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低频脉冲电磁场通过初级纤毛启动sAC/cAMP/PKA/CREB途径促进骨形成的研究

英文缩写词表第8-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第1章 绪论第13-20页
    1.1 骨质疏松症的研究及治疗现状第13-14页
        1.1.1 骨质疏松症第13页
        1.1.2 骨质疏松症的发病因素第13-14页
        1.1.3 骨质疏松症的治疗现状第14页
    1.2 脉冲电磁场防治骨质疏松症的现状及机理研究第14-16页
        1.2.1 脉冲电磁场促进骨形成研究进展第14-15页
        1.2.2 电磁场促进骨形成机理研究第15-16页
    1.3 cAMP/PKA与骨形成关系第16-17页
        1.3.1 cAMP/PKA信号途径第16页
        1.3.2 电磁场通过cAMP/PKA/CREB促进骨形成研究第16-17页
    1.4 初级纤毛第17-18页
        1.4.1 初级纤毛的结构第17页
        1.4.2 初级纤毛的功能第17页
        1.4.3 初级纤毛相关的信号通路第17-18页
        1.4.4 初级纤毛与骨形成关系第18页
    1.5 课题研究内容及意义第18-20页
第2章 PEMFs促进成骨细胞成熟矿化依赖于cAMP/PKA/CREB信号通路第20-32页
    2.1 实验材料第20-22页
        2.1.1 实验动物第20页
        2.1.2 主要试剂第20-21页
        2.1.3 主要仪器设备第21-22页
            2.1.3.1 低频电磁场发生装置第21-22页
            2.1.3.2 其他仪器设备第22页
    2.2 实验方法第22-25页
        2.2.1 大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养第22页
        2.2.2 碱性磷酸酶活性测定第22-23页
        2.2.3 基因转录分析第23页
        2.2.4 蛋白表达分析第23-24页
        2.2.5 免疫荧光染色第24页
        2.2.6 cAMP含量测定第24-25页
        2.2.7 茜素红染色第25页
        2.2.8 统计学处理第25页
    2.3 结果与分析第25-31页
        2.3.1 碱性磷酸酶活性检测结果第25-26页
        2.3.2 PEMFs对成骨相关基因的影响第26-27页
        2.3.3 PEMFs对成骨相关蛋白的影响第27-28页
        2.3.4 PEMFs激活cAMP/PKA/CREB信号通路第28-30页
            2.3.4.1 cAMP浓度测定结果第28-29页
            2.3.4.2 PEMFs对p-PKA、p-CREB的影响第29-30页
        2.3.5 PEMFs促进骨形成依赖于PKA第30-31页
    2.4 讨论第31-32页
第3章 PEMFs促进骨形成依赖于腺苷酸环化酶第32-38页
    3.1 实验材料第32-33页
        3.1.1 实验动物第32页
        3.1.2 主要试剂第32页
        3.1.3 主要仪器设备第32-33页
            3.1.3.1 低频电磁场发生装置第32页
            3.1.3.2 其他仪器设备第32-33页
    3.2 实验方法第33-34页
        3.2.1 ROBs的分离与培养第33页
        3.2.2 琼脂糖凝胶电泳第33页
        3.2.3 基因转录分析第33-34页
        3.2.4 蛋白表达分析第34页
        3.2.5 统计学处理第34页
    3.3 结果与分析第34-37页
        3.3.1 琼脂糖凝胶电泳结果第34页
        3.3.2 PEMFs对ACs基因表达的影响第34-35页
        3.3.3 PEMFs处理后ACs蛋白表达结果第35-36页
        3.3.4 DDA对PEMFs促进骨形成的影响第36-37页
    3.4 讨论第37-38页
第4章 PEMFs通过初级纤毛激活sAC/cAMP/PKA/CREB信号途径第38-44页
    4.1 实验材料第38-39页
        4.1.1 实验动物第38页
        4.1.2 主要试剂第38页
        4.1.3 主要仪器设备第38-39页
    4.2 实验方法第39-40页
        4.2.1 大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养第39页
        4.2.2 免疫荧光染色第39页
        4.2.3 蛋白表达分析第39页
        4.2.4 siRNA质粒提取第39页
        4.2.5 成骨细胞内IFT88的RNA干扰第39页
        4.2.6 统计学分析第39-40页
    4.3 结果与分析第40-43页
        4.3.1 ACs与初级纤毛共定位第40-41页
        4.3.2 p-PKA、PKA与初级纤毛共定位第41页
        4.3.3 干扰纤毛后cAMP浓度的变化第41-42页
        4.3.4 干扰纤毛后p-PKA、p-CREB的蛋白表达结果第42-43页
    4.4 讨论第43-44页
第5章 PEMFs通过定位于初级纤毛的sAC促进骨形成第44-49页
    5.1 实验材料第44页
        5.1.1 实验动物第44页
        5.1.2 主要试剂第44页
        5.1.3 主要仪器设备第44页
    5.2 实验方法第44-45页
        5.2.1 大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养第44页
        5.2.2 基因转录分析第44页
        5.2.3 蛋白分析第44-45页
        5.2.4 茜素红染色第45页
        5.2.5 统计学分析第45页
    5.3 结果与分析第45-47页
        5.3.1 KH7对sAC/cAMP/PKA/CREB信号通路的影响第45-46页
        5.3.2 KH7对成骨相关基因和蛋白的影响第46-47页
        5.3.3 KH7对成骨细胞成熟矿化的影响第47页
    5.4 讨论第47-49页
第6章 PEMFs激活sAC/cAMP/PKA/CREB信号途径对大鼠峰值骨量的影响..第49-57页
    6.1 实验材料第49-50页
        6.1.1 实验动物第49页
        6.1.2 主要试剂第49页
        6.1.3 主要仪器设备第49-50页
            6.1.3.1 低频电磁场发生装置第49页
            6.1.3.2 其他仪器设备第49-50页
    6.2 实验方法第50-51页
        6.2.1 分组与处理第50页
        6.2.2 骨密度的测定第50页
        6.2.3 血清生化指标的测定第50页
        6.2.4 μCT影像分析第50页
        6.2.5 弹性模量分析第50-51页
        6.2.6 蛋白表达分析第51页
        6.2.7 统计学处理第51页
    6.3 结果与分析第51-55页
        6.3.1 PEMFs对大鼠骨密度的影响第51-52页
        6.3.2 PEMFs对大鼠骨生物力学的影响第52页
        6.3.3 Micro-CT扫描结果第52-53页
        6.3.4 PEMFs对血清骨代谢生化指标的影响第53-54页
        6.3.5 PEMFs激活了大鼠体内cAMP/PKA/CREB信号通路第54-55页
            6.3.5.1 PEMFs对血清cAMP的影响第54页
            6.3.5.2 PEMFs对sAC、p-PKA、CREB的影响第54-55页
    6.4 讨论第55-57页
结论第57-58页
参考文献第58-67页
致谢第67-68页
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录第68-69页
附录B第69页

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