缩略语表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-14页 |
Abstract | 第14-17页 |
前言 | 第18-20页 |
文献回顾 | 第20-25页 |
第一部分 骨髓间充质干细胞的研究进展 | 第20-22页 |
一、骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的特性 | 第20-21页 |
二、BMMSCs 与免疫抑制性 | 第21页 |
三、BMMSCs 与疾病治疗 | 第21-22页 |
第二部分 皮肤创伤的治疗路 | 第22-23页 |
第三部分 细胞膜片的研究进展和应用 | 第23-25页 |
实验一 绿色荧光大鼠 BMMSCs 的分离培养和鉴定 | 第25-32页 |
引言 | 第25页 |
1.实验材料 | 第25-26页 |
2.实验方法 | 第26-28页 |
2.1 实验动物饲养 | 第26页 |
2.2 GFP-BMMSCs 的分离培养和鉴定 | 第26-28页 |
2.2.1 GFP-BMMSCs 的分离培养 | 第26-27页 |
2.2.2 GFP-BMMSCs 形态学观察 | 第27页 |
2.2.3 GFP-BMMSCs 表面抗原的检测 | 第27-28页 |
2.2.4 多向分化能力鉴定 | 第28页 |
3.结果 | 第28-31页 |
3.1 GFP-BMMSCs 形态学观察 | 第28-29页 |
3.2 GFP-BMMSCs 表面抗原检测 | 第29-30页 |
3.3 GFP-BMMSCs 的多向分化能力鉴定 | 第30-31页 |
4.讨论 | 第31-32页 |
实验二 GFP-BMMSCs 膜片的培养 | 第32-41页 |
引言 | 第32页 |
1.实验材料 | 第32-33页 |
1.1 实验试剂 | 第32页 |
1.2 实验主要仪器 | 第32-33页 |
2.实验方法 | 第33-36页 |
2.1 GFP-BMMSCs 膜片的构建 | 第33页 |
2.2 GFP-BMMSCs 膜片的检测 | 第33-36页 |
2.2.1 形态学检测 | 第33页 |
2.2.2 细胞因子表达的检测 | 第33-36页 |
2.2.2.1 GFP-BMMSCs 和 GFP-BMMSCs 膜片总 RNA 的抽提 | 第33-34页 |
2.2.2.2 GFP-BMMSCs 和 GFP-BMMSCs 膜片 cDNA 的反转录 | 第34-35页 |
2.2.2.3 RT-PCR 检测 | 第35-36页 |
2.3 统计 | 第36页 |
3 结果 | 第36-38页 |
3.1 GFP-BMMSCs 膜片培养和形态学观察 | 第36-38页 |
3.2 正常培养 GFP-BMMSCs 和 GFP-BMMSCs 膜片细胞因子和蛋白表 达量比较 | 第38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
实验三 GFP-BMMSCs 膜片修复急性皮肤创面效果的体内检测 | 第41-60页 |
引言 | 第41页 |
1.实验材料 | 第41-42页 |
1.1 实验试剂 | 第41-42页 |
1.2 实验仪器 | 第42页 |
2.实验方法 | 第42-47页 |
2.1 实验动物的饲养 | 第42页 |
2.2 动物创面模型的建立和 GFP-BMMSCs 的移植 | 第42-43页 |
2.2.1 制作创伤动物模型和 GFP-BMMSCs 膜片移植 | 第42-43页 |
2.2.2 GFP-BMMSCs 通过静脉和局部注射移植 | 第43页 |
2.3 实验动物取材和形态学比较 | 第43-45页 |
2.3.1 三组动物创面大小比较 | 第43页 |
2.3.2 三组动物创面组织炎症和移植细胞存活情况比较 | 第43-45页 |
2.3.2.1 创面组织 HE 染色 | 第43-44页 |
2.3.2.2 创面组织炎症细胞和血管内皮细胞免疫荧光检测 | 第44-45页 |
2.3.2.3 创面组织 GFP 细胞量比较 | 第45页 |
2.3.3 创面再生真皮结构比较 | 第45页 |
2.4 创面愈合组织相关细胞因子表达情况检测 | 第45-47页 |
2.4.1 愈合组织总 mRNA 提取 | 第45-46页 |
2.4.2 cDNA 文库构建 | 第46页 |
2.4.3 RT-PCR 检测 | 第46-47页 |
2.5 统计 | 第47页 |
3.实验结果 | 第47-57页 |
3.1 创面动物模型和 GFP-BMMSCs 膜片移植、静脉及创面局部注射 | 第47页 |
3.2 动物取材和形态学比较 | 第47-55页 |
3.2.1 创面面积和新生皮肤血管化比较 | 第47页 |
3.2.2 马森三色染色和免疫荧光染色 | 第47-55页 |
3.3 创面炎症和生长因子的表达检测 | 第55-57页 |
4.讨论 | 第57-60页 |
小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
个人简历和研究成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |