| 中文摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一篇 文献综述 | 第16-31页 |
| 第一章 结直肠癌的治疗现状 | 第16-21页 |
| 1.1 结直肠癌的流行病学分析 | 第16-17页 |
| 1.2 结直肠癌的诊断方法 | 第17-19页 |
| 1.2.1 愈创粪便隐血试验 | 第17-18页 |
| 1.2.2 柔性乙状结肠镜 | 第18页 |
| 1.2.3 粪便DNA检测 | 第18页 |
| 1.2.4 计算机断层扫描 | 第18页 |
| 1.2.5 分子诊断 | 第18-19页 |
| 1.3 结直肠癌的治疗 | 第19-21页 |
| 第二章 重组免疫毒素类分子靶向药物的研究概况及进展 | 第21-24页 |
| 2.1 免疫毒素的定义 | 第21页 |
| 2.2 免疫毒素治疗治疗肿瘤 | 第21-24页 |
| 2.2.1 细胞因子 | 第21-22页 |
| 2.2.2 生长因子 | 第22页 |
| 2.2.3 肿瘤相关抗原 | 第22页 |
| 2.2.4 重组免疫毒素最新进展及挑战 | 第22-24页 |
| 第三章 胆囊收缩素及其受体的研究进展 | 第24-26页 |
| 3.1 胆囊收缩素 | 第24-25页 |
| 3.2 胆囊收缩素受体 | 第25-26页 |
| 第四章 CRC分子诊断方法的研究进展 | 第26-31页 |
| 4.1 遗传突变在CRC诊断中的应用 | 第27-28页 |
| 4.2 表观遗传学改变在CRC诊断中的应用 | 第28-29页 |
| 4.2.1 CRC中异常的DNA甲基化 | 第28-29页 |
| 4.2.2 CRC的组蛋白修饰 | 第29页 |
| 4.2.3 MicroRNAs(Mirs)在CRC中的改变 | 第29页 |
| 4.3 蛋白质标记 | 第29-30页 |
| 4.4 代谢生物标志物 | 第30-31页 |
| 第二篇 实验内容 | 第31-84页 |
| 第一章 CCKBR荧光定量PCR检测方法的建立 | 第31-46页 |
| 1.1 材料 | 第31-33页 |
| 1.1.1 细胞株 | 第31页 |
| 1.1.2 引物 | 第31-32页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第32页 |
| 1.1.4 常用试剂的配制 | 第32-33页 |
| 1.1.5 主要仪器 | 第33页 |
| 1.2 方法 | 第33-39页 |
| 1.2.1 TRIzol法提取HCT-116细胞总RNA | 第33页 |
| 1.2.2 反转录 | 第33-34页 |
| 1.2.3 标准质粒的构建 | 第34-38页 |
| 1.2.4 CCKBR荧光定量检测方法的建立 | 第38-39页 |
| 1.3 实验结果 | 第39-44页 |
| 1.3.1 目的片段的PCR扩增 | 第39-40页 |
| 1.3.2 CCKBR基因RT-qPCR检测方法的建立 | 第40-44页 |
| 1.4 讨论 | 第44-45页 |
| 1.4.1 RT-qPCR的一步法与两步法探讨 | 第45页 |
| 1.4.2 RT-qPCR注意事项 | 第45页 |
| 1.5 小结 | 第45-46页 |
| 第二章 CCKBR生物信息学分析、原核表达及多克隆抗体的制备 | 第46-60页 |
| 2.1 材料 | 第46-48页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第46页 |
| 2.1.2 试剂 | 第46页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第46-48页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第48页 |
| 2.2 方法 | 第48-53页 |
| 2.2.1 CCKBR氨基酸的获取 | 第48页 |
| 2.2.2 CCKBR蛋白的二级结构预测 | 第48页 |
| 2.2.3 CCKBR二级结构分析及B细胞抗原表位的预测 | 第48-49页 |
| 2.2.4 CCKBR重组蛋白质的原核表达 | 第49-50页 |
| 2.2.5 CCKBR蛋白多克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
| 2.2.6 CCKBR多克隆抗体的鉴定 | 第51-52页 |
| 2.2.7 CCKBR多克隆抗体的纯化 | 第52-53页 |
| 2.3 结果 | 第53-59页 |
| 2.3.1 CCKBR二级结构的预测 | 第53页 |
| 2.3.2 CCKBR结构分析及抗原表位预测 | 第53-55页 |
| 2.3.3 CCKBR重组蛋白的原核表达 | 第55-58页 |
| 2.3.4 CCKBR多克隆抗体的鉴定分析 | 第58-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59页 |
| 2.5 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 靶向CCKBR的rCCK8PE38在细胞系水平的筛查分析 | 第60-70页 |
| 3.1 材料 | 第60-61页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第60页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 3.1.3 常用试剂的配制 | 第60页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第60-61页 |
| 3.2 方法 | 第61-63页 |
| 3.2.1 胃肠癌细胞系中CCKBR的表达差异 | 第61-62页 |
| 3.2.2 rCCK8PE38重组靶向毒素的细胞杀伤试验 | 第62页 |
| 3.2.3 靶向CCKBR的rCCK8PE38在细胞系水平的筛查分析 | 第62-63页 |
| 3.3 结果 | 第63-68页 |
| 3.3.1 胃肠癌细胞系中CCKBR的表达差异 | 第63-66页 |
| 3.3.2 rCCK8PE38重组靶向毒素的细胞杀伤试验 | 第66-67页 |
| 3.3.3 靶向CCKBR的rCCK8PE38在细胞系水平的筛查分析 | 第67-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-69页 |
| 3.5 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 靶向CCKBR的rCCK8PE38临床适用病例筛查分析 | 第70-84页 |
| 4.1 材料 | 第70页 |
| 4.1.1 CRC组织标本 | 第70页 |
| 4.1.2 CRC血液标本 | 第70页 |
| 4.2 方法 | 第70-74页 |
| 4.2.1 CRC组织标本中CCKBR的表达差异 | 第70-71页 |
| 4.2.2 CCKBR表达差异于病理指标的相关性分析 | 第71-72页 |
| 4.2.3 血浆CCKBR荧光定量PCR检测方法的评估 | 第72-73页 |
| 4.2.4 rCCK8PE38重组毒素的原代细胞杀伤分析 | 第73-74页 |
| 4.3 结果 | 第74-82页 |
| 4.3.1 CRC组织标本中CCKBR的表达差异 | 第74-77页 |
| 4.3.2 CCKBR表达差异与病理指标的相关性分析 | 第77-79页 |
| 4.3.3 血浆CCKBR荧光定量PCR检测方法的评估 | 第79-81页 |
| 4.3.4 rCCK8PE38重组毒素的原代细胞杀伤分析 | 第81-82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-83页 |
| 4.5 小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 导师简介 | 第94-95页 |
| 作者简介 | 第95-96页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
