| 摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-18页 |
| 1 前言 | 第18-33页 |
| ·高温胁迫对植物的影响 | 第18-21页 |
| ·高温对种子萌发的影响 | 第18-19页 |
| ·高温对植物光合作用的影响 | 第19-20页 |
| ·高温对植物生物膜的影响 | 第20页 |
| ·氧化胁迫和抗氧化剂 | 第20-21页 |
| ·甜菜碱的生理功能 | 第21-24页 |
| ·甜菜碱的渗透调节作用 | 第21-22页 |
| ·甜菜碱的“非渗透调节作用” | 第22-24页 |
| ·甜菜碱的生物合成途径 | 第24-25页 |
| ·甜菜碱基因工程和外源甜菜碱研究与应用 | 第25-27页 |
| ·甜菜碱影响基因表达 | 第27-28页 |
| ·甜菜碱、热激蛋白与植物耐热性的关系 | 第28-30页 |
| ·高温、甜菜碱和 D1 蛋白的关系 | 第30-31页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-55页 |
| ·实验材料与处理 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·材料的培养和处理 | 第33-34页 |
| ·番茄种子的处理 | 第33页 |
| ·番茄植株的培养和处理 | 第33-34页 |
| ·菠菜的处理 | 第34页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·酶和生化试剂 | 第34页 |
| ·PCR 引物 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-48页 |
| ·总RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·反转录获得 CDNA 第一条链 | 第36-37页 |
| ·BADH 基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·NORTHERN 杂交分析 | 第38-41页 |
| ·总RNA 的提取 | 第38页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第38-39页 |
| ·转膜 | 第39页 |
| ·预杂交 | 第39-40页 |
| ·探针的制备 | 第40页 |
| ·杂交 | 第40-41页 |
| ·洗膜 | 第41页 |
| ·放射自显影 | 第41页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第41-46页 |
| ·真核载体的构建 | 第41页 |
| ·连接 | 第41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第42页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第42-43页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·回收 | 第44页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第44-45页 |
| ·利用农杆菌介导转化番茄 | 第45-46页 |
| ·转基因番茄植株的PCR 检测 | 第46-48页 |
| ·CTAB 小量法提取基因组 DNA | 第46-47页 |
| ·转基因植株的PCR 筛选 | 第47-48页 |
| ·蛋白杂交分析 | 第48-52页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第48页 |
| ·类囊体膜的制备 | 第48-49页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第49-50页 |
| ·半干法蛋白转移 | 第50-51页 |
| ·封闭及杂交 | 第51-52页 |
| ·显色反应 | 第52页 |
| ·尿素- SDS-PAGE | 第52页 |
| ·生理指标的测定 | 第52-54页 |
| ·甜菜碱含量的测定 | 第52-53页 |
| ·光合速率的测定 | 第53页 |
| ·调制式荧光仪荧光参数的测定 | 第53页 |
| ·快速叶绿素荧光诱导曲线的测定 | 第53-54页 |
| ·超氧阴离子自由基的测定 | 第54页 |
| ·丙二醛含量和相对电导率的测定 | 第54页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第54页 |
| ·统计分析 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-93页 |
