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外源褪黑素对苹果叶片衰老的调控及相关自噬基因的功能分析

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 文献综述第16-38页
    1.1 植物中褪黑素的研究进展第16-21页
        1.1.1 褪黑素概述第16页
        1.1.2 植物中褪黑素的发现和存在第16-17页
        1.1.3 褪黑素的生物合成第17-18页
        1.1.4 植物中褪黑素的生理功能第18-21页
    1.2 叶片衰老第21-26页
        1.2.1 叶片衰老的症状第21-23页
        1.2.2 叶片衰老的调控第23-25页
        1.2.3 叶片衰老的基因表达第25-26页
    1.3 植物中自噬的研究进展第26-36页
        1.3.1 自噬第26-27页
        1.3.2 植物中自噬发生的核心蛋白和机制第27-31页
        1.3.3 自噬在植物发育中的功能第31-32页
        1.3.4 自噬在植物胁迫中的功能第32-35页
        1.3.5 植物中的选择性自噬第35-36页
    1.4 本研究的目的和意义第36-37页
    1.5 本研究的思路和技术路线第37-38页
第二章 外源褪黑素对黑暗离体和干旱胁迫诱导苹果叶片衰老的调控第38-57页
    2.1 材料和方法第38-41页
        2.1.1 试验材料和处理第38-39页
        2.1.2 主要试剂和仪器第39页
        2.1.3 黑暗下叶绿素荧光的测定第39页
        2.1.4 光合作用和光下叶绿素荧光的测定第39页
        2.1.5 叶绿素含量的测定第39页
        2.1.6 过氧化氢的提取和测定第39-40页
        2.1.7 抗氧化物质的提取和测定第40页
        2.1.8 抗氧化系统相关酶的提取和活性测定第40页
        2.1.9 RNA提取、反转录和相关基因的定量表达分析第40-41页
        2.1.10 数据处理第41页
    2.2 结果与分析第41-54页
        2.2.1 外源褪黑素延缓黑暗诱导的苹果离体叶片衰老第41-47页
        2.2.2 外源褪黑素延缓干旱诱导的苹果叶片衰老第47-54页
    2.3 讨论第54-57页
        2.3.1 外源褪黑素对黑暗诱导苹果离体叶片衰老的调控第54-55页
        2.3.2 外源褪黑素对干旱胁迫诱导的苹果叶片衰老的调控第55-57页
第三章 外源褪黑素对苹果叶片自然衰老的调控第57-82页
    3.1 材料和方法第57-62页
        3.1.1 试验材料和处理第57页
        3.1.2 主要试剂和仪器第57-58页
        3.1.3 光合参数的测定第58页
        3.1.4 叶绿素和叶片全氮含量的测定第58页
        3.1.5 可溶性蛋白和Rubisco蛋白的提取、分离和含量测定第58页
        3.1.6 可溶性糖和淀粉的测定第58-59页
        3.1.7 RNA提取、反转录和相关基因的定量表达分析第59页
        3.1.8 蛋白质组测序样品的准备第59-61页
        3.1.9 数据处理和生物信息学分析第61-62页
    3.2 结果与分析第62-78页
        3.2.1 褪黑素相对提高了光合作用和光合色素的含量第62-63页
        3.2.2 褪黑素相对增加了叶片全氮、可溶性蛋白和Rubisco蛋白的含量第63-65页
        3.2.3 褪黑素对可溶性糖和淀粉的影响第65-66页
        3.2.4 褪黑素对衰老过程相关基因表达的调控第66-67页
        3.2.5 测序样品的蛋白质量第67-68页
        3.2.6 蛋白质组鉴定数据第68-69页
        3.2.7 叶片衰老和褪黑素处理下差异蛋白统计第69-70页
        3.2.8 叶片衰老和褪黑素处理下差异蛋白GO分类第70-73页
        3.2.9 叶片衰老和褪黑素处理下差异蛋白的功能分类和注释分析第73-78页
    3.3 讨论第78-82页
第四章 外源褪黑素对氧化胁迫下自噬发生的调控第82-93页
    4.1 材料和方法第82-84页
        4.1.1 试验材料和处理第82-83页
        4.1.2 主要试剂和仪器第83页
        4.1.3 MDC染色自噬小体第83页
        4.1.4 氧化蛋白含量的测定第83页
        4.1.5 活性氧组织化学染色第83页
        4.1.6 基因表达分析第83-84页
        4.1.7 数据分析第84页
    4.2 结果与分析第84-90页
        4.2.1 不同褪黑素浓度对氧化胁迫诱导自噬体的影响第84-85页
        4.2.2 10 μM褪黑素增强了氧化胁迫下自噬体的积累第85-87页
        4.2.3 10 μM褪黑素上调了自噬类泛素途径ATG8-PE中基因的表达第87-88页
        4.2.4 10 μM褪黑素减少了氧化蛋白的积累第88-89页
        4.2.5 10 μM褪黑素处理对氧化状态的影响第89-90页
    4.3 讨论第90-93页
第五章 苹果自噬基因MdATG8i的克隆与功能分析第93-123页
    5.1 材料与方法第93-100页
        5.1.1 试验材料第93-96页
        5.1.2 试验方法第96-100页
    5.2 结果与分析第100-120页
        5.2.1 苹果自噬基因MdATG8i的克隆与序列分析第100-102页
        5.2.2 苹果自噬基因MdATG8i的表达分析第102-105页
        5.2.3 苹果自噬基因MdATG8i互补酵母缺失体的功能第105-106页
        5.2.4 苹果自噬基因MdATG8i的亚细胞定位分析第106-107页
        5.2.5 苹果自噬基因MdATG8i在拟南芥、‘王林’苹果愈伤组织和‘嘎啦’苹果中的过量表达分析第107-120页
    5.3 讨论第120-123页
第六章 苹果自噬基因MdATG3s和调控基因MdROATG3的克隆与功能分析第123-180页
    6.1 材料与方法第123-129页
        6.1.1 试验材料第123-126页
        6.1.2 试验方法第126-129页
    6.2 结果与分析第129-177页
        6.2.1 苹果自噬基因MdATG3s的克隆与序列分析第129-131页
        6.2.2 苹果自噬基因MdATG3s的表达分析第131-133页
        6.2.3 苹果自噬基因MdATG3s的亚细胞定位分析第133-134页
        6.2.4 苹果自噬基因MdATG3s互补酵母缺失体的功能第134-135页
        6.2.5 酵母双杂交验证苹果自噬基因MdATG3s与MdATG8i的互作第135-137页
        6.2.6 苹果自噬基因MdATG3-2 启动子克隆与活性分析第137-143页
        6.2.7 酵母单杂交系统筛选与苹果自噬基因MdATG3-2 启动子互作的蛋白第143-145页
        6.2.8 调控基因MdROATG3的克隆、表达分析以及与Md ATG3-2 启动子的互作验证第145-155页
        6.2.9 苹果自噬基因MdATG3-2 和其调控基因MdROATG3过量表达植物的功能分析第155-177页
    6.3 讨论第177-180页
第七章 结论与创新点第180-182页
    7.1 结论第180-181页
    7.2 创新点第181-182页
参考文献第182-199页
附录第199-203页
缩略词第203-204页
致谢第204-205页
作者简介第205-206页

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