| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1.1 干旱胁迫对植株的影响 | 第9-10页 |
| 1.1.1 干旱胁迫对植株形态的影响 | 第9页 |
| 1.1.2 干旱胁迫对光合作用的影响 | 第9页 |
| 1.1.3 干旱胁迫对活性氧的影响 | 第9-10页 |
| 1.2 植物抵御干旱胁迫的内在机制 | 第10-13页 |
| 1.2.1 植物抗逆生理生化机制 | 第10页 |
| 1.2.2 活性氧的清除机制 | 第10-11页 |
| 1.2.3 ABA信号转导 | 第11-12页 |
| 1.2.4 植物响应干旱胁迫的分子机制 | 第12-13页 |
| 1.3 NAC转录因子 | 第13-18页 |
| 1.3.1 NAC转录因子的结构特征 | 第14页 |
| 1.3.2 NAC转录因子的生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.3.3 NAC转录因子通过结合NACRS位点调控下游基因 | 第16-17页 |
| 1.3.4 NAC转录因子调控途径中的磷酸化 | 第17-18页 |
| 1.4 黄瓜NAC转录因子研究现状 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的意义及内容 | 第19-20页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第19页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 黄瓜CsATAF1的生物信息学分析和表达分析 | 第20-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 黄瓜总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.2 黄瓜cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
| 2.2.3 黄瓜CsATAF1基因的克隆及载体构建 | 第22-24页 |
| 2.2.4 基因枪法瞬时转化洋葱表皮 | 第24页 |
| 2.2.5 黄瓜CsATAF1的表达分析 | 第24-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-31页 |
| 2.3.1 黄瓜CsATAF1基因的克隆及生物信息学分析 | 第26-28页 |
| 2.3.2 亚细胞定位 | 第28-29页 |
| 2.3.3 黄瓜CsATAF1的表达分析 | 第29-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 黄瓜CsATAF1转录激活活性的验证 | 第32-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第32页 |
| 3.1.2 生化试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 酵母表达载体构建 | 第33页 |
| 3.2.2 酵母感受态制备及重组质粒转化流程 | 第33-34页 |
| 3.2.3 X-gal染色 | 第34页 |
| 3.2.4 β-半乳糖苷酶活性的检测 | 第34-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-37页 |
| 3.3.1 重组质粒酶切鉴定 | 第35页 |
| 3.3.2 黄瓜CsATAF1转录激活活性验证 | 第35-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 黄瓜CsATAF1参与调节抗旱性的功能分析 | 第38-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 菌株和载体 | 第38页 |
| 4.1.3 生化试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-44页 |
| 4.2.1 表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 4.2.2 农杆菌感受态的转化 | 第40页 |
| 4.2.3 农杆菌介导的黄瓜遗传转化 | 第40-41页 |
| 4.2.4 拟南芥的遗传转化 | 第41页 |
| 4.2.5 阳性转基因植株的鉴定 | 第41-42页 |
| 4.2.6 阳性转基因植株抗旱性评价 | 第42-43页 |
| 4.2.7 叶片失水率的测定 | 第43页 |
| 4.2.8 气孔开度实验 | 第43页 |
| 4.2.9 叶片最大光合效率 | 第43页 |
| 4.2.10 DAB和NBT的染色 | 第43-44页 |
| 4.2.11 抗氧化系统酶活性的检测 | 第44页 |
| 4.2.12 MDA含量的检测 | 第44页 |
| 4.2.13 H_2O_2含量和超氧阴离子的测定 | 第44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-57页 |
| 4.3.1 阳性转基因植株的获得 | 第44-47页 |
| 4.3.2 CsATAF1参与调节转基因黄瓜幼苗的抗旱性 | 第47-52页 |
| 4.3.3 CsATAF1参与调节转基因黄瓜幼苗体内活性氧的平衡 | 第52-54页 |
| 4.3.4 过表达CsATAF1提高了转基因拟南芥的抗旱性 | 第54-56页 |
| 4.3.5 过表达CsATAF1促进转基因拟南芥中活性氧清除 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 黄瓜CsATAF1参与调节ABA敏感性的功能分析 | 第59-65页 |
| 5.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第59-60页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60页 |
| 5.2.1 不同ABA浓度下种子的萌发 | 第60页 |
| 5.2.2 不同ABA浓度下气孔的开闭 | 第60页 |
| 5.3 实验结果 | 第60-64页 |
| 5.3.1 CsATAF1参与调控外源ABA处理下的种子萌发 | 第60页 |
| 5.3.2 CsATAF1参与调控外源ABA处理下的气孔开闭 | 第60-64页 |
| 5.4 讨论 | 第64-65页 |
| 第六章 黄瓜CSATAF1下游靶基因的验证 | 第65-87页 |
| 6.1 实验材料 | 第65-68页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第65页 |
| 6.1.2 菌株及载体 | 第65页 |
| 6.1.3 生化试剂 | 第65-67页 |
| 6.1.4 实验仪器 | 第67-68页 |
| 6.2 实验方法 | 第68-76页 |
| 6.2.1 荧光定量PCR | 第68-69页 |
| 6.2.2 酵母表达载体构建及转化方法 | 第69-70页 |
| 6.2.3 蛋白原核表达及纯化 | 第70-71页 |
| 6.2.4 凝胶阻滞实验 | 第71-73页 |
| 6.2.5 烟草瞬时转化 | 第73-74页 |
| 6.2.6 GUS酶活性的检测 | 第74页 |
| 6.2.7 黄瓜原生质体瞬时转化 | 第74-76页 |
| 6.3 实验结果 | 第76-85页 |
| 6.3.1 CsATAF1调控逆境响应基因的表达 | 第76-78页 |
| 6.3.2 CsATAF1靶基因的验证 | 第78-80页 |
| 6.3.3 CsATAF1激活下游靶基因的表达 | 第80-82页 |
| 6.3.4 CsATAF1提高CsDREB2C和CsABI5的下游基因的表达 | 第82-85页 |
| 6.4 讨论 | 第85-87页 |
| 第七章 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 个人简历 | 第100-101页 |
