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敲除Meq基因的重组鸡马立克氏病毒与CV1988/Rispens疫苗株免疫保护效力的比较研究

符号说明第4-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-31页
    1.1 马立克式病毒(MDV)的研究进展第14-22页
        1.1.1 病原学第14-16页
        1.1.2 流行病学第16-18页
        1.1.3 发病机理及病理变化第18-20页
            1.1.3.1 早期增殖性-限制性感染第18页
            1.1.3.2 病毒的潜伏感染阶段第18-19页
            1.1.3.3 溶细胞感染的第二阶段第19页
            1.1.3.4 淋巴瘤的形成第19-20页
        1.1.4 MDV的诊断技术第20-22页
            1.1.4.1 观察临床资料和机体病变第20页
            1.1.4.2 肿瘤组织学、细胞学以及组织化学诊断第20-21页
            1.1.4.3 病毒学检测第21-22页
    1.2 马立克式病毒(MDV)分子生物学研究进展第22-25页
        1.2.1 MDV 的基因组结构第22-23页
        1.2.2 MDV 的基因及相关蛋白第23-25页
            1.2.2.1 即时早期基因(IE 基因)第23页
            1.2.2.2 早期基因第23-24页
            1.2.2.3 晚期基因第24页
            1.2.2.4 Meq 基因第24页
            1.2.2.5 v-IL8第24页
            1.2.2.6 1.8kb 基因家族第24-25页
            1.2.2.7 pp38/pp24第25页
    1.3 禽反转录病毒与 MDV 之间基因重组的研究进展第25-26页
        1.3.1 MDV 与 REV 之间的基因重组第25-26页
        1.3.2 MDV 与 ALV 之间的基因重组第26页
    1.4 重组 MDV 研究中克隆载体系统介绍第26-28页
        1.4.1 质粒(plasmid)第27页
        1.4.2 粘粒第27页
        1.4.3 细菌人工染色体技术(bacterial artificial chromsomeo ,BAC)第27-28页
    1.5 重组 MDV 病毒 SC9-1 的构建第28-29页
    1.6 MDV 疫苗的研究进展第29-30页
        1.6.1 疫苗免疫机制第29页
        1.6.2 疫苗的种类第29-30页
            1.6.2.1 常规使用的疫苗第29-30页
            1.6.2.2 新型 MDV 疫苗第30页
    1.7 本研究的意义第30-31页
2 材料和方法第31-52页
    2.1 材料第31-32页
        2.1.1 试验动物与 SPF 饲养设施第31页
        2.1.2 疫苗第31页
        2.1.3 病毒第31页
        2.1.4 主要试剂和仪器第31-32页
        2.1.5 其他试剂的配制第32页
    2.2 方法第32-42页
        2.2.1 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第32-33页
        2.2.2 MDV 病毒的增殖与定量第33页
        2.2.3 AIV 与 NDV 病毒的鸡胚扩增第33页
        2.2.4 重组毒株 SC9-1 的人工接种第33-34页
        2.2.5 NDV 和 AIV 疫苗免疫鸡第34页
        2.2.6 红细胞凝集试验与血凝抑制试验第34-35页
            2.2.6.1 红细胞凝集试验步骤第34-35页
            2.2.6.2 血凝抑制试验步骤第35页
        2.2.7 接种 GX0101 后鸡的死亡率及肿瘤发生率第35页
        2.2.8 病理学检测第35-36页
        2.2.9 淋巴细胞 DNA 与羽毛囊上皮细胞 DNA 的提取第36-37页
        2.2.10 检测 SPF 鸡免疫 SC9-1 后 GX0101 接种病毒的增殖动态第37页
        2.2.11 检测 MDV GX0101 的荧光定量 PCR 方法的建立第37-38页
            2.2.11.1 荧光定量 PCR 检测 GX0101 的可行性第37页
            2.2.11.2 荧光定量 PCR 引物的设计第37-38页
            2.2.11.3 荧光定量 PCR 反应体系及反应条件第38页
        2.2.12 检测 MDV GX0101 的荧光定量 PCR 标准曲线的制备第38-42页
            2.2.12.1 PCR 扩增 Meq、LTR第38-39页
            2.2.12.2 质粒 pMD-meq、pMD-LTR 的构建第39-41页
            2.2.12.3 Meq 和 LTR 基因的荧光定量标准曲线绘制第41-42页
        2.2.13 统计学分析第42页
    2.3 试验结果第42-52页
        2.3.1 重组 MD 病毒 SC9-1 与毒株 GX0101 的细胞定量结果第42页
        2.3.2 各组 SPF 鸡免疫后攻毒 GX0101 的死亡率及肿瘤发生率第42页
        2.3.3 各组海兰褐鸡免疫后攻毒 GX0101 的死亡率及肿瘤发生率第42-47页
        2.3.4 GX0101 在免疫鸡体内的增殖动态第47-49页
            2.3.4.1 检测 MDV GX0101 的荧光定量 PCR 标准曲线第47页
            2.3.4.2 SC9-1、CVI988/Rispens 免疫 SPF 鸡后 GX0101 的增殖动态第47-48页
            2.3.4.3 SC9-1、CVI988/Rispens 免疫海兰褐鸡后 GX0101 的增殖动态第48-49页
        2.3.5 SPF 鸡免疫 SC9-1、CVI988/Rispens 后灭活油苗诱导抗体水平比较第49-50页
        2.3.6 海兰褐鸡免疫 SC9-1、CVI988/Rispens 后灭活油苗诱导抗体水平比较第50-52页
3 讨论第52-54页
4 结论第54-55页
参考文献第55-64页
致谢第64-65页
已发表的论文第65页

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