中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
(一)前言 | 第13-15页 |
(二)材料和方法 | 第15-27页 |
1.材料 | 第15-16页 |
1.1 实验对象、药品和主要试剂 | 第15-16页 |
1.2 主要仪器 | 第16页 |
2.方法 | 第16-27页 |
2.1 实验动物饲养及处理 | 第16页 |
2.2 细胞培养和处理 | 第16-17页 |
2.3 细胞毒性检测 | 第17-18页 |
2.3.1 MTT法检测细胞生存率 | 第17页 |
2.3.2 LDH释放检测 | 第17-18页 |
2.4 组织细胞中自噬小体观察 | 第18页 |
2.5 蛋白表达分析 | 第18-21页 |
2.5.1 蛋白质提取及BCA法蛋白定量 | 第18-19页 |
2.5.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第19-20页 |
2.5.3 转膜 | 第20-21页 |
2.5.4 封闭及孵育抗体 | 第21页 |
2.5.5 显色反应 | 第21页 |
2.5.6 结果分析 | 第21页 |
2.6 肝脏巨噬细胞聚集检测 | 第21-22页 |
2.7 细胞内溶酶体及CTSB分布检测 | 第22-23页 |
2.8 脂质聚集检测 | 第23页 |
2.8.1 肝组织冰冻切片油红O染色 | 第23页 |
2.8.2 HepG2细胞油红O染色 | 第23页 |
2.9 组织病理改变检测 | 第23-24页 |
2.10 非酒精性脂肪性肝炎评分 | 第24页 |
2.11 脂质相关基因表达分析 | 第24-26页 |
2.11.1 总RNA提取 | 第24页 |
2.11.2 RNA反转录反应 | 第24-25页 |
2.11.3 qPCR反应 | 第25-26页 |
2.11.4 结果分析 | 第26页 |
2.12 细胞焦亡的检测 | 第26-27页 |
2.12.1 小鼠肝组织焦亡检测 | 第26页 |
2.12.2 HepG2细胞焦亡检测 | 第26-27页 |
2.13 统计分析 | 第27页 |
(三)结果 | 第27-38页 |
1.体内实验部分 | 第27-31页 |
1.1 牛磺酸可以缓解三氧化二砷暴露导致的小鼠非酒精性脂肪性肝炎 | 第27-29页 |
1.2 牛磺酸抑制三氧化二砷诱导的自噬水平上调、NLRP3炎症小体激活以及细胞焦亡 | 第29-31页 |
2.体外实验部分 | 第31-38页 |
2.1 三氧化二砷导致肝细胞焦亡依赖于NLRP3炎症小体的激活 | 第31-32页 |
2.2 组织蛋白酶B介导三氧化二砷诱导的NLRP3炎症小体激活及细胞焦亡 | 第32-34页 |
2.3 三氧化二砷诱导的肝细胞自噬水平上调与胞浆组织蛋白酶B增加以及后续的NLRP3炎症小体激活和细胞焦亡密切相关 | 第34-37页 |
2.4 牛磺酸通过抑制自噬-炎症小体通路缓解三氧化二砷诱导的肝细胞炎症及焦亡 | 第37-38页 |
(四)讨论 | 第38-41页 |
(五)结论 | 第41-42页 |
(六)参考文献 | 第42-48页 |
综述 | 第48-59页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录 | 第59-60页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |