符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-29页 |
1.1 辣椒疫霉研究进展 | 第11-14页 |
1.1.1 辣椒疫病的发生与症状 | 第11-12页 |
1.1.2 辣椒疫霉的生物学性状 | 第12页 |
1.1.3 辣椒疫霉的病害循环 | 第12页 |
1.1.4 辣椒疫病的发病条件 | 第12-13页 |
1.1.5 辣椒疫病的防治 | 第13-14页 |
1.2 病原物与植物互作的分子机制 | 第14-15页 |
1.3 卵菌效应因子 | 第15-17页 |
1.3.1 卵菌RxLR效应基因中保守基序的转运功能 | 第16页 |
1.3.2 RxLR效应分子的功能多样性 | 第16页 |
1.3.3 RxLR效应分子结构的研究进展 | 第16-17页 |
1.4 蛋白结构生物学 | 第17-24页 |
1.4.1 研究对象的选择 | 第17-18页 |
1.4.2 目的基因的克隆 | 第18页 |
1.4.3 目的基因的表达 | 第18-23页 |
1.4.4 融合蛋白质分离纯化方法 | 第23-24页 |
1.5 X射线晶体学 | 第24-28页 |
1.5.1 蛋白质结晶原理 | 第24-25页 |
1.5.2 结晶方法 | 第25-26页 |
1.5.3 蛋白晶体的优化 | 第26-27页 |
1.5.4 蛋白质结构测定 | 第27-28页 |
1.6 研究目的和意义 | 第28-29页 |
2 材料和方法 | 第29-43页 |
2.1 试验材料 | 第29-33页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第29页 |
2.1.2 生化试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 仪器和耗材 | 第30页 |
2.1.4 试剂配制 | 第30-33页 |
2.2 试验方法 | 第33-43页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第33-34页 |
2.2.2 基因克隆和重组载体的构建 | 第34-38页 |
2.2.3 重组蛋白的表达 | 第38-40页 |
2.2.4 融合蛋白的纯化 | 第40-41页 |
2.2.5 晶体培养及优化 | 第41页 |
2.2.6 结构解析 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-56页 |
3.1 生物信息学分析 | 第43-45页 |
3.1.1 RxLR19781序列信息 | 第43页 |
3.1.2 基本理化性质分析 | 第43页 |
3.1.3 信号肽预测 | 第43-44页 |
3.1.4 跨膜区预测 | 第44-45页 |
3.2 基因克隆与表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.3 RxLR19781母体蛋白及硒代蛋白的表达纯化 | 第46-51页 |
3.3.1 母体蛋白的表达纯化 | 第46-50页 |
3.3.2 硒代蛋白的表达纯化 | 第50-51页 |
3.4 晶体培养及优化 | 第51-53页 |
3.4.1 RxLR19781蛋白晶体的培养 | 第51-53页 |
3.4.2 硒代蛋白晶体的培养 | 第53页 |
3.5 衍射数据收集 | 第53-54页 |
3.6 结构解析 | 第54-56页 |
4 结论与讨论 | 第56-58页 |
4.1 结论 | 第56页 |
4.1.1 RxLR19781的序列特征 | 第56页 |
4.1.2 成功构建了原核表达载体并纯化出高纯度高浓度的目的蛋白 | 第56页 |
4.1.3 筛选出高质量的晶体并解析出结构 | 第56页 |
4.2 讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |