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三种骨髓间充质干细胞移植方法对大鼠急性皮肤创面愈合作用的比较研究

缩略语表第7-9页
中文摘要第9-14页
Abstract第14-17页
前言第18-20页
文献回顾第20-25页
    第一部分 骨髓间充质干细胞的研究进展第20-22页
        一、骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的特性第20-21页
        二、BMMSCs 与免疫抑制性第21页
        三、BMMSCs 与疾病治疗第21-22页
    第二部分 皮肤创伤的治疗路第22-23页
    第三部分 细胞膜片的研究进展和应用第23-25页
实验一 绿色荧光大鼠 BMMSCs 的分离培养和鉴定第25-32页
    引言第25页
    1.实验材料第25-26页
    2.实验方法第26-28页
        2.1 实验动物饲养第26页
        2.2 GFP-BMMSCs 的分离培养和鉴定第26-28页
            2.2.1 GFP-BMMSCs 的分离培养第26-27页
            2.2.2 GFP-BMMSCs 形态学观察第27页
            2.2.3 GFP-BMMSCs 表面抗原的检测第27-28页
            2.2.4 多向分化能力鉴定第28页
    3.结果第28-31页
        3.1 GFP-BMMSCs 形态学观察第28-29页
        3.2 GFP-BMMSCs 表面抗原检测第29-30页
        3.3 GFP-BMMSCs 的多向分化能力鉴定第30-31页
    4.讨论第31-32页
实验二 GFP-BMMSCs 膜片的培养第32-41页
    引言第32页
    1.实验材料第32-33页
        1.1 实验试剂第32页
        1.2 实验主要仪器第32-33页
    2.实验方法第33-36页
        2.1 GFP-BMMSCs 膜片的构建第33页
        2.2 GFP-BMMSCs 膜片的检测第33-36页
            2.2.1 形态学检测第33页
            2.2.2 细胞因子表达的检测第33-36页
                2.2.2.1 GFP-BMMSCs 和 GFP-BMMSCs 膜片总 RNA 的抽提第33-34页
                2.2.2.2 GFP-BMMSCs 和 GFP-BMMSCs 膜片 cDNA 的反转录第34-35页
                2.2.2.3 RT-PCR 检测第35-36页
        2.3 统计第36页
    3 结果第36-38页
        3.1 GFP-BMMSCs 膜片培养和形态学观察第36-38页
        3.2 正常培养 GFP-BMMSCs 和 GFP-BMMSCs 膜片细胞因子和蛋白表 达量比较第38页
    4 讨论第38-41页
实验三 GFP-BMMSCs 膜片修复急性皮肤创面效果的体内检测第41-60页
    引言第41页
    1.实验材料第41-42页
        1.1 实验试剂第41-42页
        1.2 实验仪器第42页
    2.实验方法第42-47页
        2.1 实验动物的饲养第42页
        2.2 动物创面模型的建立和 GFP-BMMSCs 的移植第42-43页
            2.2.1 制作创伤动物模型和 GFP-BMMSCs 膜片移植第42-43页
            2.2.2 GFP-BMMSCs 通过静脉和局部注射移植第43页
        2.3 实验动物取材和形态学比较第43-45页
            2.3.1 三组动物创面大小比较第43页
            2.3.2 三组动物创面组织炎症和移植细胞存活情况比较第43-45页
                2.3.2.1 创面组织 HE 染色第43-44页
                2.3.2.2 创面组织炎症细胞和血管内皮细胞免疫荧光检测第44-45页
                2.3.2.3 创面组织 GFP 细胞量比较第45页
            2.3.3 创面再生真皮结构比较第45页
        2.4 创面愈合组织相关细胞因子表达情况检测第45-47页
            2.4.1 愈合组织总 mRNA 提取第45-46页
            2.4.2 cDNA 文库构建第46页
            2.4.3 RT-PCR 检测第46-47页
        2.5 统计第47页
    3.实验结果第47-57页
        3.1 创面动物模型和 GFP-BMMSCs 膜片移植、静脉及创面局部注射第47页
        3.2 动物取材和形态学比较第47-55页
            3.2.1 创面面积和新生皮肤血管化比较第47页
            3.2.2 马森三色染色和免疫荧光染色第47-55页
        3.3 创面炎症和生长因子的表达检测第55-57页
    4.讨论第57-60页
小结第60-61页
参考文献第61-67页
个人简历和研究成果第67-68页
致谢第68页

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