中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 BmCPV的研究进展 | 第11-13页 |
1.1 BmCPV病毒的结构特征与基因组组成 | 第11-12页 |
1.2 BmCPV的入侵与增殖 | 第12-13页 |
2 RNAi的研究进展 | 第13-16页 |
2.1 RNAi的作用机制 | 第13-15页 |
2.2 RNAi的抗病毒作用机制及运用 | 第15-16页 |
参考文献 | 第16-23页 |
第二章 研究目的与内容 | 第23-27页 |
1 研究目的与意义 | 第23-24页 |
2 研究内容 | 第24-25页 |
3 技术路线 | 第25-27页 |
第三章 感染BmCPV的BmN细胞中病毒来源的small RNA分析 | 第27-42页 |
1 引言 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-31页 |
2.1 实验材料 | 第28页 |
2.2 试剂与仪器 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-31页 |
3 结果与分析 | 第31-39页 |
3.1 数据质量控制 | 第31-32页 |
3.2 碱基组成信息 | 第32-33页 |
3.3 序列长度分析 | 第33-34页 |
3.4 Mapping到参考基因组数据分析 | 第34-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第四章 BmCPV对BmN细胞RNAi效果的抑制研究 | 第42-57页 |
1 引言 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-48页 |
2.1 实验材料 | 第43页 |
2.2 试剂配制 | 第43-44页 |
2.3 实验方法 | 第44-48页 |
3 结果与分析 | 第48-53页 |
3.1 BmN细胞感染BmCPV 48h和72h对dsRNA介导的RNAi的影响 | 第48-49页 |
3.2 BmCPV感染48h和72h对siRNA介导的RNAi的影响 | 第49-50页 |
3.3 BmN细胞表达BmCPV单个蛋白对RNAi的影响 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
第五章 BmCPV编码的VP8的功能初探 | 第57-97页 |
1 引言 | 第57-58页 |
2 材料与方法 | 第58-74页 |
2.1 实验材料 | 第58-59页 |
2.2 常用试剂和溶液配制 | 第59-62页 |
2.3 实验方法 | 第62-74页 |
3 结果与分析 | 第74-91页 |
3.1 重组表达载体pIZT-VP8的构建 | 第74页 |
3.2 pIZT-VP8转染BmN细胞的筛选及稳定系细胞的鉴定 | 第74-76页 |
3.3 BmCPV的VP8蛋白的细胞亚定位 | 第76-77页 |
3.4 过表达VP8基因对BmCPV增殖的影响 | 第77-78页 |
3.5 过表达VP8基因对细胞通路基因表达的影响 | 第78-79页 |
3.6 过表达VP8基因对BmN细胞周期的影响 | 第79-80页 |
3.7 Co-IP筛选VP8蛋白互作蛋白 | 第80-81页 |
3.8 Co-IP质谱分析 | 第81-84页 |
3.9 重组表达载体pET-28a-Ago2的构建及原核表达 | 第84-85页 |
3.10 pET-28a-Ago2原核表达蛋白纯化与鉴定 | 第85-86页 |
3.11 Bm-Ago2的多克隆抗体检测 | 第86-87页 |
3.12 CPV-VP8蛋白对酵母细胞的毒性 | 第87-88页 |
3.13 CVP8蛋白在酵母细胞中的定位 | 第88-89页 |
3.14 酵母细胞中CVP8蛋白和Dcp2蛋白共定位 | 第89-90页 |
3.15 BmN细胞中VP8与Ago2的共定位 | 第90-91页 |
4 讨论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-97页 |
结论 | 第97-98页 |
附录一 常用仪器 | 第98-99页 |
附录二 载体图谱 | 第99-101页 |
附录三 定量PCR原始数据 | 第101-102页 |
附录四 细胞周期检测原始数据 | 第102-103页 |
附录五 测序原始数据 | 第103-106页 |
附录六 蛋白质谱鉴定图 | 第106-108页 |
附录七 双荧光素酶报告实验原始数据 | 第108-111页 |
致谢 | 第111-113页 |