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三氧化二砷导致小鼠非酒精性脂肪性肝炎及牛磺酸保护作用的研究

中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
(一)前言第13-15页
(二)材料和方法第15-27页
    1.材料第15-16页
        1.1 实验对象、药品和主要试剂第15-16页
        1.2 主要仪器第16页
    2.方法第16-27页
        2.1 实验动物饲养及处理第16页
        2.2 细胞培养和处理第16-17页
        2.3 细胞毒性检测第17-18页
            2.3.1 MTT法检测细胞生存率第17页
            2.3.2 LDH释放检测第17-18页
        2.4 组织细胞中自噬小体观察第18页
        2.5 蛋白表达分析第18-21页
            2.5.1 蛋白质提取及BCA法蛋白定量第18-19页
            2.5.2 SDS-PAGE凝胶电泳第19-20页
            2.5.3 转膜第20-21页
            2.5.4 封闭及孵育抗体第21页
            2.5.5 显色反应第21页
            2.5.6 结果分析第21页
        2.6 肝脏巨噬细胞聚集检测第21-22页
        2.7 细胞内溶酶体及CTSB分布检测第22-23页
        2.8 脂质聚集检测第23页
            2.8.1 肝组织冰冻切片油红O染色第23页
            2.8.2 HepG2细胞油红O染色第23页
        2.9 组织病理改变检测第23-24页
        2.10 非酒精性脂肪性肝炎评分第24页
        2.11 脂质相关基因表达分析第24-26页
            2.11.1 总RNA提取第24页
            2.11.2 RNA反转录反应第24-25页
            2.11.3 qPCR反应第25-26页
            2.11.4 结果分析第26页
        2.12 细胞焦亡的检测第26-27页
            2.12.1 小鼠肝组织焦亡检测第26页
            2.12.2 HepG2细胞焦亡检测第26-27页
        2.13 统计分析第27页
(三)结果第27-38页
    1.体内实验部分第27-31页
        1.1 牛磺酸可以缓解三氧化二砷暴露导致的小鼠非酒精性脂肪性肝炎第27-29页
        1.2 牛磺酸抑制三氧化二砷诱导的自噬水平上调、NLRP3炎症小体激活以及细胞焦亡第29-31页
    2.体外实验部分第31-38页
        2.1 三氧化二砷导致肝细胞焦亡依赖于NLRP3炎症小体的激活第31-32页
        2.2 组织蛋白酶B介导三氧化二砷诱导的NLRP3炎症小体激活及细胞焦亡第32-34页
        2.3 三氧化二砷诱导的肝细胞自噬水平上调与胞浆组织蛋白酶B增加以及后续的NLRP3炎症小体激活和细胞焦亡密切相关第34-37页
        2.4 牛磺酸通过抑制自噬-炎症小体通路缓解三氧化二砷诱导的肝细胞炎症及焦亡第37-38页
(四)讨论第38-41页
(五)结论第41-42页
(六)参考文献第42-48页
综述第48-59页
    参考文献第53-59页
附录第59-60页
攻读学位期间发表文章情况第60-61页
致谢第61-62页

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