| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 RPE 概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 RPE 解剖学结构与定位 | 第11页 |
| 1.2.2 RPE 的生物学功能 | 第11-13页 |
| 1.3 RPE 氧化应激 | 第13-18页 |
| 1.3.1 诱导 RPE 产生氧化应激的胞内因素 | 第13-14页 |
| 1.3.2 RPE 氧化应激应答的相关分子机制 | 第14-18页 |
| 1.4 RPE 病变与年龄相关性黄斑变性（AMD） | 第18-19页 |
| 1.5 本课题研究目的及研究意义 | 第19-20页 |
| 第2章 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1 细胞材料信息 | 第20页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.3 试剂与耗材 | 第21-22页 |
| 2.4 引物序列 | 第22-24页 |
| 第3章 实验方法 | 第24-33页 |
| 3.1 RPE 细胞的培养 | 第24-26页 |
| 3.1.1 RPE 细胞的常规培养 | 第24-25页 |
| 3.1.2 RPE 细胞的染铅培养 | 第25-26页 |
| 3.2 CCK-8 法测定细胞活率 | 第26-27页 |
| 3.2.1 测定 CCK-8 标准曲线 | 第26-27页 |
| 3.2.2 铅毒性试验 | 第27页 |
| 3.2.3 测定 RPE 生长曲线 | 第27页 |
| 3.3 划痕迁移试验 | 第27-28页 |
| 3.4 流式细胞周期分析 | 第28-29页 |
| 3.5 氧化应激相关基因表达量检测 | 第29-31页 |
| 3.5.1 总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| 3.5.2 mRNA 逆转录成 cDNA | 第30-31页 |
| 3.5.3 实时荧光定量 PCR | 第31页 |
| 3.6 流式细胞凋亡分析 | 第31-32页 |
| 3.7 统计学分析 | 第32-33页 |
| 第4章 实验结果 | 第33-44页 |
| 4.1 铅对 RPE 细胞活率的影响 | 第33-34页 |
| 4.2 铅导致 RPE 细胞形态的改变 | 第34-35页 |
| 4.3 铅降低 RPE 上皮迁移能力 | 第35-37页 |
| 4.4 铅影响 RPE 增值活性 | 第37-40页 |
| 4.4.1 铅暴露条件下 RPE 生长曲线的差异 | 第37-38页 |
| 4.4.2 铅暴露条件下 RPE 细胞周期进程的变化 | 第38-40页 |
| 4.5 RPE 氧化应激相关基因 mRNA 的表达水平 | 第40-42页 |
| 4.5.1 总 RNA 的提取 | 第40页 |
| 4.5.2 引物测试结果 | 第40-41页 |
| 4.5.3 qPCR 检测氧化应激相关基因表达量的变化 | 第41-42页 |
| 4.6 慢性铅暴露导致 RPE 细胞凋亡和坏死 | 第42-44页 |
| 第5章 讨论 | 第44-47页 |
| 5.1 重金属铅污染的广谱性及其危害 | 第44页 |
| 5.2 铅诱导的 RPE 氧化应激应答及其生物学特征 | 第44-45页 |
| 5.3 问题与展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53页 |
