| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语说明 | 第9-11页 |
| 实验技术路线 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 1. 实验材料 | 第16-21页 |
| 1.1 细胞株 | 第16页 |
| 1.2 细菌株 | 第16页 |
| 1.3 质粒 | 第16-17页 |
| 1.4 主要试剂及来源 | 第17-18页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 1.6 常用试剂配制 | 第19-21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-47页 |
| 2.1 生物信息学分析HmiR-27b与靶基因EN2的相关性 | 第21-22页 |
| 2.2 EN2-3’UTR表达载体构建 | 第22-33页 |
| 2.3 HmiR-27b表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.4 实时荧光定量RT-PCR检测miR-27b表达质粒在HEK-293T细胞中的表达 | 第36-40页 |
| 2.5 HmiR-27b调控EN2基因的靶点验证(双荧光素酶活性检测实验) | 第40-44页 |
| 2.6 Western Blot | 第44-47页 |
| 3. 实验结果 | 第47-67页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第47-49页 |
| 3.2 EN2-3’UTR表达载体克隆 | 第49-53页 |
| 3.3 HmiR-27b表达载体克隆及其在真核细胞的表达 | 第53-62页 |
| 3.4 HmiR-27b调控EN2基因的验证 | 第62-64页 |
| 3.5 HmiR-27b调控EN2蛋白表达 | 第64-67页 |
| 4. 讨论 | 第67-72页 |
| 5. 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 综述 | 第81-94页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
