| 中文摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-12页 |
| 中英文缩略词表 | 第15-17页 |
| 第1章 综述 | 第17-28页 |
| 1.1 糖尿病概述 | 第17-18页 |
| 1.2 T2DM的发病机制研究进展 | 第18-23页 |
| 1.2.1 T2DM中胰岛素抵抗的分子机制 | 第19-20页 |
| 1.2.2 T2DM中胰岛β细胞功能障碍的分子机制 | 第20-21页 |
| 1.2.3 氧化应激 | 第21-22页 |
| 1.2.4 T2DM中胰岛β细胞凋亡的分子机制 | 第22-23页 |
| 1.3 丝裂原活化蛋白激酶信号通路与T2DM | 第23-26页 |
| 1.3.1 P38信号通路与T2DM | 第24页 |
| 1.3.2 JNK信号通路与T2DM | 第24-25页 |
| 1.3.3 ERK信号通路与T2DM | 第25-26页 |
| 1.4 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶家族信号通路与T2DM | 第26-28页 |
| 1.4.1 MKPs与MAPK | 第26页 |
| 1.4.2 MKPs与T2DM | 第26-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2.1 细胞系 | 第28页 |
| 2.2 器材和设备 | 第28-29页 |
| 2.3 主要试剂 | 第29-31页 |
| 2.4 Real-timePCR引物序列 | 第31-32页 |
| 第3章 实验方法 | 第32-39页 |
| 3.1 MIN6细胞冻存、复苏与传代 | 第32页 |
| 3.2 MKP-5稳定表达细胞的构建与鉴定 | 第32页 |
| 3.3 CCK-8法分析细胞增殖 | 第32-33页 |
| 3.4 Hoechst33258染色法细胞形态学分析 | 第33-34页 |
| 3.5 AnnexinV/FICT细胞凋亡检测实验 | 第34页 |
| 3.6 细胞内ROS检测 | 第34-35页 |
| 3.7 Real-timePCR分析凋亡、功能障碍、ROS相关基因相对表达水平 | 第35-36页 |
| 3.7.1 实验处理方法 | 第35页 |
| 3.7.2 总mRNA提取 | 第35-36页 |
| 3.7.3 逆转录合成cDNA | 第36页 |
| 3.7.4 Real-timePCR | 第36页 |
| 3.8 蛋白免疫印迹实验 | 第36-38页 |
| 3.8.1 实验处理方法 | 第36-37页 |
| 3.8.2 试剂制备 | 第37页 |
| 3.8.3 细胞总蛋白的提取 | 第37-38页 |
| 3.8.4 蛋白免疫印记实验 | 第38页 |
| 3.9 统计学分析 | 第38-39页 |
| 第4章 实验结果 | 第39-49页 |
| 4.1 稳定表达MKP-5细胞系的鉴定 | 第39页 |
| 4.2 MKP-5在糖脂毒性刺激MIN6细胞增殖中的影响 | 第39-40页 |
| 4.3 初步分析MKP-5基因过表达对细胞凋亡形态学的影响 | 第40-42页 |
| 4.4 Annexin-V/PI双染法分析MKP-5对糖脂协同处理胰岛β细胞凋亡的作用 | 第42-43页 |
| 4.5 MKP-5对凋亡相关基因及蛋白的影响 | 第43-44页 |
| 4.6 MKP-5对胰岛β细胞功能相关蛋白及基因的影响 | 第44-46页 |
| 4.7 MKP-5对胰岛β细胞ROS水平及相关基因的影响 | 第46-47页 |
| 4.8 MKP-5对MAPK家族成员JNK、P38、ERK蛋白活化的影响 | 第47-49页 |
| 第5章 讨论 | 第49-53页 |
| 第6章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
