| 致谢 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 材料与方法 | 第17-39页 |
| 1 菌株与质粒 | 第17-18页 |
| 1.1 菌株 | 第17页 |
| 1.2 质粒 | 第17-18页 |
| 2 培养基 | 第18-19页 |
| 2.1 YPD培养基 | 第18页 |
| 2.2 YPAD培养基 | 第18页 |
| 2.3 YNB培养基 | 第18-19页 |
| 2.4 LB培养基 | 第19页 |
| 2.5 发酵培养基 | 第19页 |
| 3 主要试剂及溶液 | 第19-20页 |
| 4 主要仪器 | 第20-21页 |
| 5 实验方法 | 第21-39页 |
| 5.1 菌株耐受性比较 | 第21页 |
| 5.2 发酵试验 | 第21页 |
| 5.3 DNA分子操作 | 第21-28页 |
| 5.3.1 大肠杆菌质粒提取 | 第21-22页 |
| 5.3.2 酵母基因组DNA提取 | 第22-23页 |
| 5.3.3 聚合酶链反应 | 第23-25页 |
| 5.3.4 目的条带的割胶回收 | 第25-26页 |
| 5.3.5 质粒及PCR产物酶切 | 第26页 |
| 5.3.6 DNA与质粒的连接 | 第26页 |
| 5.3.7 大肠杆菌转化 | 第26-27页 |
| 5.3.7.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 5.3.7.2 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| 5.3.8 酵母细胞醋酸锂法转化 | 第27-28页 |
| 5.4 RNA测序(RNA-Seq) | 第28页 |
| 5.5 PFGE(脉冲场凝胶电泳)对酵母菌株的核型分析 | 第28-30页 |
| 5.5.1 酵母菌染色体DNA样品制备 | 第28-30页 |
| 5.5.2 脉冲场凝胶电泳(PFGE) | 第30页 |
| 5.6 比较基因组杂交(aCGH) | 第30页 |
| 5.7 荧光定量PCR | 第30-33页 |
| 5.7.1 酵母RNA提取 | 第30-31页 |
| 5.7.2 RNA反转录 | 第31-32页 |
| 5.7.3 定量PCR反应体系及程序 | 第32-33页 |
| 5.8 蛋白质免疫印迹分析 | 第33-39页 |
| 5.8.1 蛋白样品的制备 | 第33-34页 |
| 5.8.2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-36页 |
| 5.8.2.1 玻璃板的清洗 | 第34页 |
| 5.8.2.2 分离胶的配制 | 第34-35页 |
| 5.8.2.3 浓缩胶的制备 | 第35页 |
| 5.8.2.4 加样 | 第35-36页 |
| 5.8.2.5 电泳 | 第36页 |
| 5.8.2.6 切胶 | 第36页 |
| 5.8.3 转膜 | 第36-37页 |
| 5.8.4 封闭 | 第37页 |
| 5.8.5 抗体孵育 | 第37页 |
| 5.8.6 显色 | 第37-39页 |
| 结果与讨论 | 第39-54页 |
| 1 YFL052W在工业菌株中的表型效应 | 第39-43页 |
| 1.1 工业菌株ZK2和YJS329的表型比较 | 第39-40页 |
| 1.2 比较基因组分析 | 第40-41页 |
| 1.3 YFL052W对工业菌株耐性和发酵性能的影响 | 第41-43页 |
| 2 YFL052W的表达调控和功能研究 | 第43-54页 |
| 2.1 YFL052W在不同条件下的表达分析 | 第43-45页 |
| 2.2 RNA-Seq比较野生型菌株BY4741和YFL052W缺失菌株表达谱 | 第45-49页 |
| 2.2.1 YFL052W基因敲除对菌株耐性和生长的影响 | 第45-47页 |
| 2.2.2 RNA-Seq结果 | 第47-49页 |
| 2.2.2.1 细胞分裂以及细胞周期调控基因 | 第48-49页 |
| 2.2.2.2 细胞壁相关基因 | 第49页 |
| 2.2.2.3 代谢过程相关基因 | 第49页 |
| 2.2.2.4 组织过程相关基因 | 第49页 |
| 2.3 Yfl052wp参与细胞壁蛋白的表达调控 | 第49-52页 |
| 2.4 YFL052W受其他转录因子的调控 | 第52-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 创新点 | 第55页 |
| 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 文献综述 | 第63-84页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第84页 |
