高压静电场处理甘草三年生植株DNA甲基化多态性分析
| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第一章 引言 | 第8-17页 |
| 1.1 甘草简介 | 第8-9页 |
| 1.1.1 甘草在医药领域的使用 | 第8页 |
| 1.1.2 甘草在非医药领域的使用 | 第8-9页 |
| 1.2 表观遗传学概述 | 第9-13页 |
| 1.2.1 DNA甲基化 | 第9-10页 |
| 1.2.2 DNA甲基转移酶 | 第10页 |
| 1.2.3 表观遗传学的生物效应 | 第10-11页 |
| 1.2.4 植物DNA甲基化生物效应 | 第11-12页 |
| 1.2.5 物理胁迫下植物DNA甲基化效应 | 第12-13页 |
| 1.3 高压静电场的生物学效应 | 第13-14页 |
| 1.3.1 高压静电场的微生物生物效应研究 | 第13-14页 |
| 1.3.2 高压静电场的植物生物效应研究及应用 | 第14页 |
| 1.4 基因组DNA甲基化检测方法 | 第14-15页 |
| 1.4.1 甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术 | 第15页 |
| 1.4.2 高效液相色谱法(HPLC) | 第15页 |
| 1.5 本研究的意义和目的 | 第15-17页 |
| 第二章 三年生甘草茎和叶片的MSAP分析 | 第17-43页 |
| 2.1 主要仪器、生化试剂和接头引物序列 | 第17-21页 |
| 2.1.1 主要仪器及生化试剂 | 第17-19页 |
| 2.1.2 接头及引物序列 | 第19-21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-22页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.2 甘草茎和叶样本处理 | 第21页 |
| 2.2.3 DNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 基因组DNA浓度及纯度检测 | 第22页 |
| 2.3 甘草MSAP分析反应体系 | 第22-29页 |
| 2.3.1 基因组DNA双酶切反应 | 第22-23页 |
| 2.3.2 接头制备 | 第23页 |
| 2.3.3 连接反应 | 第23-24页 |
| 2.3.4 预扩增反应 | 第24页 |
| 2.3.5 选择性扩增 | 第24-26页 |
| 2.3.6 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-28页 |
| 2.3.7 银染 | 第28页 |
| 2.3.8 条带统计及数据处理 | 第28-29页 |
| 2.4 甘草酸含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.4.2 甘草根部样本处理 | 第29页 |
| 2.4.3 甘草酸标准曲线的制作及含量测定 | 第29-30页 |
| 2.4.4 甘草酸含量的计算 | 第30页 |
| 2.5 MET酶基因分离测序 | 第30-31页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.5.2 分离测序 | 第31页 |
| 2.6 结果分析 | 第31-43页 |
| 2.6.1 DNA检测 | 第31-32页 |
| 2.6.2 基因组DNA酶切结果与分析 | 第32-33页 |
| 2.6.3 预扩增结果与分析 | 第33页 |
| 2.6.4 选择性扩增结果与分析 | 第33-36页 |
| 2.6.5 基因组甲基化差异分析 | 第36-40页 |
| 2.6.6 甘草酸含量测定结果 | 第40-41页 |
| 2.6.7 甘草MET酶基因分离测序信息学分析 | 第41-43页 |
| 第三章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第52页 |
