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基于RNA-Seq的野生蕉(Musa itinerans)果皮颜色差异形成的分子机制研究

缩写词第12-14页
摘要第14-20页
ABSTRACT第20-27页
第一章 引言第28-58页
    1 植物花青素研究概况第28-43页
        1.1 植物花青素与花青素苷第28-30页
        1.2 植物花青素苷的功能第30-31页
        1.3 植物花青素苷的提取和含量测定第31-34页
        1.4 植物花青素苷的生物合成途径及其调控第34-39页
        1.5 植物花青素苷合成的转录调控第39-43页
        1.6 环境因子对花青素苷合成的调控第43页
    2 转录组测序技术在观赏植物花青素研究中的应用第43-46页
        2.1 在花青素代谢通路关键基因分离的应用第44-45页
        2.2 在花青素分支调控中的应用第45页
        2.3 在花青素代谢分子调控上的应用第45-46页
        2.4 在花青素环境调控上的应用第46页
    3 植物花青素相关miRNA研究进展第46-48页
        3.1 高通量测序法在花青素miRNA研究中的应用第46-47页
        3.2 花青素合成相关的miRNA第47页
        3.3 花青素相关miRNA的功能研究第47-48页
        3.4 诱导花青素合成相关miRNA的因子第48页
    4 观赏植物lncRNA研究进展第48-50页
        4.1 观赏植物长链非编码RNA的预测第48-49页
        4.2 观赏植物长链非编码RNA的生物学功能第49-50页
    5 芭蕉属植物花青素及miRNA的研究现状第50-56页
        5.1 芭蕉属植物的分类地位及其重要性第50页
        5.2 芭蕉属植物花青素的种类和含量第50页
        5.3 芭蕉属植物花青素的功能研究第50-51页
        5.4 芭蕉属植物花青素苷的调控第51页
        5.5 芭蕉属植物miRNA的研究第51-56页
    6 本项目研究的意义和主要内容第56-58页
        6.1 本研究的意义第56-57页
        6.2 本研究的主要内容第57-58页
第二章 野生蕉果皮色素的分析与鉴定第58-75页
    第一节 野生蕉果皮色素相关代谢物的测定与分析第58-68页
        1 材料与方法第58-62页
            1.1 材料第58-59页
            1.2 方法第59-62页
        2 结果与分析第62-66页
            2.1 野生蕉果皮中花青素的初步定性第62-64页
            2.2 pH示差法测定参数的确定第64页
            2.3 不同提取液及提取方法对野生蕉果皮花青素含量测定的影响第64-65页
            2.4 不同颜色野生蕉果皮中的原花青素和类黄酮含量第65页
            2.5 不同颜色野生蕉果皮中的叶绿素和类胡萝卜素含量变化第65页
            2.6 不同颜色野生蕉果皮中的淀粉和蔗糖含量第65-66页
        3 讨论第66-68页
            3.1 野生蕉果皮中的色素差异第66-67页
            3.2 野生蕉果皮花青苷的提取和测定方法评价第67页
            3.3 蔗糖和淀粉是色素代谢重要的前体物质第67-68页
    第二节 HPLC法鉴定野生蕉果皮的花青苷种类第68-75页
        1 材料与方法第68-70页
            1.1 供试材料第68页
            1.2 试剂与仪器第68-69页
            1.3 试验方法第69-70页
        2 结果与分析第70-73页
            2.1 混合标准样品的色谱结果第70-71页
            2.2 标准曲线的绘制第71-72页
            2.3 野生蕉果皮的花青素含量测定第72-73页
        3 讨论第73-75页
            3.1 飞燕草色素是紫色野生蕉果皮的主要色素第73-74页
            3.2 野生蕉果皮中的花青素苷合成分支第74-75页
第三章 不同发育期野生蕉果皮色素及相关酶活性变化分析第75-85页
    第一节 不同发育期野生蕉果皮色素变化分析第75-81页
        1 材料与方法第75-76页
            1.1 材料第75页
            1.2 方法第75-76页
            1.3 试剂与仪器第76页
        2 结果与分析第76-79页
            2.1 标准曲线的绘制第76-77页
            2.2 不同发育程度野生蕉果皮中的花青素、原花青素和类黄酮含量变化第77-78页
            2.3 不同发育程度野生蕉果皮中的类胡萝卜素和总叶绿素含量变化第78页
            2.4 不同发育程度野生蕉果皮中各种色素物质含量的相关性第78-79页
        3 讨论第79-81页
            3.1 果实发育对野生蕉果皮色素代谢物的影响第79页
            3.2 果实发育过程中不同色素代谢物的相关性第79-81页
    第二节 不同发育期野生蕉果皮色素相关酶活性变化分析第81-85页
        1 材料与方法第81页
            1.1 材料第81页
            1.2 方法第81页
        2 结果与分析第81-83页
            2.1 不同发育程度野生蕉果皮花青素合成相关酶的活性变化第81-82页
            2.2 花青素、原花青素和类黄酮与花青素合成关键酶活性的相关性分第82-83页
        3 讨论第83-85页
            3.1 野生蕉果实发育中果皮花青素合成相关酶活性的变化规律第83页
            3.2 野生蕉果皮花青苷积累与各酶活性之间的关系第83-85页
第四章 野生蕉果皮不同颜色部位的转录组学分析第85-133页
    第一节 野生蕉果皮不同颜色部位的转录组学分析第85-107页
        1 材料与方法第85-87页
            1.1 试验材料第85页
            1.2 RNA提取第85-86页
            1.3 文库的构建及高通量测序第86页
            1.4 生物信息学分析第86-87页
        2 结果与分析第87-105页
            2.1 RNA提取质量检测第87-88页
            2.2 测序质量评估第88页
            2.3 测序序列与参考基因组的比对效率第88-90页
            2.4 基因结构分析第90-91页
            2.5 新基因的挖掘与功能注释第91-96页
            2.6 基因表达与差异表达基因的筛选第96-97页
            2.7 差异表达基因的功能注释和富集分析第97-105页
        3 讨论第105-107页
            3.1 野生蕉果皮转录组数据库的构建评价第105页
            3.2 野生蕉果皮转录组新基因的挖掘第105-106页
            3.3 野生蕉不同颜色果皮转录组的差异第106-107页
    第二节 野生蕉果皮花青素相关基因的分析第107-122页
        1 材料与方法第107-108页
            1.1 野生蕉果皮花青素相关基因的筛选第107页
            1.2 差异基因的表达分析第107页
            1.3 花青素合成相关的转录因子分析第107-108页
            1.4 差异表达基因蛋白互作网络分析第108页
        2 结果与分析第108-119页
            2.1 野生蕉果皮花青素合成相关基因的鉴定第108-109页
            2.2 野生蕉果皮色素相关差异表达基因的同源性比对第109-112页
            2.3 转录组中关于转录因子的预测第112-115页
            2.4 与野生蕉果皮花青素合成相关的转录因子分析第115-116页
            2.5 野生蕉果皮花色苷生物合成相关差异表达基因蛋白互作网络分析第116-118页
            2.6 野生蕉果皮花青素苷合成途径第118-119页
        3 讨论第119-122页
            3.1 野生蕉果皮中花色苷生物合成相关基因的挖掘第119-120页
            3.2 参与野生蕉果皮花青素生物合成的转录因子第120-121页
            3.3 野生蕉果皮花青素苷合成途径第121-122页
    第三节 野生蕉果皮MYB基因的生物信息学分析第122-133页
        1 材料与方法第122-123页
            1.1 野生蕉果皮MYB基因的获得第122页
            1.2 野生蕉果皮R2R3-MYB基因的结构域分析第122页
            1.3 野生蕉转录组R2R3-MYB基因系统发育分析第122-123页
        2 结果与分析第123-131页
            2.1 野生蕉果皮R2R3-MYB基因的鉴定第123-124页
            2.2 野生蕉果皮R2R3-MYB蛋白基序结构分析第124-126页
            2.3 野生蕉转录组R2R3-MYB基因保守元件分析第126-127页
            2.4 野生蕉转录组R2R3-MYB基因系统发育分析第127-131页
        3 讨论第131-133页
            3.1 野生蕉果皮R2R3-MYB基因及其序列保守性第131页
            3.2 野生蕉果皮中参与花青素合成的MYB基因推测第131-133页
第五章 野生蕉果皮不同颜色部位的lncRNA分析第133-149页
    1 材料与方法第133-135页
        1.1 转录本组装第133页
        1.2 lncRNA鉴定与分析第133页
        1.3 LncRNA靶基因的预测第133-134页
        1.4 LncRNA表达量分析和差异表达LncRNA筛选第134页
        1.5 差异表达lncRNA靶基因的功能注释和富集分析第134页
        1.6 lncRNA保守性分析及已知lncRNA的鉴定第134页
        1.7 差异表达lncRNA靶基因蛋白质互作网络构建第134页
        1.8 mRNA与lncRNA 比较分析第134-135页
    2 结果与分析第135-147页
        2.1 转录本的拼接第135页
        2.2 野生蕉果皮lncRNA的筛选和鉴定第135-136页
        2.3 野生蕉lncRNA序列结构分析第136-139页
        2.4 野生蕉不同颜色果皮差异表达lncRNA筛选第139-140页
        2.5 差异表达lncRNA靶基因的预测及功能注释第140-143页
        2.6 差异表达lncRNA靶基因的富集分析第143-146页
        2.7 野生蕉果皮差异表达lncRNA靶基因蛋白互作网络分析第146页
        2.8 lncRNA与mRNA差异表达交互式分析第146-147页
    3 讨论第147-149页
        3.1 野生蕉果皮lncRNA的序列特征第148页
        3.2 野生蕉果皮lncRNA表达模式及功能预测第148页
        3.3 野生蕉果皮差异表达lncRNA靶基因的蛋白互作网络预测第148-149页
第六章 野生蕉果皮不同颜色部位的miRNA分析第149-174页
    1 材料与方法第149-151页
        1.1 小RNA文库的构建及高通量测序第149-150页
        1.2 生物信息学分析第150页
        1.3 miRNA差异表达分析及靶基因注释和功能富集第150-151页
    2 结果与分析第151-170页
        2.1 测序数据质量评估第151-153页
        2.2 不同颜色野生蕉果皮的小RNA差异分析第153页
        2.3 野生蕉果皮miRNA的鉴定第153-157页
        2.4 miRNA的表达分析和差异基因筛选第157-160页
        2.5 miRNA靶基因预测和差异表达miRNA靶基因注释第160-163页
        2.6 差异表达miRNA靶基因GO功能和KEGG通路富集分析第163-164页
        2.7 野生蕉果皮miRNA-mRNA联合分析第164-168页
        2.8 野生蕉果皮miRNA-lncRNA联合分析第168-169页
        2.9 野生蕉果皮花青素相关miRNA-mRNA-lncRNA调控网络分析第169-170页
    3 讨论第170-174页
        3.1 野生蕉果皮miRNA的品种特异性第170-171页
        3.2 野生蕉果皮miRNA及其靶基因的调控第171页
        3.3 miRNA对野生蕉果皮花青素合成的调控作用第171-172页
        3.4 mRNA-miRNA-lncRNA互作调控网络第172-174页
第七章 野生蕉果皮花青素合成相关基因的克隆及表达分析第174-226页
    第一节 野生蕉果皮花青素合成相关基因的克隆与生物信息学分析第174-211页
        1 材料与方法第174-176页
            1.1 材料第174页
            1.2 方法第174-176页
        2 结果与分析第176-208页
            2.1 野生蕉果皮花青素合成差异表达基因的克隆第176-177页
            2.2 花青素合成关键基因的序列分析第177-208页
        3 讨论第208-211页
            3.1 野生蕉果皮中花青素合成上游基因(EBGs)的克隆第209-210页
            3.2 野生蕉果皮中花青素合成下游基因(LBGs)及转运蛋白的克隆第210-211页
            3.3 与花青素苷合成相关的MYB基因克隆第211页
    第二节 野生蕉果皮花青素苷合成相关基因的表达模式分析第211-219页
        1 材料与方法第211-214页
            1.1 材料第211-212页
            1.2 试剂与仪器第212页
            1.3 方法第212-214页
        2 结果与分析第214-218页
            2.1 关键酶基因表达模式分析第214-216页
            2.2 调节基因表达模式分析第216-218页
        3 讨论第218-219页
            3.1 野生蕉果皮中花青素合成结构基因的表达模式分析第218-219页
            3.2 野生蕉果皮中花青素相关转录因子基因表达模式分析第219页
    第三节 miRNA及其靶基因qRT-PCR检测第219-226页
        1 材料与方法第219-221页
            1.1 材料第219页
            1.2 试剂与仪器第219页
            1.3 方法第219-221页
        2 结果与分析第221-223页
        3 讨论第223-226页
            3.1 野生蕉果皮miRNA及其靶基因的表达模式第224页
            3.2 野生蕉果皮中与花青素合成相关的miRNA调控第224-226页
第八章 结论与展望第226-234页
    1 研究小结第226-232页
        1.1 野生蕉果皮色素的分析与鉴定第226页
        1.2 不同发育期野生蕉果皮色素及相关生理生化指标的变化分析第226-227页
        1.3 野生蕉果皮不同颜色部位的转录组学分析第227-229页
        1.4 野生蕉果皮不同颜色部位的lncRNA分析第229页
        1.5 野生蕉果皮不同颜色部位的miRNA分析第229-230页
        1.6 野生蕉果皮花青素合成相关基因的克隆及表达分析第230页
        1.7 野生蕉果皮mRNA-miRNA-lncRNA的互作调控网络第230-231页
        1.8 野生蕉果皮花青素合成及调控途径第231-232页
    2 创新点第232-233页
    3 展望第233-234页
参考文献第234-254页
附录1 克隆得到的野生蕉果皮花青素相关基因的cDNA序列第254-268页
附录2 克隆得到的野生蕉果皮花青素相关基因的氨基酸序列第268-273页
附录3 野生蕉果皮中预测的新miRNA序列信息第273-276页
附录4 野生蕉果皮差异miRNA-lncRNA互作网络第276-277页
附录5 野生蕉果皮差异miRNA-mRNA互作网络第277-278页
攻读学位期间的学术论文与研究成果第278-279页
致谢第279页

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