| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第8-28页 |
| 1.1 动脉粥样硬化简介 | 第8-14页 |
| 1.1.1 动脉粥样硬化发病机理—高血胆固醇、修饰的脂质和脂蛋白 | 第9页 |
| 1.1.2 动脉粥样硬化发病机理—巨噬细胞 | 第9-10页 |
| 1.1.3 动脉粥样硬化发病机理—内皮细胞 | 第10-12页 |
| 1.1.4 动脉粥样硬化发病机理—血小板和微粒 | 第12-13页 |
| 1.1.5 动脉粥样硬化发病机理—补体 | 第13-14页 |
| 1.2 C反应蛋白总论 | 第14-15页 |
| 1.3 C反应蛋白异构体:pCRP,mCRP_m和mCRP | 第15-19页 |
| 1.3.1 mCRP_m的形成机制 | 第15-16页 |
| 1.3.2 mCRP的形成机制 | 第16-17页 |
| 1.3.3 mCRP的功能 | 第17-19页 |
| 1.4 C反应蛋白(pCRP和mCRP)与动脉粥样硬化 | 第19-25页 |
| 1.4.1 C反应蛋白(pCRP和mCRP)与炎症 | 第19-20页 |
| 1.4.2 C反应蛋白与LDL:动脉粥样硬化角色一 | 第20-21页 |
| 1.4.3 C反应蛋白与单核,巨噬和泡沫细胞:动脉粥样硬化角色二 | 第21-22页 |
| 1.4.4 C反应蛋白与内皮细胞:动脉粥样硬化角色三 | 第22-23页 |
| 1.4.5 C反应蛋白与血小板和微粒:动脉粥样硬化角色四 | 第23页 |
| 1.4.6 C反应蛋白与补体:动脉粥样硬化角色五 | 第23-24页 |
| 1.4.7 C反应蛋白与动脉粥样硬化:另一种呼声 | 第24-25页 |
| 1.5 本文的选题依据及研究意义 | 第25-26页 |
| 1.6 具体实验方法 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第28页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 蛋白相关试剂 | 第28页 |
| 2.2 mCRP的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.1 透析袋的前处理 | 第28-29页 |
| 2.2.2 mCRP的制备 | 第29页 |
| 2.3 蛋白浓度的测定 | 第29-30页 |
| 2.4 蛋白电泳(1/20 SDS和全变性)及染色 | 第30-33页 |
| 2.4.1 SDS-PAGE:全变性电泳 | 第30-32页 |
| 2.4.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的染色 | 第32-33页 |
| 2.5 蛋白WB (Western blotting) | 第33-34页 |
| 2.6 无脂蛋白血清(LPDS)的制备 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-57页 |
| 3.1 立题背景及意义 | 第35-36页 |
| 3.2 mCRP在纯体系下的定量 | 第36-44页 |
| 3.2.1 pCRP与mCRP的区分 | 第36页 |
| 3.2.2 确定DDT(Dithiothreitol)还原mCRP的最适浓度 | 第36-38页 |
| 3.2.3 固定DDT终浓度,不同时间孵育mCRP对其还原效果的研究 | 第38-39页 |
| 3.2.4 固定还原剂浓度(30mM DTT)和还原时间(1h),对不同浓度mCRP还原效果的检验 | 第39-40页 |
| 3.2.5 排除封闭剂的效率不够,导致mCRP还原比例降低 | 第40页 |
| 3.2.6 排除还原剂DTT的效率不够,导致mCRP还原比例降低 | 第40-41页 |
| 3.2.7 加入非离子型表面活性剂,拟在还原体系下促进mCRP的还原 | 第41-42页 |
| 3.2.8 加入阴离子型表面活性剂,拟在还原体系下促进mCRP的还原 | 第42-43页 |
| 3.2.9 加入阳离子型表面活性剂,拟在还原体系下促进mCRP的还原 | 第43页 |
| 3.2.10 纯体系下mCRP的还原条件的总结 | 第43-44页 |
| 3.3 mCRP在血清体系下的定量 | 第44-48页 |
| 3.3.1 仅在还原剂DTT作用下,检验mCRP在血清中的还原效果 | 第44-46页 |
| 3.3.2 应用纯体系建立的含有表面活性剂的还原体系还原血清体系下mCRP | 第46页 |
| 3.3.3 再次使用强阴离子型表面活性剂SDS,拟促进mCRP的还原 | 第46-48页 |
| 3.4 pCRP在血清环境下失稳原因的探讨 | 第48-52页 |
| 3.4.1 分别调整DTT孵育时间及浓度,确定是否因时间及DTT浓度造成少量pCRP的还原 | 第48-49页 |
| 3.4.2 将血清封闭或还原并封闭,进一步探究是否因为血清中存在氧化还原酶造成了pCRP的还原 | 第49-50页 |
| 3.4.3 在血清体系下加入SDS,进一步探究是否因为血清中存在微粒对五聚体CRP造成解聚 | 第50-51页 |
| 3.4.4 将血清中的脂蛋白去除,以探究是否因为血清中的脂蛋白造成了pCRP的解聚和还原 | 第51-52页 |
| 3.5 pCRP在血清环境下失稳所贡献mCRP量 | 第52-54页 |
| 3.5.1 仅加还原剂的体系中,pCRP的解聚所贡献mCRP的量 | 第52-53页 |
| 3.5.2 在还原剂+SDS的体系中,pCRP的解聚所贡献mCRP的量 | 第53-54页 |
| 3.6 结论 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 在学期间的研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
