| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 肺癌的简介 | 第9-11页 |
| 1.2 紫杉醇 | 第11页 |
| 1.3 表皮生长因子受体 | 第11-13页 |
| 1.4 非小细胞肺癌紫杉醇耐药发生的因素 | 第13页 |
| 1.5 二代测序技术 | 第13-14页 |
| 1.6 RNAi简介 | 第14页 |
| 1.7 背景意义 | 第14-16页 |
| 第二章 人肺腺癌A549细胞及紫杉醇耐药细胞的培养 | 第16-24页 |
| 2.1 引言 | 第16页 |
| 2.2 材料与设备 | 第16-18页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第16页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第16-17页 |
| 2.2.4 主要溶液的配制 | 第17-18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-21页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第18-19页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第19页 |
| 2.3.3 细胞计数 | 第19页 |
| 2.3.4 细胞冻存 | 第19-20页 |
| 2.3.5 细胞耐药性测定 | 第20页 |
| 2.3.6 药物诱导细胞耐药 | 第20-21页 |
| 2.4 实验结果 | 第21-22页 |
| 2.4.1 细胞形态学的观察 | 第21-22页 |
| 2.4.2 细胞IC50的测定 | 第22页 |
| 2.5 讨论 | 第22-23页 |
| 2.6 小结 | 第23-24页 |
| 第三章 A549和A549/Taxol细胞全转录组测序 | 第24-46页 |
| 3.1 引言 | 第24页 |
| 3.2 设备与材料 | 第24-26页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 3.2.2 主要设备仪器 | 第25-26页 |
| 3.3 实验方法 | 第26-31页 |
| 3.3.1 A549和A549/Taxol的RNA的提取及RNA的逆转录 | 第26-27页 |
| 3.3.2 转录组测序 | 第27页 |
| 3.3.3 转录组测序数据及其质量控制 | 第27-28页 |
| 3.3.4 转录组数据与参考基因组序列比对 | 第28页 |
| 3.3.5 SNP分析 | 第28-29页 |
| 3.3.6 差异表达分析 | 第29页 |
| 3.3.7 差异表达基因功能注释 | 第29页 |
| 3.3.8 差异表达基因验证 | 第29-31页 |
| 3.4 实验结果 | 第31-42页 |
| 3.4.1 样品检测质量 | 第31-33页 |
| 3.4.2 测序数据产出统计 | 第33页 |
| 3.4.3 转录组序列比对分析 | 第33-34页 |
| 3.4.4 SNP位点统计 | 第34页 |
| 3.4.5 差异表达分析 | 第34-36页 |
| 3.4.6 差异表达基因验证 | 第36-37页 |
| 3.4.7 基因功能和信号通路的注释 | 第37-42页 |
| 3.5 讨论 | 第42-46页 |
| 第四章 DVL1与A549细胞紫杉醇耐药性的关联研究 | 第46-55页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 材料和设备 | 第46-47页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第46-47页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-50页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第47页 |
| 4.3.2 RNA干扰实验 | 第47-49页 |
| 4.3.3 siRNA干扰下细胞药物敏感性检测 | 第49页 |
| 4.3.4 细胞凋亡实验 | 第49-50页 |
| 4.4 实验结果 | 第50-53页 |
| 4.4.1 Dvl1基因siRNA干扰效率检测 | 第50-51页 |
| 4.4.2 DVL1特异性siRNA干扰后细胞对紫杉醇敏感性变化 | 第51-52页 |
| 4.4.3 DVL1特异性siRNA干扰后紫杉醇诱导的细胞凋亡的变化 | 第52-53页 |
| 4.5 小结 | 第53-54页 |
| 4.6 讨论 | 第54-55页 |
| 全文总结 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
