符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-31页 |
1.1 马立克式病毒(MDV)的研究进展 | 第14-22页 |
1.1.1 病原学 | 第14-16页 |
1.1.2 流行病学 | 第16-18页 |
1.1.3 发病机理及病理变化 | 第18-20页 |
1.1.3.1 早期增殖性-限制性感染 | 第18页 |
1.1.3.2 病毒的潜伏感染阶段 | 第18-19页 |
1.1.3.3 溶细胞感染的第二阶段 | 第19页 |
1.1.3.4 淋巴瘤的形成 | 第19-20页 |
1.1.4 MDV的诊断技术 | 第20-22页 |
1.1.4.1 观察临床资料和机体病变 | 第20页 |
1.1.4.2 肿瘤组织学、细胞学以及组织化学诊断 | 第20-21页 |
1.1.4.3 病毒学检测 | 第21-22页 |
1.2 马立克式病毒(MDV)分子生物学研究进展 | 第22-25页 |
1.2.1 MDV 的基因组结构 | 第22-23页 |
1.2.2 MDV 的基因及相关蛋白 | 第23-25页 |
1.2.2.1 即时早期基因(IE 基因) | 第23页 |
1.2.2.2 早期基因 | 第23-24页 |
1.2.2.3 晚期基因 | 第24页 |
1.2.2.4 Meq 基因 | 第24页 |
1.2.2.5 v-IL8 | 第24页 |
1.2.2.6 1.8kb 基因家族 | 第24-25页 |
1.2.2.7 pp38/pp24 | 第25页 |
1.3 禽反转录病毒与 MDV 之间基因重组的研究进展 | 第25-26页 |
1.3.1 MDV 与 REV 之间的基因重组 | 第25-26页 |
1.3.2 MDV 与 ALV 之间的基因重组 | 第26页 |
1.4 重组 MDV 研究中克隆载体系统介绍 | 第26-28页 |
1.4.1 质粒(plasmid) | 第27页 |
1.4.2 粘粒 | 第27页 |
1.4.3 细菌人工染色体技术(bacterial artificial chromsomeo ,BAC) | 第27-28页 |
1.5 重组 MDV 病毒 SC9-1 的构建 | 第28-29页 |
1.6 MDV 疫苗的研究进展 | 第29-30页 |
1.6.1 疫苗免疫机制 | 第29页 |
1.6.2 疫苗的种类 | 第29-30页 |
1.6.2.1 常规使用的疫苗 | 第29-30页 |
1.6.2.2 新型 MDV 疫苗 | 第30页 |
1.7 本研究的意义 | 第30-31页 |
2 材料和方法 | 第31-52页 |
2.1 材料 | 第31-32页 |
2.1.1 试验动物与 SPF 饲养设施 | 第31页 |
2.1.2 疫苗 | 第31页 |
2.1.3 病毒 | 第31页 |
2.1.4 主要试剂和仪器 | 第31-32页 |
2.1.5 其他试剂的配制 | 第32页 |
2.2 方法 | 第32-42页 |
2.2.1 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第32-33页 |
2.2.2 MDV 病毒的增殖与定量 | 第33页 |
2.2.3 AIV 与 NDV 病毒的鸡胚扩增 | 第33页 |
2.2.4 重组毒株 SC9-1 的人工接种 | 第33-34页 |
2.2.5 NDV 和 AIV 疫苗免疫鸡 | 第34页 |
2.2.6 红细胞凝集试验与血凝抑制试验 | 第34-35页 |
2.2.6.1 红细胞凝集试验步骤 | 第34-35页 |
2.2.6.2 血凝抑制试验步骤 | 第35页 |
2.2.7 接种 GX0101 后鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第35页 |
2.2.8 病理学检测 | 第35-36页 |
2.2.9 淋巴细胞 DNA 与羽毛囊上皮细胞 DNA 的提取 | 第36-37页 |
2.2.10 检测 SPF 鸡免疫 SC9-1 后 GX0101 接种病毒的增殖动态 | 第37页 |
2.2.11 检测 MDV GX0101 的荧光定量 PCR 方法的建立 | 第37-38页 |
2.2.11.1 荧光定量 PCR 检测 GX0101 的可行性 | 第37页 |
2.2.11.2 荧光定量 PCR 引物的设计 | 第37-38页 |
2.2.11.3 荧光定量 PCR 反应体系及反应条件 | 第38页 |
2.2.12 检测 MDV GX0101 的荧光定量 PCR 标准曲线的制备 | 第38-42页 |
2.2.12.1 PCR 扩增 Meq、LTR | 第38-39页 |
2.2.12.2 质粒 pMD-meq、pMD-LTR 的构建 | 第39-41页 |
2.2.12.3 Meq 和 LTR 基因的荧光定量标准曲线绘制 | 第41-42页 |
2.2.13 统计学分析 | 第42页 |
2.3 试验结果 | 第42-52页 |
2.3.1 重组 MD 病毒 SC9-1 与毒株 GX0101 的细胞定量结果 | 第42页 |
2.3.2 各组 SPF 鸡免疫后攻毒 GX0101 的死亡率及肿瘤发生率 | 第42页 |
2.3.3 各组海兰褐鸡免疫后攻毒 GX0101 的死亡率及肿瘤发生率 | 第42-47页 |
2.3.4 GX0101 在免疫鸡体内的增殖动态 | 第47-49页 |
2.3.4.1 检测 MDV GX0101 的荧光定量 PCR 标准曲线 | 第47页 |
2.3.4.2 SC9-1、CVI988/Rispens 免疫 SPF 鸡后 GX0101 的增殖动态 | 第47-48页 |
2.3.4.3 SC9-1、CVI988/Rispens 免疫海兰褐鸡后 GX0101 的增殖动态 | 第48-49页 |
2.3.5 SPF 鸡免疫 SC9-1、CVI988/Rispens 后灭活油苗诱导抗体水平比较 | 第49-50页 |
2.3.6 海兰褐鸡免疫 SC9-1、CVI988/Rispens 后灭活油苗诱导抗体水平比较 | 第50-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
4 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
已发表的论文 | 第65页 |