| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 两栖动物的生态分布 | 第12-14页 |
| 1.1.1 绿蛙的简介 | 第12页 |
| 1.1.2 绿蛙的分类及数目 | 第12-13页 |
| 1.1.3 绿蛙的生长习性 | 第13-14页 |
| 1.1.4 绿蛙的保护 | 第14页 |
| 1.2 蝌蚪消化道形态学组织特点及影响因素 | 第14-15页 |
| 1.3 蝌蚪与成蛙的消化道微生物菌群的差异比较 | 第15-17页 |
| 1.3.1 蝌蚪消化道微生物 | 第15-16页 |
| 1.3.2 蝌蚪与成蛙消化道菌群不同的原因 | 第16-17页 |
| 1.4 微生物菌群的研究技术 | 第17-21页 |
| 1.4.1 T-RFLP的基本原理 | 第18页 |
| 1.4.2 T-RFLP的技术路线 | 第18-20页 |
| 1.4.3 T-RFLP图谱的分析 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 绿蛙蝌蚪消化道中肠超微结构及其变化 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第22页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器及设备 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-23页 |
| 2.3 实验结果 | 第23-30页 |
| 2.3.1 绿蛙蝌蚪消化道组织观察 | 第23-27页 |
| 2.3.2 氯化钠处理组的绿蛙蝌蚪消化道组织观察结果 | 第27-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 绿蛙蝌蚪消化道微生物群落多样性及其变化 | 第32-54页 |
| 3.1 实验试剂及仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第32页 |
| 3.1.2 实验试剂和溶液 | 第32-33页 |
| 3.2 实验动物及饲养管理 | 第33页 |
| 3.3 样品收集 | 第33页 |
| 3.4 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.4.1 绿蛙蝌蚪消化道微生物基因组DNA的提取 | 第34页 |
| 3.4.2 16s rDNA的扩增 | 第34页 |
| 3.4.3 PCR反应 | 第34-35页 |
| 3.4.4 16s rDNA的纯化回收 | 第35页 |
| 3.4.5 限制性内切酶酶切 | 第35页 |
| 3.4.6 毛细管电泳及原始数据的分析 | 第35页 |
| 3.5 数据处理 | 第35-36页 |
| 3.6 实验结果 | 第36-51页 |
| 3.6.1 氯化钠处理后对绿蛙蝌蚪消化道微生物种属数目的影响 | 第36-38页 |
| 3.6.2 利用T-RFLP技术分析得出氯化钠处理前后绿蛙蝌蚪消化道微生物(HaeⅢ酶切) | 第38-42页 |
| 3.6.3 利用T-RFLP技术分析得出氯化钠处理前后绿蛙蝌蚪消化道微生物(HindPⅡ酶切) | 第42-44页 |
| 3.6.4 利用T-RFLP技术分析得出氯化钠处理前后绿蛙蝌蚪消化道微生物(AluⅠ酶切) | 第44-47页 |
| 3.6.5 利用T-RFLP技术分析得出氯化钠处理前后绿蛙蝌蚪消化道微生物(MspⅠ酶切) | 第47-50页 |
| 3.6.6 消化道微生物群落多样性指数 | 第50-51页 |
| 3.7 讨论 | 第51-54页 |
| 第4章 绿蛙蝌蚪消化道微生物菌群的鉴定 | 第54-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.2 实验仪器与试剂 | 第54-56页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第54-55页 |
| 4.2.2 实验试剂和溶液 | 第55-56页 |
| 4.3 实验方法 | 第56-59页 |
| 4.3.1 绿蛙蝌蚪消化道微生物基因组DNA的提取 | 第56页 |
| 4.3.2 16s rDNA的扩增 | 第56页 |
| 4.3.3 PCR反应 | 第56-57页 |
| 4.3.4 16s rDNA的纯化回收 | 第57页 |
| 4.3.5 DH5α感受态细胞的制作过程 | 第57页 |
| 4.3.6 回收产物的连接 | 第57-58页 |
| 4.3.7 连接产物转化到感受态细胞 | 第58页 |
| 4.3.8 筛选与扩大培养 | 第58页 |
| 4.3.9 质粒提取(试剂盒法) | 第58-59页 |
| 4.3.10 PCR克隆检测 | 第59页 |
| 4.4 实验结果 | 第59-61页 |
| 4.4.1 测序序列比对所得菌属在绿蛙蝌蚪的消化道微生物菌群的所占比例及其氯化钠处理后的变化 | 第60-61页 |
| 4.4.2 分析测序所得菌属与T-RFLP图谱预测T-RF片段吻合结果 | 第61页 |
| 4.5 讨论 | 第61-64页 |
| 总结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第78页 |
