| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1. 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 猪流行性腹泻 | 第12-13页 |
| 1.2 猪流行性腹泻病毒 | 第13-15页 |
| 1.3 猪流行性腹泻病毒的分子流行病学 | 第15-17页 |
| 1.4 猪流行性腹泻病毒的诊断 | 第17-18页 |
| 1.5 ORF3蛋白 | 第18页 |
| 1.6 病毒viroporin蛋白引起的内质网应激 | 第18-19页 |
| 1.7 细胞自噬 | 第19-20页 |
| 1.8 通过细胞自噬诱导蛋白质降解 | 第20-22页 |
| 1.9 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2. 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 细胞与病料 | 第23页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备和耗材 | 第24页 |
| 2.1.4 抗体和试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 引物和软件 | 第25页 |
| 2.1.6 培养基和缓冲液 | 第25-26页 |
| 2.1.6.1 PEDV病毒分离维持液（1L） | 第25-26页 |
| 2.1.6.2 磷酸盐缓冲液 PBS 的配制 | 第26页 |
| 2.1.6.3 胰酶溶液的配制 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 病毒分离 | 第26-27页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.2.3 病毒RNA提取 | 第28页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第28-30页 |
| 2.2.5 PCR产物纯化 | 第30页 |
| 2.2.6 目的基因与真核表达载体的连接 | 第30页 |
| 2.2.7 载体的转化 | 第30-31页 |
| 2.2.8 质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.2.9 细胞转染 | 第32页 |
| 2.2.10 免疫荧光检测 | 第32-33页 |
| 2.2.11 Western blot | 第33-34页 |
| 2.2.12 流式细胞术 | 第34-35页 |
| 3. 结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 PEDV分离与鉴定 | 第35-37页 |
| 3.2 ORF3基因克隆及载体构建 | 第37-38页 |
| 3.3 不同的ORF3融合蛋白具有相同表达形态 | 第38-40页 |
| 3.4 ORF3蛋白在不同细胞系中具有相同表达形态 | 第40-41页 |
| 3.5 ORF3融合蛋白与内质网共定位 | 第41-43页 |
| 3.6 ORF3蛋白与内质网相互作用导致细胞死亡 | 第43-44页 |
| 3.7 ORF3蛋白激活PERK信号通路诱导内质网应激 | 第44-45页 |
| 3.8 ORF3蛋白不诱导细胞凋亡 | 第45-46页 |
| 3.9 ORF3蛋白诱导细胞自噬性死亡 | 第46-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| 4.1 ORF3蛋白诱导内质网应激的分析 | 第49-50页 |
| 4.2 ORF3蛋白诱导细胞自噬的分析 | 第50-51页 |
| 5. 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
