3 西奈芬净处理Mp后的半定量分析第57-58页
        4.6.4 西奈芬净对7个基因mRNA表达水平的影响第58-59页
        4.6.5 迷迭香酸对MpM129生物被膜形成量的影响第59-60页
        4.6.6 迷迭香酸处理Mp后结晶紫染色结果观察第60页
        4.6.7 迷迭香酸处理Mp后的半定量分析第60-61页
        4.6.8 迷迭香酸对7个基因mRNA表达水平的影响第61-63页
第5章 讨论第63-67页
第6章 结论第67-69页
参考文献第69-75页
附录第75-77页
综述第77-89页
    参考文献第84-89页
攻读硕士学位期间的主要研究成果第89-91页
致谢第91页

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