| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 研究现状、成果 | 第12-15页 |
| 研究目的、方法 | 第15-17页 |
| 一、在肝癌中靶定Ki-67的miRNA的预测及确定 | 第17-38页 |
| 1.1 材料和方法 | 第17-30页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 1.2 结果 | 第30-35页 |
| 1.2.1 靶定Ki-67的候选miRNA的筛选及荧光报告载体的构建 | 第30页 |
| 1.2.2 细胞转染效率检测 | 第30-31页 |
| 1.2.3 pcDNA3/pri-miR-519d质粒的构建 | 第31-32页 |
| 1.2.4 Real-time PCR检测pcDNA3/pri-miR-519d质粒的有效性 | 第32页 |
| 1.2.5 荧光报告载体实验验证Ki-67受miR-519d的直接调控因子 | 第32-34页 |
| 1.2.6 Real-Time PCR方法检测在过表达miR-519d后的QGY-7703细胞中及miR-519d表达低的组织中Ki-67 mRNA的表达水平 | 第34页 |
| 1.2.7 Western blot检测过表达miR-519d后QGY-7703细胞中Ki-67蛋白的表达水平 | 第34-35页 |
| 1.3 讨论 | 第35-37页 |
| 1.3.1 荧光报告载体实验的应用 | 第35-36页 |
| 1.3.2 基因Ki-67受miR-519d的负性调节作用 | 第36-37页 |
| 1.4 小结 | 第37-38页 |
| 二、miR-519d对肝癌细胞的作用及在肝癌组织中的差异表达研究 | 第38-47页 |
| 2.1 材料和方法 | 第38-42页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 2.2 结果 | 第42-44页 |
| 2.2.1 MTT实验检测miR-519d对肝癌细胞生长活性的影响 | 第42页 |
| 2.2.2 细胞集落形成实验检测miR-519d对肝癌细胞集落形成能力的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.3 Real-time PCR检测miR-519d在肝癌组织及癌旁正常组织中的差异表达 | 第43-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-46页 |
| 2.3.1 miR-519d在肿瘤中的作用 | 第44-45页 |
| 2.3.2 miR-519d对肝癌细胞的表型影响 | 第45-46页 |
| 2.4 小结 | 第46-47页 |
| 三、Ki-67对肝癌细胞的作用研究 | 第47-54页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-48页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 3.2 结果 | 第48-51页 |
| 3.2.1 pSilencer/si-Ki-67质粒的构建 | 第48页 |
| 3.2.2 Western blot验证pSilencer/si-Ki-67质粒的有效性 | 第48页 |
| 3.2.3 敲减Ki-67对肝癌细胞生长活性的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.4 敲减Ki-67对肝癌细胞集落形成能力的影响 | 第49页 |
| 3.2.5 Ki-67对肝癌细胞的细胞周期的影响 | 第49-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-52页 |
| 3.3.1 基因Ki-67的介绍 | 第51页 |
| 3.3.2 基因Ki-67与肿瘤的关系 | 第51页 |
| 3.3.3 基因Ki-67对肝癌细胞生长的影响 | 第51-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第61-62页 |
| 综述 Ki-67对多种肿瘤的影响 | 第62-71页 |
| 综述参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
