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miR-519d靶定Ki-67抑制肝癌细胞系GY-7703细胞的增殖

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
符号说明第10-12页
前言第12-17页
    研究现状、成果第12-15页
    研究目的、方法第15-17页
一、在肝癌中靶定Ki-67的miRNA的预测及确定第17-38页
    1.1 材料和方法第17-30页
        1.1.1 实验材料第17-19页
        1.1.2 实验方法第19-30页
    1.2 结果第30-35页
        1.2.1 靶定Ki-67的候选miRNA的筛选及荧光报告载体的构建第30页
        1.2.2 细胞转染效率检测第30-31页
        1.2.3 pcDNA3/pri-miR-519d质粒的构建第31-32页
        1.2.4 Real-time PCR检测pcDNA3/pri-miR-519d质粒的有效性第32页
        1.2.5 荧光报告载体实验验证Ki-67受miR-519d的直接调控因子第32-34页
        1.2.6 Real-Time PCR方法检测在过表达miR-519d后的QGY-7703细胞中及miR-519d表达低的组织中Ki-67 mRNA的表达水平第34页
        1.2.7 Western blot检测过表达miR-519d后QGY-7703细胞中Ki-67蛋白的表达水平第34-35页
    1.3 讨论第35-37页
        1.3.1 荧光报告载体实验的应用第35-36页
        1.3.2 基因Ki-67受miR-519d的负性调节作用第36-37页
    1.4 小结第37-38页
二、miR-519d对肝癌细胞的作用及在肝癌组织中的差异表达研究第38-47页
    2.1 材料和方法第38-42页
        2.1.1 实验材料第38-39页
        2.1.2 实验方法第39-42页
    2.2 结果第42-44页
        2.2.1 MTT实验检测miR-519d对肝癌细胞生长活性的影响第42页
        2.2.2 细胞集落形成实验检测miR-519d对肝癌细胞集落形成能力的影响第42-43页
        2.2.3 Real-time PCR检测miR-519d在肝癌组织及癌旁正常组织中的差异表达第43-44页
    2.3 讨论第44-46页
        2.3.1 miR-519d在肿瘤中的作用第44-45页
        2.3.2 miR-519d对肝癌细胞的表型影响第45-46页
    2.4 小结第46-47页
三、Ki-67对肝癌细胞的作用研究第47-54页
    3.1 材料和方法第47-48页
        3.1.1 实验材料第47页
        3.1.2 实验方法第47-48页
    3.2 结果第48-51页
        3.2.1 pSilencer/si-Ki-67质粒的构建第48页
        3.2.2 Western blot验证pSilencer/si-Ki-67质粒的有效性第48页
        3.2.3 敲减Ki-67对肝癌细胞生长活性的影响第48-49页
        3.2.4 敲减Ki-67对肝癌细胞集落形成能力的影响第49页
        3.2.5 Ki-67对肝癌细胞的细胞周期的影响第49-51页
    3.3 讨论第51-52页
        3.3.1 基因Ki-67的介绍第51页
        3.3.2 基因Ki-67与肿瘤的关系第51页
        3.3.3 基因Ki-67对肝癌细胞生长的影响第51-52页
    3.4 小结第52-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
发表论文和参加科研情况说明第61-62页
综述 Ki-67对多种肿瘤的影响第62-71页
    综述参考文献第67-71页
致谢第71页

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