| 附表 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第10-12页 |
| List of Figures | 第12-13页 |
| List of Tables | 第13-14页 |
| Abbreviations | 第14-16页 |
| CHAPTER 1:LITERATURE REVIEW | 第16-37页 |
| 1.1. THE HONEYBEES | 第16-19页 |
| 1.1.1. Origin and distribution | 第16-17页 |
| 1.1.2. Pollination services | 第17页 |
| 1.1.3. Diseases and enemies | 第17-19页 |
| 1.2. THE CHALKBROOD DISEASE | 第19-37页 |
| 1.2.1. Historical incidence and geographical distribution | 第19-21页 |
| 1.2.2. Taxonomic lineage | 第21-22页 |
| 1.2.3. Life cycle | 第22-23页 |
| 1.2.4. Morphology and reproduction | 第23-27页 |
| 1.2.5. The pathogen and its pathogenesis | 第27-32页 |
| 1.2.6. Honeybee resistance mechanisms against chalkbrood | 第32-37页 |
| CHAPTER 2:PROTOPLAST ISOLATION AND REGENERATIONFROM A CHALKBROOD FUNGUS,ASCOSPHAERA APIS | 第37-57页 |
| 2.1. INTRODUCTION | 第37页 |
| 2.2. PROTOPLASTS AND PROTOPLAST ISOLATION | 第37-39页 |
| 2.3. PURPOSE OF THE STUDY | 第39-40页 |
| 2.4. MATERIALS AND METHODS | 第40-43页 |
| 2.4.1 Research Material | 第40页 |
| 2.4.2. Media and Reagents Preparation | 第40页 |
| 2.4.3. Fungal Spores Preparation | 第40-41页 |
| 2.4.4. Effect of Mycelium age on Protoplasts Formation | 第41页 |
| 2.4.5. Effect of Osmotic Stabilizers and other Factors | 第41页 |
| 2.4.6. Effects of Enzymes on protoplast Isolation | 第41页 |
| 2.4.7. Protoplast Isolation | 第41-42页 |
| 2.4.8. Protoplasts' Viability and Regeneration Assessment | 第42页 |
| 2.4.9. Examination of Protoplast Releasing and Growth Morphology | 第42-43页 |
| 2.4.10. Data analysis | 第43页 |
| 2.5. RESULTS | 第43-55页 |
| 2.5.1. Protoplast isolation | 第43-45页 |
| 2.5.2. Effects of enzymes on protoplast yield | 第45-47页 |
| 2.5.3. Effects of stabilizers on protoplast yield | 第47-48页 |
| 2.5.4. Effects of mycelium age on protoplast preparation | 第48-49页 |
| 2.5.5. Effects of pH value and incubation temperature on protoplast isolation | 第49-50页 |
| 2.5.6. Protoplast viability and regeneration | 第50页 |
| 2.5.7. Effects of protoplast growth mediums on regeneration rate | 第50-51页 |
| 2.5.8. Effects of osmotic stabilizers on protoplast regeneration | 第51-54页 |
| 2.5.9. Effects of enzymolysis time on protoplast regeneration | 第54-55页 |
| 2.6. DISCUSSION | 第55-56页 |
| 2.7. CONCLUSION | 第56-57页 |
| CHAPTER 3:PATHOGENICITY OF ASCOSPHAERA APIS MUTANTSCONSTRUCTED BY RESTRICTED ENZYME-MEDIATEDINTEGRATION IN HONEYBEE CHALKBROOD DISEASE | 第57-73页 |
| 3.1. NTRODUCTION | 第57-59页 |
| 3.2. MATERIALS AND METHODS | 第59-63页 |
| 3.2.1. Research material | 第59页 |
| 3.2.2. Media and reagents preparation | 第59-60页 |
| 3.2.3. Protoplast isolation | 第60页 |
| 3.2.4. Plasmid DNA and transformation | 第60-61页 |
| 3.2.5. Screening of Ascosphaera apis on hygromycin B | 第61页 |
| 3.2.6 PCR amplification | 第61页 |
| 3.2.7. Southern blot analysis | 第61-62页 |
| 3.2.8. In-vitro larval rearing and pathogenicity bioassay | 第62-63页 |
| 3.3. RESULTS | 第63-70页 |
| 3.3.1. REMI transformation and Selection of mutants | 第63-64页 |
| 3.3.2. PCR verification of the transformants | 第64-66页 |
| 3.3.3. Southern blot analysis | 第66-67页 |
| 3.3.4. Larval infection rate(pathogenicity)and mortality | 第67-70页 |
| 3.4. DISCUSSION | 第70-72页 |
| 3.5. CONCLUSION | 第72-73页 |
| REFERENCES | 第73-94页 |
| Acknowledgements | 第94-96页 |
| RESUME(PERSONAL DATA) | 第96-103页 |
