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洋桔梗过表达枸杞LcCHYB基因提高非生物胁迫耐受性的研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第一章 文献综述第8-19页
    1.1 类胡萝卜素代谢途径研究现状第8-14页
        1.1.1 类胡萝卜素类化合物第8页
        1.1.2 类胡萝卜素的生物学功能第8-9页
        1.1.3 高等植物类胡萝卜素代谢途径第9-10页
        1.1.4 类胡萝卜素与植物抗氧化机制第10-14页
            1.1.4.1 植物抗氧化途径第12页
            1.1.4.2 植物中各抗氧化机制的协同作用第12-13页
            1.1.4.3 类胡萝卜素与高等植物抗氧化机制的研究第13-14页
    1.2 洋桔梗研究进展第14-17页
        1.2.1 洋桔梗简介第14-15页
        1.2.2 洋桔梗组织培养技术研究进展第15-16页
        1.2.3 洋桔梗基因工程研究进展第16-17页
    1.3 研究意义第17-19页
第二章 洋桔梗再生体系的优化和抗生素浓度的确定第19-28页
    2.1 洋桔梗不定芽的诱导和植株再生体系第19-24页
        2.1.1 材料第19页
        2.1.2 实验方法第19-21页
            2.1.2.1 培养基配方及培养条件第19-21页
            2.1.2.2 洋桔梗叶片愈伤组织及不定芽的诱导第21页
            2.1.2.3 不定芽的生根第21页
            2.1.2.4 移栽第21页
        2.1.3 结果与分析第21-23页
            2.1.3.1 植物激素对不定芽生根的影响第21-23页
            2.1.3.2 移栽第23页
        2.1.4 结论第23-24页
    2.2 洋桔梗叶片卡纳霉素和头孢霉素筛选浓度的确定第24-28页
        2.2.1 实验材料第24页
        2.2.2 实验方法第24页
            2.2.2.1 卡纳霉素(Kn)对洋桔梗叶片诱导愈伤组织和不定芽的影响第24页
            2.2.2.2 头孢霉素(Cef)抑制农杆菌增殖浓度的确定第24页
        2.2.3 结果与讨论第24-26页
            2.2.3.1 卡纳霉素(Kn)对洋桔梗叶片诱导愈伤的影响第24-25页
            2.2.3.2 头孢霉素(Cef)抑制农杆菌增殖浓度的确定第25-26页
        2.2.4 结论第26-28页
第三章 农杆菌介导的洋桔梗叶盘转基因过程及分子检测第28-42页
    3.1 材料第28-32页
        3.1.1 植物材料与转化受体第28页
        3.1.2 质粒和农杆菌菌株第28页
        3.1.3 主要实验仪器第28页
        3.1.4 主要试剂第28-30页
        3.1.5 培养基第30-32页
    3.2 实验方法第32-38页
        3.2.1 外植体的获得第32页
        3.2.2 农杆菌侵染液的获得第32页
        3.2.3 洋桔梗叶盘的浸染转化第32页
        3.2.4 桔梗叶盘与农杆菌的共培养第32页
        3.2.5 转化细胞的筛选第32-33页
        3.2.6 不定芽的生根第33页
        3.2.7 卡纳霉素抗性不定芽的 PCR 验证第33-34页
        3.2.8 洋桔梗阳性苗叶片扩繁第34页
        3.2.9 洋桔梗阳性苗的移栽第34-35页
        3.2.10 洋桔梗阳性苗种子的收获及 T1 代转基因苗的培育第35页
        3.2.11 对 T1 代苗的进一步分子检测第35-38页
    3.3 结果与分析第38-40页
        3.3.1 洋桔梗抗性阳性苗的 PCR 检测结果第38页
        3.3.2 洋桔梗抗性种苗的筛选结果及逆转录 RT-RNA 分析第38-39页
        3.3.3 转基因洋桔梗表型的变化第39-40页
    3.4 讨论第40-42页
第四章 转基因洋桔梗氧化胁迫实验及相关生理指标的分析第42-55页
    4.1 材料第42-43页
        4.1.1 植物材料第42页
        4.1.2 主要试剂第42-43页
        4.1.3 主要仪器第43页
    4.2 实验方法第43-47页
        4.2.1 转基因型和野生型洋桔梗氧化胁迫实验第43-44页
        4.2.2 光合参数的测定第44-45页
        4.2.3 洋桔梗叶片总类胡萝卜素的提取及其含量的测定第45页
        4.2.4 高效液相色谱(HPLC)分析类胡萝卜素组成及含量第45-46页
        4.2.5 洋桔梗叶片 SOD、POD、CAT 和 MDA 的含量测定第46-47页
    4.3 结果与分析第47-53页
        4.3.1 洋桔梗叶片光合荧光参数第47-49页
        4.3.2 类胡萝卜素含量的测定第49-52页
        4.3.3 SOD、POD、CAT 和 MDA 值的分析第52-53页
    4.4 讨论第53-55页
第五章 结论与展望第55-57页
参考文献第57-64页
发表论文和参加科研情况说明第64-65页
致谢第65页

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