摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第1章 DYC-279 对人肝癌细胞株 HepG-2 体外抑制实验 | 第13-25页 |
1 仪器与试剂 | 第13-14页 |
1.1 细胞株 | 第13页 |
1.2 主要仪器 | 第13-14页 |
1.3 主要试剂 | 第14页 |
1.4 溶液的配制 | 第14页 |
2 实验方法 | 第14-17页 |
2.1 细胞培养基本方法 | 第14-15页 |
2.2 CCK-8 法检测 DYC-279 对细胞株 HepG-2 的体外抑制作用 | 第15-16页 |
2.3 DYC-279 对 HepG-2 细胞形态的作用 | 第16页 |
2.4 细胞周期检测 | 第16页 |
2.5 细胞凋亡检测 | 第16页 |
2.6 统计分析 | 第16-17页 |
3 实验结果 | 第17-23页 |
3.1 CCK-8 法对 DYC-279 体外抗肿瘤活性测定 | 第17-18页 |
3.2 DYC-279 影响细胞 HepG-2 形态 | 第18-19页 |
3.3 DYC-279 阻滞细胞于 G2/M 期 | 第19-21页 |
3.4 DYC-279 在 HepG-2 细胞系中引起凋亡 | 第21-23页 |
4 讨论 | 第23-24页 |
5 本章小结 | 第24-25页 |
第2章 DYC-279 对周期调控相关基因表达情况的研究 | 第25-32页 |
1 仪器和材料 | 第25-27页 |
1.1 仪器与材料 | 第25-26页 |
1.2 主要试剂 | 第26页 |
1.3 溶液的配制 | 第26页 |
1.4 引物设计与合成 | 第26-27页 |
1.5 试剂与器皿的处理 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-29页 |
2.1 实验分组 | 第27页 |
2.2 总 RNA 提取 | 第27-28页 |
2.3 RNA 浓度及纯度测定 | 第28页 |
2.4 RNA 逆转录 cDNA | 第28页 |
2.5 PCR(Polymerase Chin Reaction,聚合酶链式反应)扩增产物 | 第28-29页 |
2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
2.7 统计学分析 | 第29页 |
3 实验结果 | 第29-31页 |
3.1 DYC-279 对人肝癌 HepG-2 细胞 CyclinB1,cdc-2 和 CyclinD1 基因转录水平的影响 | 第29-31页 |
4 讨论 | 第31页 |
5 本章小结 | 第31-32页 |
第3章 Western blot 检测 DYC-279 对周期相关蛋白及凋亡相关蛋白的影响 | 第32-42页 |
1 仪器与材料 | 第33-36页 |
1.1 主要仪器 | 第33页 |
1.2 主要试剂 | 第33-35页 |
1.3 溶液的配制 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-39页 |
2.1 实验分组 | 第36页 |
2.2 蛋白标准曲线的建立 | 第36页 |
2.3 细胞蛋白提取及浓度测定 | 第36-37页 |
2.4 western blot 步骤 | 第37-38页 |
2.5 统计学分析 | 第38-39页 |
3 实验结果 | 第39-40页 |
3.1 DYC-279 对周期蛋白的影响 | 第39页 |
3.2 DYC-279 对凋亡蛋白的影响 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-41页 |
5 本章小结 | 第41-42页 |
第4章 DYC-279 对大鼠肝微粒体 CYPA2,CYPD6,CYPE1 酶活性影响的研究 | 第42-52页 |
1 仪器与试剂 | 第42-44页 |
1.1 主要仪器 | 第42-43页 |
1.2 试剂 | 第43页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第43-44页 |
1.4 实验动物 | 第44页 |
2 实验方法 | 第44-47页 |
2.1 S9 的制备 | 第44-46页 |
2.2 S9 体外孵育体系 | 第46-47页 |
2.3 DYC-279 对大鼠肝微粒体 CYP450 酶 CYP1A1,CYP2D6,CYP2E1 活性的影响 | 第47页 |
3 实验结果 | 第47-50页 |
3.1 S9 蛋白含量测定 | 第47页 |
3.2 S9 活性的验证 | 第47-49页 |
3.3 DYC-279 对大鼠肝微粒体 CYP1A2,CYP2D6,CYP2E1 活性影响 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
5 本章小结 | 第51-52页 |
全文总结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
综述 | 第58-72页 |
参考文献 | 第64-72页 |
个人简介 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |