摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 作用于电压敏感钠离子通道毒素的研究 | 第11-23页 |
1 电压敏感钠离子通道 | 第11-15页 |
1.1 电压敏感钠离子通道的结构 | 第11-13页 |
1.2 电压敏感钠离子通道的研究进展及分类 | 第13-14页 |
1.3 电压敏感钠通道的研究意义 | 第14-15页 |
2 毒素 | 第15-18页 |
2.1 神经毒素结构及ICK模型 | 第16-17页 |
2.2 神经毒素在电压敏感钠离子通道上的结合位点 | 第17-18页 |
2.3 毒素研究的意义 | 第18页 |
3 酵母双杂交技术 | 第18-23页 |
3.1 酵母双杂交的原理 | 第19-20页 |
3.2 酵母双杂交系统的一般操作方法 | 第20-21页 |
3.3 酵母双杂交的优缺点 | 第21-22页 |
3.4 酵母双杂交的发展 | 第22-23页 |
第二章 鼠电压门控钠离子通道1.3DⅡS1- S2与随机五肽文库的筛选 | 第23-43页 |
1 前言 | 第23页 |
2 实验材料与试剂 | 第23-24页 |
2.1 菌株与质粒 | 第23-24页 |
2.2 试剂和仪器 | 第24页 |
3 方法 | 第24-37页 |
3.1 双杂交载体的构建 | 第24-30页 |
3.2 电压敏感钠离子通道rNav1.3的DⅡ-S1-S2与随机五肽文库的筛选 | 第30-36页 |
3.3 酵母双杂交水平R1、R2与敬钊毒素Ⅲ关键残基的替换实验 | 第36-37页 |
4 实验结果及分析 | 第37-41页 |
4.1 诱饵质粒的构建及自激活检测 | 第37-38页 |
4.2 酵母双杂交结果验证 | 第38-40页 |
4.3 酵母双杂交水平上R1、R2与敬钊毒素Ⅲ关键残基的替换实验 | 第40-41页 |
5 讨论 | 第41-43页 |
第三章 电压敏感钠离子通道潜在抑制剂的表达 | 第43-54页 |
1 前沿 | 第43-44页 |
2 实验材料与试剂 | 第44页 |
2.1 菌株与质粒 | 第44页 |
2.2 试剂和仪器 | 第44页 |
3 方法 | 第44-50页 |
3.1 表达质粒的构建 | 第44-45页 |
3.2 融合蛋白的诱导表达 | 第45-46页 |
3.3 目的蛋白的获取 | 第46-49页 |
3.4 目的蛋白的纯化 | 第49-50页 |
4 实验结果及分析 | 第50-52页 |
4.1 表达质粒的构建 | 第50页 |
4.2 IPTG诱导表达 | 第50-51页 |
4.3 目的蛋白的获取 | 第51-52页 |
5 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
缩写表(中英文对照) | 第60-61页 |
附录 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |