摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第1章 前言 | 第11-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-28页 |
2.1 主要仪器及耗材 | 第13-14页 |
2.2 主要试剂 | 第14-17页 |
2.2.1 细胞培养相关试剂 | 第14页 |
2.2.2 Western-Blot相关试剂 | 第14-15页 |
2.2.3 RT-PCR相关试剂 | 第15页 |
2.2.4 琼脂糖凝胶电泳相关试剂 | 第15页 |
2.2.5 免疫组织化学相关试剂 | 第15-16页 |
2.2.6 其他相关试剂 | 第16页 |
2.2.7 主要配制试剂 | 第16-17页 |
2.3 实验相关引物 | 第17-18页 |
2.3.1 Fibulin-3CDS区PCR引物 | 第17页 |
2.3.2 Fibulin-3及内参GAPDHqPCR引物 | 第17页 |
2.3.3 Cas9引物 | 第17-18页 |
2.4 研究方法 | 第18-27页 |
2.4.1 标本采集 | 第18页 |
2.4.2 免疫组织化学 | 第18-19页 |
2.4.3 细胞培养相关操作 | 第19页 |
2.4.4 细胞总RNA提取及实时定量逆转录聚合酶链反应 | 第19-21页 |
2.4.5 PCR和琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
2.4.6 蛋白质印迹 | 第21-23页 |
2.4.7 Fibulin-3过表达细胞系构建 | 第23-25页 |
2.4.8 Fibulin-3敲除细胞系构建 | 第25-26页 |
2.4.9 细胞迁移实验 | 第26页 |
2.4.10 细胞划痕实验 | 第26-27页 |
2.5 统计分析方法 | 第27-28页 |
第3章 实验结果 | 第28-39页 |
3.1 Fibulin-3可能是影响乳腺癌发生发展及转移的关键因子 | 第28-29页 |
3.1.1 人乳腺癌MDA-MB-231细胞系和MDA-MB-231HM高转移性细胞系基因表达差异 | 第28页 |
3.1.2 Fibulin-3在乳腺癌配对临床样本中的表达分析 | 第28-29页 |
3.2 Fibulin-3是影响乳腺癌患者预后的独立因素 | 第29-34页 |
3.2.1 Fibulin-3与乳腺癌患者临床病理特征的关系 | 第29-31页 |
3.2.2 Fibulin-3与乳腺癌患者预后的关系 | 第31-34页 |
3.3 Fibulin-3与乳腺癌细胞迁移能力的关系 | 第34-39页 |
3.3.1 Fibulin-3在乳腺癌细胞系中的表达情况 | 第34-35页 |
3.3.2 Fibulin-3敲低和过表达细胞株的构建 | 第35-36页 |
3.3.3 Fibulin-3与乳腺癌细胞迁移能力的关系 | 第36-39页 |
第4章 讨论 | 第39-42页 |
第5章 结论与展望 | 第42-43页 |
5.1 结论 | 第42页 |
5.2 展望 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
综述 | 第48-53页 |
参考文献 | 第51-53页 |