| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一部分 ECSOD基因表达载体的构建并转染至骨髓间充质干细胞的实验研究 | 第15-38页 |
| 1 材料与方法 | 第15-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-19页 |
| 1.1.1 实验仪器 | 第15-16页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第16-18页 |
| 1.1.3 溶液配制 | 第18-19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-28页 |
| 1.2.1 ECSOD基因表达载体构建 | 第19-22页 |
| 1.2.2 ECSOD基因表达载体转染骨髓间充质干细胞 | 第22-26页 |
| 1.2.3 MTT法测定ECSOD-MSCs的增殖能力 | 第26页 |
| 1.2.4 EDU检测ECSOD-MSCs增殖活力 | 第26-27页 |
| 1.2.5 转染后western blot印记检测ECSOD蛋白的表达 | 第27-28页 |
| 2 实验结果 | 第28-36页 |
| 2.1 ECSOD过表达载体 | 第28页 |
| 2.2 PCR产物及载体酶切结果 | 第28-29页 |
| 2.3 PCR产物酶切后连接到线性的真核表达载体中 | 第29-30页 |
| 2.4 ECSOD基因表达载体转染MSCs | 第30-32页 |
| 2.4.1 骨髓间充质干细胞体外培养及生长方式观察： | 第30-31页 |
| 2.4.2 细胞表型鉴定结果 | 第31-32页 |
| 2.5 GV230-EGFP-ECSOD基因转染MSCS效率 | 第32-33页 |
| 2.6 表达后对细胞活力无影响 | 第33-34页 |
| 2.6.1 MTT法测定ECSOD-MSCs的增殖能力 | 第33-34页 |
| 2.6.2 EDU检测转染后细胞的增殖调亡能力 | 第34页 |
| 2.7 转染ECSOD基因的MSCs中ECSOD蛋白的表达 | 第34-36页 |
| 3 讨论与分析 | 第36-38页 |
| 第二部分 ECSOD基因转染MSCs移植治疗缺血性脑卒中大鼠神经保护作用的实验研究 | 第38-57页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| 1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第38页 |
| 1.1.2 主要试剂与耗材 | 第38-39页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第39页 |
| 1.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 1.2.1 大鼠急性脑梗塞模型的制作 | 第39-40页 |
| 1.2.2 细胞移植 | 第40-41页 |
| 2 模型的评价 | 第41-45页 |
| 2.1 脑梗塞影像学评价 | 第41-43页 |
| 2.2 神经功能评分 | 第43页 |
| 2.2.1 神经功能缺损行为学评定 | 第43页 |
| 2.2.2 改良大鼠神经损伤缺损评分（Modified Neurological SeverityScores, mNSS) | 第43页 |
| 2.3 免疫组化 | 第43-44页 |
| 2.4 统计分析 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-53页 |
| 3.1 mNSS 神经功能缺损评定结果 | 第45页 |
| 3.2 MRI (单因素方差分） | 第45-47页 |
| 3.3 免疫组化结果 | 第47-53页 |
| 3.3.1 梗死周边ECSOD的表达 | 第47-49页 |
| 3.3.2 梗死周边区Bax的阳性细胞表达 | 第49-50页 |
| 3.3.3 梗死周边区Bcl-2的阳性细胞表达 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 急性缺血性脑卒中的时间窗口 | 第53页 |
| 4.2 MSCs移植与缺血性脑卒中 | 第53-54页 |
| 4.3 SOD与缺血性脑卒中 | 第54页 |
| 4.4 转染ECSOD的MSCs移植对缺血性脑卒中大鼠的保护作用 | 第54-56页 |
| 5 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 综述 | 第65-71页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
