英文缩写词表 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第13-20页 |
1.1 骨质疏松症的研究及治疗现状 | 第13-14页 |
1.1.1 骨质疏松症 | 第13页 |
1.1.2 骨质疏松症的发病因素 | 第13-14页 |
1.1.3 骨质疏松症的治疗现状 | 第14页 |
1.2 脉冲电磁场防治骨质疏松症的现状及机理研究 | 第14-16页 |
1.2.1 脉冲电磁场促进骨形成研究进展 | 第14-15页 |
1.2.2 电磁场促进骨形成机理研究 | 第15-16页 |
1.3 cAMP/PKA与骨形成关系 | 第16-17页 |
1.3.1 cAMP/PKA信号途径 | 第16页 |
1.3.2 电磁场通过cAMP/PKA/CREB促进骨形成研究 | 第16-17页 |
1.4 初级纤毛 | 第17-18页 |
1.4.1 初级纤毛的结构 | 第17页 |
1.4.2 初级纤毛的功能 | 第17页 |
1.4.3 初级纤毛相关的信号通路 | 第17-18页 |
1.4.4 初级纤毛与骨形成关系 | 第18页 |
1.5 课题研究内容及意义 | 第18-20页 |
第2章 PEMFs促进成骨细胞成熟矿化依赖于cAMP/PKA/CREB信号通路 | 第20-32页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2.1.3.1 低频电磁场发生装置 | 第21-22页 |
2.1.3.2 其他仪器设备 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养 | 第22页 |
2.2.2 碱性磷酸酶活性测定 | 第22-23页 |
2.2.3 基因转录分析 | 第23页 |
2.2.4 蛋白表达分析 | 第23-24页 |
2.2.5 免疫荧光染色 | 第24页 |
2.2.6 cAMP含量测定 | 第24-25页 |
2.2.7 茜素红染色 | 第25页 |
2.2.8 统计学处理 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-31页 |
2.3.1 碱性磷酸酶活性检测结果 | 第25-26页 |
2.3.2 PEMFs对成骨相关基因的影响 | 第26-27页 |
2.3.3 PEMFs对成骨相关蛋白的影响 | 第27-28页 |
2.3.4 PEMFs激活cAMP/PKA/CREB信号通路 | 第28-30页 |
2.3.4.1 cAMP浓度测定结果 | 第28-29页 |
2.3.4.2 PEMFs对p-PKA、p-CREB的影响 | 第29-30页 |
2.3.5 PEMFs促进骨形成依赖于PKA | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
第3章 PEMFs促进骨形成依赖于腺苷酸环化酶 | 第32-38页 |
3.1 实验材料 | 第32-33页 |
3.1.1 实验动物 | 第32页 |
3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第32-33页 |
3.1.3.1 低频电磁场发生装置 | 第32页 |
3.1.3.2 其他仪器设备 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-34页 |
3.2.1 ROBs的分离与培养 | 第33页 |
3.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
3.2.3 基因转录分析 | 第33-34页 |
3.2.4 蛋白表达分析 | 第34页 |
3.2.5 统计学处理 | 第34页 |
3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
3.3.1 琼脂糖凝胶电泳结果 | 第34页 |
3.3.2 PEMFs对ACs基因表达的影响 | 第34-35页 |
3.3.3 PEMFs处理后ACs蛋白表达结果 | 第35-36页 |
3.3.4 DDA对PEMFs促进骨形成的影响 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-38页 |
第4章 PEMFs通过初级纤毛激活sAC/cAMP/PKA/CREB信号途径 | 第38-44页 |
4.1 实验材料 | 第38-39页 |
4.1.1 实验动物 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第38-39页 |
4.2 实验方法 | 第39-40页 |
4.2.1 大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养 | 第39页 |
4.2.2 免疫荧光染色 | 第39页 |
4.2.3 蛋白表达分析 | 第39页 |
4.2.4 siRNA质粒提取 | 第39页 |
4.2.5 成骨细胞内IFT88的RNA干扰 | 第39页 |
4.2.6 统计学分析 | 第39-40页 |
4.3 结果与分析 | 第40-43页 |
4.3.1 ACs与初级纤毛共定位 | 第40-41页 |
4.3.2 p-PKA、PKA与初级纤毛共定位 | 第41页 |
4.3.3 干扰纤毛后cAMP浓度的变化 | 第41-42页 |
4.3.4 干扰纤毛后p-PKA、p-CREB的蛋白表达结果 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-44页 |
第5章 PEMFs通过定位于初级纤毛的sAC促进骨形成 | 第44-49页 |
5.1 实验材料 | 第44页 |
5.1.1 实验动物 | 第44页 |
5.1.2 主要试剂 | 第44页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第44页 |
5.2 实验方法 | 第44-45页 |
5.2.1 大鼠颅骨成骨细胞的分离与培养 | 第44页 |
5.2.2 基因转录分析 | 第44页 |
5.2.3 蛋白分析 | 第44-45页 |
5.2.4 茜素红染色 | 第45页 |
5.2.5 统计学分析 | 第45页 |
5.3 结果与分析 | 第45-47页 |
5.3.1 KH7对sAC/cAMP/PKA/CREB信号通路的影响 | 第45-46页 |
5.3.2 KH7对成骨相关基因和蛋白的影响 | 第46-47页 |
5.3.3 KH7对成骨细胞成熟矿化的影响 | 第47页 |
5.4 讨论 | 第47-49页 |
第6章 PEMFs激活sAC/cAMP/PKA/CREB信号途径对大鼠峰值骨量的影响.. | 第49-57页 |
6.1 实验材料 | 第49-50页 |
6.1.1 实验动物 | 第49页 |
6.1.2 主要试剂 | 第49页 |
6.1.3 主要仪器设备 | 第49-50页 |
6.1.3.1 低频电磁场发生装置 | 第49页 |
6.1.3.2 其他仪器设备 | 第49-50页 |
6.2 实验方法 | 第50-51页 |
6.2.1 分组与处理 | 第50页 |
6.2.2 骨密度的测定 | 第50页 |
6.2.3 血清生化指标的测定 | 第50页 |
6.2.4 μCT影像分析 | 第50页 |
6.2.5 弹性模量分析 | 第50-51页 |
6.2.6 蛋白表达分析 | 第51页 |
6.2.7 统计学处理 | 第51页 |
6.3 结果与分析 | 第51-55页 |
6.3.1 PEMFs对大鼠骨密度的影响 | 第51-52页 |
6.3.2 PEMFs对大鼠骨生物力学的影响 | 第52页 |
6.3.3 Micro-CT扫描结果 | 第52-53页 |
6.3.4 PEMFs对血清骨代谢生化指标的影响 | 第53-54页 |
6.3.5 PEMFs激活了大鼠体内cAMP/PKA/CREB信号通路 | 第54-55页 |
6.3.5.1 PEMFs对血清cAMP的影响 | 第54页 |
6.3.5.2 PEMFs对sAC、p-PKA、CREB的影响 | 第54-55页 |
6.4 讨论 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第68-69页 |
附录B | 第69页 |