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双功能慢病毒表达载体在TFIIAγ突变研究中的应用

摘要第4-6页
abstract第6-7页
1 前言第10-13页
2 实验材料与方法第13-30页
    2.1 实验材料第13-15页
        2.1.1 实验细胞第13页
        2.1.2 质粒与引物第13-14页
        2.1.3 其它材料第14-15页
    2.2 实验试剂第15-21页
        2.2.1 细胞培养相关试剂第15-16页
        2.2.2 分子克隆相关试剂第16-18页
        2.2.3 LuciferaseAssay相关试剂第18页
        2.2.4 Westernblotting相关试剂第18-20页
        2.2.5 蛋白表达和纯化相关试剂第20-21页
    2.3 实验仪器与设备第21-22页
    2.4 实验方法第22-30页
        2.4.1 质粒构建第22-25页
        2.4.2 细胞培养第25页
        2.4.3 蛋白表达和纯化第25-26页
        2.4.4 WesternBlotting第26-27页
        2.4.5 转染第27-28页
        2.4.6 荧光素酶活性检测(LuciferaseAssay)第28-29页
        2.4.7 Protein-DNA结合实验第29-30页
3 结果第30-41页
    3.1 双功能表达载体的构建第30-33页
    3.2 双功能表达载体的功能鉴定第33-34页
    3.3 敲低内源TFIIAγ同时表达外源HA-TFIIAγ野生型及突变蛋白的293T稳定细胞系的建立第34-36页
    3.4 TFIIAγ突变对AdML启动子转录活性的影响第36-37页
    3.5 TFIIAγ突变对其它启动子转录活性的影响第37-38页
    3.6 TBP,TFIIAγ及其突变体融合蛋白的异源表达第38-39页
    3.7 TFIIAγ突变增加TFIIAγ突变体蛋白与启动子AdML的结合第39-41页
4 结论与展望第41-43页
    4.1 结论第41页
    4.2 展望第41-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文第47页

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