中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 小菜蛾概况 | 第12-13页 |
1.2 小菜蛾抗药性 | 第13-15页 |
1.2.1 小菜蛾抗药性的发生情况 | 第13页 |
1.2.2 小菜蛾对阿维菌素的抗性 | 第13-14页 |
1.2.3 小菜蛾阿维菌素抗性机理研究 | 第14-15页 |
1.3 细胞色素P450 | 第15-16页 |
1.3.1 昆虫细胞色素P450 | 第15-16页 |
1.3.2 昆虫细胞色素P450与阿维菌素抗性 | 第16页 |
1.4 本实验用到的技术原理及特点 | 第16-18页 |
1.4.1 转录组测序 | 第16页 |
1.4.2 实时荧光定量技术 | 第16-17页 |
1.4.3 RNA干扰技术 | 第17-18页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-39页 |
2.1 阿维菌素抗性、敏感小菜蛾转录组测序 | 第20-24页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 实验方法 | 第20-24页 |
2.2 CYP340W1基因克隆与功能研究 | 第24-39页 |
2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.2.2 试验方法 | 第25-39页 |
3 结果与分析 | 第39-62页 |
3.1 小菜蛾转录组测序 | 第39-51页 |
3.1.1 小菜蛾总RNA提取 | 第39-40页 |
3.1.2 测序数据过滤 | 第40-41页 |
3.1.3 Reads与参考基因组比对情况统计 | 第41-42页 |
3.1.4 Reads在参考基因组不同区域的分布情况 | 第42-43页 |
3.1.5 可变剪切事件分类和数量统计 | 第43-44页 |
3.1.6 差异表达基因筛选 | 第44页 |
3.1.7 差异基因聚类分析和GO富集分析 | 第44-46页 |
3.1.8 抗性相关基因的筛选 | 第46-51页 |
3.1.9 荧光定量PCR检测 | 第51页 |
3.2 CYP340W1基因克隆与功能 | 第51-62页 |
3.2.1 小菜蛾总RNA的提取 | 第51-52页 |
3.2.2 小菜蛾CYP340W1片段的克隆 | 第52-53页 |
3.2.3 小菜蛾CYP340W1cDNA全长的克隆 | 第53-54页 |
3.2.4 小菜蛾CYP340W1基因的生物信息学分析 | 第54-56页 |
3.2.5 小菜蛾CYP340W1基因的诱导效应 | 第56页 |
3.2.6 小菜蛾CYP340W1基因的RNA干扰 | 第56-57页 |
3.2.7 小菜蛾CYP340W1基因重组表达载体pET 28-CYP340W的构建 | 第57-58页 |
3.2.8 小菜蛾CYP340W1基因重组表达条件优化 | 第58-60页 |
3.2.9 小菜蛾CYP340W1蛋白的Western Blot检测 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
附录 | 第74-81页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |