摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
实验技术路线 | 第11-12页 |
前言 | 第12-14页 |
1 材料与方法 | 第14-31页 |
1.1 实验材料 | 第14-18页 |
1.1.1 细胞系 | 第14页 |
1.1.2 药物 | 第14页 |
1.1.3 主要实验仪器 | 第14-15页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第15页 |
1.1.5 主要实验抗体 | 第15页 |
1.1.6 主要实验试剂盒 | 第15-16页 |
1.1.7 实验常用工作液配制 | 第16-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-30页 |
1.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
1.2.2 SiO_2处理RAW264.7细胞方法 | 第19-20页 |
1.2.3 电子显微镜观察RAW264.7细胞形态 | 第20-21页 |
1.2.4 Real-time PCR检测mRNA变化 | 第21-24页 |
1.2.5 Western bloting检测蛋白质的变化 | 第24-29页 |
1.2.6 MTT法测定细胞增殖 | 第29页 |
1.2.7 DAPI染色观察细胞凋亡 | 第29页 |
1.2.8 流式细胞仪中Annexin V-FITC and PI Kit检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
1.3 统计学处理 | 第30-31页 |
2 结果 | 第31-45页 |
2.1 电镜观察SiO_2诱导RAW264.7细胞的超微形态改变 | 第31-33页 |
2.2 SiO_2诱导RAW264.7细胞内质网应激标志物的表达 | 第33-35页 |
2.2.1 Real-time PCR检测内质网应激标志物mRNA的表达 | 第33-34页 |
2.2.2 Western blot检测内质网应激标志物蛋白的表达 | 第34-35页 |
2.3 SiO_2诱导RAW264.7细胞发生凋亡 | 第35-38页 |
2.3.1 MTT法检测细胞增殖 | 第35-36页 |
2.3.2 DAPI法观察细胞凋亡情况 | 第36-37页 |
2.3.3 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第37-38页 |
2.3.4 Western blot检测细胞中cleaved caspase-3蛋白的表达 | 第38页 |
2.4 使用特异性阻断剂4-PBA抑制内质网应激 | 第38-40页 |
2.4.1 Real time PCR验证4-PBA抑制内质网应激标志物mRNA的表达 | 第38-40页 |
2.4.2 Western blot验证4-PBA抑制内质网应激标志物蛋白的表达 | 第40页 |
2.5 使用特异性阻断剂4-PBA抑制细胞发生凋亡 | 第40-45页 |
2.5.1 MTT法检测使用4-PBA后细胞增殖 | 第40-41页 |
2.5.2 DAPI法观察使用4-PBA后细胞凋亡情况 | 第41-43页 |
2.5.3 流式细胞术检测使用4-PBA后细胞凋亡率 | 第43-44页 |
2.5.4 Western blot检测使用4-PBA后细胞中cleaved caspase-3蛋白的表达 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-50页 |
4 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
综述 | 第57-64页 |
参考文献 | 第62-64页 |
攻读学位期间主要成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |