| 摘要 | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-15页 |
| 1 氟对动物机体骨性组织的影响 | 第8页 |
| 2 氟对动物机体非骨性组织的影响 | 第8-12页 |
| 2.1 氟对神经系统的影响 | 第9页 |
| 2.2 氟对生殖系统的影响 | 第9-10页 |
| 2.3 氟对消化系统的影响 | 第10-11页 |
| 2.4 氟对免疫系统的影响 | 第11-12页 |
| 2.4.1 氟对机体细胞免疫的影响 | 第11页 |
| 2.4.2 氟对机体体液免疫的影响 | 第11-12页 |
| 3 MAPK/ERK信号转导通路 | 第12-13页 |
| 4 脂多糖(LPS)对B淋巴细胞的影响 | 第13-14页 |
| 5 本实验的立题依据及研究目的 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-27页 |
| 1 材料 | 第15-18页 |
| 1.1 实验动物及饲料 | 第15页 |
| 1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第16-17页 |
| 1.4 主要仪器及设备 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-27页 |
| 2.1 体内实验动物的分组 | 第18页 |
| 2.2 小鼠脾淋巴细胞的分离 | 第18-19页 |
| 2.3 小鼠脾淋巴细胞的培养 | 第19-20页 |
| 2.3.1 体内实验 | 第19页 |
| 2.3.2 体外实验 | 第19-20页 |
| 2.4 氟对小鼠B淋巴细胞ERK通路相关基因表达的影响 | 第20-25页 |
| 2.4.1 小鼠脾淋巴细胞总RNA的提取 | 第20页 |
| 2.4.2 细胞总RNA的质量鉴定 | 第20-21页 |
| 2.4.3 cDNA链的合成 | 第21页 |
| 2.4.4 实时荧光定量PCR检测B淋巴细胞中相关基因的表达 | 第21-25页 |
| 2.5 氟对小鼠B淋巴细胞ERK1蛋白表达的影响 | 第25-27页 |
| 2.5.1 脾淋巴细胞总蛋白的提取 | 第25页 |
| 2.5.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第25页 |
| 2.5.3 脾淋巴细胞总蛋白的质量鉴定 | 第25-26页 |
| 2.5.4 蛋白质的电转移 | 第26页 |
| 2.5.5 封闭及杂交 | 第26页 |
| 2.5.6 数据的处理与分析 | 第26-27页 |
| 结果与分析 | 第27-41页 |
| 1 体内实验动物的一般情况观察 | 第27页 |
| 2 脾淋巴细胞总RNA的完整性、产率和纯度 | 第27-28页 |
| 3 引物的鉴定结果 | 第28-29页 |
| 4 测序结果 | 第29-30页 |
| 5 实时荧光定量PCR结果 | 第30-37页 |
| 5.1 体内实验 | 第30-34页 |
| 5.1.1 目的基因和β-actin内参基因扩增动力学曲线分析 | 第30页 |
| 5.1.2 目的基因和β-actin内参基因熔解曲线分析 | 第30-32页 |
| 5.1.3 氟对B淋巴细胞ras、c-raf、MEK1和ERK1的影响 | 第32-34页 |
| 5.2 体外实验 | 第34-37页 |
| 5.2.1 目的基因和β-actin内参基因扩增动力学曲线分析 | 第34页 |
| 5.2.2 目的基因和β-actin内参基因熔解曲线分析 | 第34-36页 |
| 5.2.3 氟对B淋巴细胞ras、c-raf、MEK1和ERK1的影响 | 第36-37页 |
| 6 总蛋白SDS-PAGE电泳结果分析 | 第37-38页 |
| 7 氟对小鼠B淋巴细胞ERK1蛋白表达的影响 | 第38-41页 |
| 7.1 体内实验 | 第38-39页 |
| 7.2 体外实验 | 第39-41页 |
| 讨论 | 第41-43页 |
| 1 体内实验动物模型的建立 | 第41页 |
| 2 氟对B淋巴细胞ERK1通路相关基因和蛋白表达的影响 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| Abstract | 第48-49页 |
| 致谢 | 第50页 |
