| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第9-10页 |
| 1.2 木霉菌的生防与分子机制研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 木霉菌的生防机制 | 第10-11页 |
| 1.2.2 木霉菌的生防分子机制 | 第11-12页 |
| 1.3 丝裂原蛋白激酶与细胞信号转导 | 第12-13页 |
| 1.3.1 MAPK 蛋白激酶在真菌中的作用 | 第12页 |
| 1.3.2 丝裂原蛋白激酶信号传递途径 | 第12-13页 |
| 1.4 国外对于棘孢木霉的研究 | 第13页 |
| 1.5 国内的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.6 国内外文献综述的简析 | 第14页 |
| 1.7 丝状真菌转化方法研究进展 | 第14-16页 |
| 1.7.1 PEG 法 | 第15页 |
| 1.7.2 醋酸锂法 | 第15页 |
| 1.7.3 基因枪法 | 第15页 |
| 1.7.4 REMI 法 | 第15页 |
| 1.7.5 ATMT 法 | 第15-16页 |
| 1.8 实际应用潜在的问题 | 第16-17页 |
| 1.9 课题的技术路线图与主要研究内容 | 第17-19页 |
| 1.9.1 技术路线图 | 第17页 |
| 1.9.2 主要研究内容 | 第17-19页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 菌种及菌种样品的来源 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.4 本课题所用的引物 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 棘孢木霉 T4 菌株 task1 基因的获得 | 第23-24页 |
| 2.2.2 构建重组质粒 pCAMBIA1301-task1 | 第24-25页 |
| 2.2.3 重组质粒转化野生型棘孢木霉 | 第25-29页 |
| 2.2.4 转化子与病原菌的对峙实验 | 第29页 |
| 2.2.5 转化子生长速率和产孢能力测定 | 第29-30页 |
| 2.2.6 野生型和转化子菌丝形态观察 | 第30页 |
| 2.2.7 转化子酶活的测定 | 第30-32页 |
| 第3章 Task1 重组体构建及转化子的鉴定 | 第32-41页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 棘孢木霉 T4 株 task1 基因的 PCR 及纯化 | 第32-33页 |
| 3.3 重组表达质粒的构建 | 第33-35页 |
| 3.4 重组质粒电转化 AGL-1 | 第35-36页 |
| 3.5 野生型棘孢木霉 T4 对潮霉素敏感性实验 | 第36页 |
| 3.6 棘孢木霉 T4 转化子的 PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| 3.7 转化子稳定性的鉴定 | 第37页 |
| 3.8 转化子实时定量 PCR 鉴定 | 第37-40页 |
| 3.9 本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 转化子生防特性研究 | 第41-53页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 转化子形态学检测 | 第41-42页 |
| 4.3 野生棘孢木霉与 Z4 菌丝形态观察 | 第42-43页 |
| 4.4 病原菌对峙实验 | 第43-48页 |
| 4.4.1 棘孢木霉对峙立枯丝核菌 | 第43-45页 |
| 4.4.2 棘孢木霉对峙镰刀菌菌 | 第45-48页 |
| 4.5 酶活测定 | 第48-51页 |
| 4.5.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第48页 |
| 4.5.2 Cx酶活性的测定 | 第48-49页 |
| 4.5.3 C1酶活性的测定 | 第49-50页 |
| 4.5.4 滤纸酶活性的测定 | 第50页 |
| 4.5.5 β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第50-51页 |
| 4.6 本章小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