| ·甜菜碱提高番茄种子和幼苗的耐热性 | 第55-66页 |
| ·转 CODA 基因番茄种子中甜菜碱的含量 | 第55页 |
| ·吸胀时期短时间温度处理对番茄种子萌发率的影响 | 第55-56页 |
| ·吸胀时期高温处理对番茄种子电解质外渗的影响 | 第56-57页 |
| ·种子萌发时期高温胁迫对种子萌发率的影响 | 第57-59页 |
| ·外源甜菜碱处理对高温胁迫下野生型番茄种子萌发率的影响 | 第59-61页 |
| ·高温胁迫对番茄种子中甜菜碱含量和 CODA 基因转录的影响 | 第61-62页 |
| ·高温胁迫对番茄种子中热激蛋白基因的转录和表达的影响 | 第62-63页 |
| ·高温胁迫对野生型与转 CODA 基因番茄幼苗的影响 | 第63-66页 |
| ·野生型和转 CODA 基因番茄对不同温度的响应 | 第66-69页 |
| ·不同温度对野生型和转 CODA 基因番茄叶片净光合速率和表观量子效率的影响 | 第66-67页 |
| ·不同温度对野生型和转CODA基因番茄叶片PSII光化学效率的影响 | 第67-68页 |
| ·不同温度对野生型与转codA 基因番茄叶片丙二醛（MDA）含量和相对电导率的影响 | 第68-69页 |
| ·野生型和转CODA 基因番茄对45 ℃高温胁迫的响应 | 第69-78页 |
| ·45 ℃高温胁迫对野生型和转 CODA 基因番茄净光合速率、表光量子效率和羧化效率的影响 | 第69-71页 |
| ·45 ℃高温胁迫对野生型和转 CODA 基因番茄PSII光化学活性的影响 | 第71-72页 |
| ·45 ℃高温胁迫对野生型与转 CODA 基因番茄叶片膜脂过氧化和膜透性的影响 | 第72页 |
| ·45 ℃高温胁迫对野生型和转CODA 基因番茄叶片H_2O_2 含量和O_2~_产生速率的影响 | 第72-73页 |
| ·45 ℃高温胁迫对野生型和转CODA 基因番茄叶片抗氧化酶活性影响 | 第73-75页 |
| ·45 ℃高温胁迫对CAT1 基因表达的影响 | 第75页 |
| ·高温胁迫对野生型与转CODA 基因番茄叶片HSP70 含量的影响 | 第75-77页 |
| ·45 ℃高温胁迫对野生型与转CODA 基因番茄叶片中D1 蛋白含量的影响 | 第77-78页 |
| ·外源甜菜碱对野生型番茄在45 ℃高温胁迫的响应 | 第78-86页 |
| ·外源甜菜碱对光下和黑暗 45 ℃高温处理过程中野生型番茄净光合速率和表观量子效率的影响 | 第78-79页 |
| ·外源甜菜碱对45 ℃光下和黑暗时野生型番茄最大光化学效率和最小荧光的影响 | 第79-80页 |
| ·外源甜菜碱对高温胁迫下野生型番茄叶片快速荧光诱导动力学曲线（OJIP）的影响 | 第80-83页 |
| ·外源甜菜碱对45 ℃高温胁迫下野生型番茄MDA 含量和相对电导率的影响 | 第83页 |
| ·外源甜菜碱对45 ℃高温胁迫下野生型番茄抗氧化酶活性的影响 | 第83-85页 |
| ·外源甜菜碱对野生型番茄叶片中HSP70 含量的影响 | 第85页 |
| ·外源甜菜碱对45 ℃高温胁迫下野生型番茄叶片中D1 蛋白的含量的影响 | 第85-86页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶（BADH）基因的功能分析 | 第86-93页 |
| ·高温和盐胁迫对菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因表达的影响 | 第86页 |
| ·BADH 基因的克隆 | 第86-87页 |
| ·表达载体的构建 | 第87-88页 |
| ·番茄的遗传转化及转基因番茄植株的PCR 检测 | 第88-89页 |
| ·转 BADH 基因番茄的 WESTERN BLOT 检测和甜菜碱含量的测定 | 第89-90页 |
| ·转BADH 基因番茄叶片净光合速率和最大光化学效率对45 ℃高温胁迫的响应 | 第90-91页 |
| ·45 ℃高温胁迫下转BADH 基因番茄叶片中HSP70 含量和D1 蛋白含量变化 | 第91-93页 |
| 4 讨论 | 第93-101页 |
| ·正常情况下甜菜碱和CODA 基因对番茄种子萌发的影响 | 第93页 |
| ·高温胁迫下甜菜碱对种子萌发的影响 | 第93-94页 |
| ·甜菜碱对生物膜的影响 | 第94-95页 |
| ·甜菜碱对代谢酶和抗氧化酶影响 | 第95-96页 |
| ·甜菜碱和热激蛋白的关系 | 第96-97页 |
| ·甜菜碱和HSP70 对D1 蛋白的保护作用 | 第97-99页 |
| ·甜菜碱与基因的表达的关系 | 第99-101页 |
| 5 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-117页 |
| 附录 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第119页 |
