| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 缩略词和术语表 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| 1. 谷胱甘肽的生理生化性质 | 第12-14页 |
| 1.1 理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2 生理功能 | 第13-14页 |
| 2. 谷胱甘肽在细胞内的代谢途径 | 第14页 |
| 3. 谷胱甘肽的生产方法 | 第14-16页 |
| 3.1 提取法 | 第14-15页 |
| 3.2 化学合成 | 第15页 |
| 3.3 酶法 | 第15页 |
| 3.4 发酵法 | 第15-16页 |
| 4. 谷胱甘肽的定量方法 | 第16-17页 |
| 4.1 分光光度计法 | 第16页 |
| 4.2 荧光试验法 | 第16页 |
| 4.3 HPLC法 | 第16-17页 |
| 5. 酵母细胞中谷胱甘肽的转运体系 | 第17-18页 |
| 5.1 外排转运蛋白 | 第17页 |
| 5.2 内向转运蛋白 | 第17-18页 |
| 6 谷胱甘肽的应用 | 第18-19页 |
| 7 毕赤酵母表达系统 | 第19-20页 |
| 7.1 毕赤酵母简介 | 第19-20页 |
| 7.2 GAP高效表达体系 | 第20页 |
| 8 本论文立项意义 | 第20-21页 |
| 第2章 实验方法 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.1.3 引物 | 第22-24页 |
| 2.1.4 培养条件 | 第24-25页 |
| 2.1.5 酶及生化试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.6 常用试剂配制 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.0 PCR程序 | 第26-27页 |
| 2.2.1 质粒抽提、酶切、电泳、胶回收、DNA片段连接 | 第27-28页 |
| 2.2.2 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28页 |
| 2.2.3 大肠杆菌转化 | 第28页 |
| 2.2.4 毕赤酵母电转化感受态的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.5 毕赤酵母电转化 | 第29页 |
| 2.2.6 酵母基因组抽提 | 第29-30页 |
| 2.2.7 酵母总RNA提取 | 第30页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 2.2.9 谷胱甘肽的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.10 发酵罐发酵 | 第32-33页 |
| 2.2.11 HPLC测定谷胱甘肽 | 第33-34页 |
| 第3章 谷胱甘肽高产工程菌的构建 | 第34-46页 |
| 3.1 转运蛋白生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.2 载体构建 | 第36-39页 |
| 3.3 菌株构建 | 第39-41页 |
| 3.4 基因表达水平分析 | 第41-42页 |
| 3.5 谷胱甘肽的HPLC检测 | 第42-43页 |
| 3.6 摇瓶发酵 | 第43页 |
| 3.7 发酵罐发酵 | 第43-46页 |
| 第4章 结论与展望 | 第46-48页 |
| 4.1 本文研究成果 | 第46页 |
| 4.2 展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读硕士学位期间的主要研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |