| 中文摘要 | 第2-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一部分 下丘脑弓状核-外侧隔核ghrelin神经通路的构成 | 第15-37页 |
| 第一章 前言 | 第15-17页 |
| 第二章 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1 动物准备 | 第17页 |
| 2.2 药品及配制 | 第17-19页 |
| 2.2.1 药品与试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.2 主要试剂配制 | 第18-19页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 第三章 实验项目及方法 | 第20-26页 |
| 3.1 实验动物及分组 | 第20页 |
| 3.2 神经元逆行示踪与荧光免疫组化法 | 第20-23页 |
| 3.2.1 外侧隔核注射FG | 第20-22页 |
| 3.2.2 大鼠灌注固定取材 | 第22页 |
| 3.2.3 冰冻切片制备 | 第22页 |
| 3.2.4 荧光免疫组化染色 | 第22页 |
| 3.2.5 结果观察与分析 | 第22-23页 |
| 3.3 PCR | 第23-24页 |
| 3.3.1 总RNA提取 | 第23页 |
| 3.3.2 反转录(RT)合成cDNA | 第23页 |
| 3.3.3 PCR引物设计 | 第23页 |
| 3.3.4 PCR扩增 | 第23-24页 |
| 3.4 Western blot | 第24-25页 |
| 3.4.1 组织蛋白裂解提取 | 第24页 |
| 3.4.2 总蛋白含量测定 | 第24-25页 |
| 3.4.3 Western blot流程 | 第25页 |
| 3.5 荧光免疫组化染色 | 第25-26页 |
| 第四章 实验结果 | 第26-30页 |
| 4.1 外侧隔核ghrelin及其受体GHSR-1a的表达 | 第26-28页 |
| 4.1.1 外侧隔核ghrelin和GHSR-1amRNA表达 | 第26页 |
| 4.1.2 外侧隔核ghrelin和GHSR-1a蛋白表达 | 第26-27页 |
| 4.1.3 外侧隔核ghrelin和GHSR-1a免疫阳性细胞表达 | 第27-28页 |
| 4.2 弓状核ghrelin免疫阳性神经元向外侧隔核的纤维投射 | 第28-30页 |
| 4.2.1 弓状核向外侧隔核的纤维投射 | 第28页 |
| 4.2.2 弓状核ghrelin免疫阳性神经元向外侧隔核的纤维投射 | 第28-30页 |
| 第五章 讨论 | 第30-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 第二部分 下丘脑弓状核-外侧隔核ghrelin功能通路的构成研究 | 第37-60页 |
| 第一章 前言 | 第37-39页 |
| 第二章 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.1 动物准备 | 第39页 |
| 2.2 药品及配制 | 第39页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第39-41页 |
| 第三章 实验项目及方法 | 第41-45页 |
| 3.1 动物麻醉 | 第41页 |
| 3.2 胃部手术 | 第41页 |
| 3.3 头部手术 | 第41-42页 |
| 3.4 玻璃微电极制备 | 第42页 |
| 3.5 电刺激ARC | 第42-43页 |
| 3.6 细胞外放电记录 | 第43页 |
| 3.7 中性红染色法 | 第43页 |
| 3.8 观察项目 | 第43-44页 |
| 3.8.1 外侧隔核神经元的自发放电活动 | 第43页 |
| 3.8.2 GD神经元的鉴别标准和方法 | 第43-44页 |
| 3.8.3 Ghrelin和[D-Lys-3]-GHRP-6对外侧隔核GD神经元放电活动的影响 | 第44页 |
| 3.8.4 电刺激ARC对外侧隔核ghrelin兴奋的GD神经元放电活动的影响 | 第44页 |
| 3.9 组织学检查 | 第44页 |
| 3.10 统计学分析 | 第44-45页 |
| 第四章 实验结果 | 第45-53页 |
| 4.1 大鼠外侧隔核神经元自发放电活动特征 | 第45页 |
| 4.2 胃扩张刺激对大鼠外侧隔核神经元放电活动的影响 | 第45-47页 |
| 4.3 Ghrelin和[D-Lys-3]-GHRP-6对外侧隔核GD神经元放电活动的影响 | 第47-49页 |
| 4.4 电刺激ARC对外侧隔核ghrelin兴奋的GD神经元放电活动的影响 | 第49-53页 |
| 第五章 讨论 | 第53-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 第三部分 下丘脑弓状核-外侧隔核ghrelin通路对胃运动的调控研究 | 第60-94页 |
| 第一章 前言 | 第60-62页 |
| 第二章 实验材料 | 第62-64页 |
| 2.1 动物准备 | 第62页 |
| 2.2 药品与试剂 | 第62页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第62-64页 |
| 第三章 实验项目及方法 | 第64-69页 |
| 3.1 实验动物及分组 | 第64-65页 |
| 3.2 下丘脑ARC埋管术 | 第65页 |
| 3.3 应力传感器(应变片)植入术 | 第65-66页 |
| 3.4 清醒大鼠胃运动记录 | 第66页 |
| 3.5 胃运动幅度及频率变化率计算公式 | 第66页 |
| 3.6 电刺激ARC | 第66页 |
| 3.7 电损毁外侧隔核 | 第66页 |
| 3.8 尼氏染色 | 第66-67页 |
| 3.9 Real-time PCR(RT-PCR) | 第67-68页 |
| 3.10 Western blot | 第68页 |
| 3.11 组织学检查 | 第68页 |
| 3.12 统计学处理 | 第68-69页 |
| 第四章 实验结果 | 第69-86页 |
| 4.1 外侧隔核微量注射ghrelin对清醒大鼠胃运动的影响 | 第69-73页 |
| 4.2 电刺激ARC对清醒大鼠胃运动的影响 | 第73-78页 |
| 4.3 电损毁外侧隔核对清醒大鼠胃运动的影响 | 第78-83页 |
| 4.3.1 电损毁外侧隔核对清醒大鼠胃收缩强度的影响 | 第78-80页 |
| 4.3.2 电损毁外侧隔核与电刺激ARC对清醒大鼠胃收缩幅度和频率的影响 | 第80-83页 |
| 4.4 电刺激ARC对大鼠外侧隔核ghrelin和GHSR-1a表达的影响 | 第83-86页 |
| 4.4.1 电刺激ARC对大鼠外侧隔核ghrelin和GHSR-1a mRNA表达的影响 | 第83-84页 |
| 4.4.2 电刺激ARC对大鼠外侧隔核ghrelin和GHSR-1a蛋白表达的影响 | 第84-86页 |
| 第五章 讨论 | 第86-89页 |
| 结论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-94页 |
| 综述 | 第94-120页 |
| 综述参考文献 | 第111-120页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第120-121页 |
| 中英文缩略词表 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
