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BmCPV对家蚕细胞RNAi系统的抑制及BmCPVS8片段功能研究

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
第一章 文献综述第11-23页
    1 BmCPV的研究进展第11-13页
        1.1 BmCPV病毒的结构特征与基因组组成第11-12页
        1.2 BmCPV的入侵与增殖第12-13页
    2 RNAi的研究进展第13-16页
        2.1 RNAi的作用机制第13-15页
        2.2 RNAi的抗病毒作用机制及运用第15-16页
    参考文献第16-23页
第二章 研究目的与内容第23-27页
    1 研究目的与意义第23-24页
    2 研究内容第24-25页
    3 技术路线第25-27页
第三章 感染BmCPV的BmN细胞中病毒来源的small RNA分析第27-42页
    1 引言第27-28页
    2 材料与方法第28-31页
        2.1 实验材料第28页
        2.2 试剂与仪器第28-29页
        2.3 实验方法第29-31页
    3 结果与分析第31-39页
        3.1 数据质量控制第31-32页
        3.2 碱基组成信息第32-33页
        3.3 序列长度分析第33-34页
        3.4 Mapping到参考基因组数据分析第34-39页
    4 讨论第39-40页
    参考文献第40-42页
第四章 BmCPV对BmN细胞RNAi效果的抑制研究第42-57页
    1 引言第42-43页
    2 材料与方法第43-48页
        2.1 实验材料第43页
        2.2 试剂配制第43-44页
        2.3 实验方法第44-48页
    3 结果与分析第48-53页
        3.1 BmN细胞感染BmCPV 48h和72h对dsRNA介导的RNAi的影响第48-49页
        3.2 BmCPV感染48h和72h对siRNA介导的RNAi的影响第49-50页
        3.3 BmN细胞表达BmCPV单个蛋白对RNAi的影响第50-53页
    4 讨论第53-54页
    参考文献第54-57页
第五章 BmCPV编码的VP8的功能初探第57-97页
    1 引言第57-58页
    2 材料与方法第58-74页
        2.1 实验材料第58-59页
        2.2 常用试剂和溶液配制第59-62页
        2.3 实验方法第62-74页
    3 结果与分析第74-91页
        3.1 重组表达载体pIZT-VP8的构建第74页
        3.2 pIZT-VP8转染BmN细胞的筛选及稳定系细胞的鉴定第74-76页
        3.3 BmCPV的VP8蛋白的细胞亚定位第76-77页
        3.4 过表达VP8基因对BmCPV增殖的影响第77-78页
        3.5 过表达VP8基因对细胞通路基因表达的影响第78-79页
        3.6 过表达VP8基因对BmN细胞周期的影响第79-80页
        3.7 Co-IP筛选VP8蛋白互作蛋白第80-81页
        3.8 Co-IP质谱分析第81-84页
        3.9 重组表达载体pET-28a-Ago2的构建及原核表达第84-85页
        3.10 pET-28a-Ago2原核表达蛋白纯化与鉴定第85-86页
        3.11 Bm-Ago2的多克隆抗体检测第86-87页
        3.12 CPV-VP8蛋白对酵母细胞的毒性第87-88页
        3.13 CVP8蛋白在酵母细胞中的定位第88-89页
        3.14 酵母细胞中CVP8蛋白和Dcp2蛋白共定位第89-90页
        3.15 BmN细胞中VP8与Ago2的共定位第90-91页
    4 讨论第91-93页
    参考文献第93-97页
结论第97-98页
附录一 常用仪器第98-99页
附录二 载体图谱第99-101页
附录三 定量PCR原始数据第101-102页
附录四 细胞周期检测原始数据第102-103页
附录五 测序原始数据第103-106页
附录六 蛋白质谱鉴定图第106-108页
附录七 双荧光素酶报告实验原始数据第108-111页
致谢第111-113页

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