摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 引言 | 第14-38页 |
1.1 研究的目的与意义 | 第14页 |
1.2 文献综述 | 第14-36页 |
1.2.1 逆境及植物抗逆机理 | 第14-19页 |
1.2.2 植物抗旱耐盐基因工程的研究进展 | 第19-21页 |
1.2.3 植物转录因子研究进展 | 第21-26页 |
1.2.4 玉米组织培养和植株再生的研究进展 | 第26-29页 |
1.2.5 玉米遗传转化研究进展 | 第29-34页 |
1.2.6 玉米转基因育种实践与展望 | 第34-36页 |
1.3 研究内容 | 第36-38页 |
2 材料与方法 | 第38-58页 |
2.1 试验材料 | 第38-39页 |
2.1.1 植物材料 | 第38页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第38页 |
2.1.3 试剂和仪器设备 | 第38-39页 |
2.2 试验方法 | 第39-58页 |
2.2.1 玉米幼胚再生体系优化 | 第39-40页 |
2.2.2 玉米幼胚愈伤组织对筛选物敏感性研究 | 第40-41页 |
2.2.3 玉米茎尖再生体系建立与优化 | 第41-42页 |
2.2.4 玉米丛生芽对筛选物敏感性研究 | 第42页 |
2.2.5 农杆菌介导的玉米胚性愈伤组织转化 | 第42-45页 |
2.2.6 农杆菌介导的玉米离体茎尖转化 | 第45页 |
2.2.7 农杆菌介导的玉米茎尖原位转化研究 | 第45-47页 |
2.2.8 花粉管通道法介导的BcWRKYⅡ基因遗传转化 | 第47-49页 |
2.2.9 转BcWRKYⅡ基因植株分子检测 | 第49-53页 |
2.2.10 转基因植株抗旱耐盐胁迫处理及生理指标检测 | 第53-56页 |
2.2.11 产量及相关性状调查 | 第56-57页 |
2.2.12 转基因植株耐旱和耐盐性性评价 | 第57-58页 |
3 结果与分析 | 第58-109页 |
3.1 玉米幼胚再生体系的优化与筛选物敏感性研究 | 第58-65页 |
3.1.1 玉米幼胚再生体系的优化 | 第58-62页 |
3.1.2 胚性愈伤组织对筛选物敏感性的研究 | 第62-65页 |
3.2 玉米茎尖再生体系建立与筛选物敏感性研究 | 第65-70页 |
3.2.1 玉米茎尖再生体系建 | 第65-67页 |
3.2.2 玉米茎尖对筛选物敏感性的研究 | 第67-70页 |
3.3 BcWRKYⅡ基因对玉米遗传转化研究 | 第70-91页 |
3.3.1 农杆菌介导的玉米愈伤组织的遗传转化研究 | 第70-76页 |
3.3.2 农杆菌介导法转化玉米离体茎尖的研究 | 第76-81页 |
3.3.3 农杆菌介导的BcWRKYⅡ基因原位转化玉米茎尖的研究 | 第81-87页 |
3.3.4 花粉管通道法的优化 | 第87-91页 |
3.4 转基因植株的分子检测 | 第91-97页 |
3.4.1 转基因植株的PCR检测 | 第91-93页 |
3.4.2 转基因后代的遗传分析 | 第93-94页 |
3.4.3 PCR-Southern检测 | 第94-95页 |
3.4.4 转基因植株的Southern杂交分析 | 第95-96页 |
3.4.5 转基因植株的RT-PCR分析 | 第96-97页 |
3.5 转基因植株的抗旱、耐盐性分析 | 第97-109页 |
3.5.1 转基因植株抗旱性分析 | 第97-107页 |
3.5.2 转基因株系耐盐性研究 | 第107-109页 |
4 讨论 | 第109-117页 |
4.1 玉米再生体系的建立与优化 | 第109-110页 |
4.1.1 关于玉米幼胚再生体系的建立与优化 | 第109-110页 |
4.1.2 玉米茎尖再生体系建立与优化 | 第110页 |
4.1.3 玉米再生体系建立存在的问题 | 第110页 |
4.2 玉米愈伤及茎尖分生组织对筛选物敏感性的研究 | 第110-111页 |
4.2.1 玉米愈伤组织对筛选物及脱菌素敏感性的研究 | 第111页 |
4.2.2 玉米茎尖分生组织对筛选物及脱菌素敏感性的研究 | 第111页 |
4.3 玉米遗传转化体系的建立与优化 | 第111-114页 |
4.3.1 农杆菌介导的玉米胚性愈伤组织遗传转化 | 第112页 |
4.3.2 农杆菌介导的玉米离体茎尖转化研究 | 第112页 |
4.3.3 农杆菌介导玉米茎尖原位转化方法 | 第112-113页 |
4.3.4 花粉管通道法 | 第113页 |
4.3.5 不同转化方法的比较 | 第113-114页 |
4.4 转基因植株抗旱耐盐性研究 | 第114-116页 |
4.4.1 转基因植株抗旱性分析 | 第114-115页 |
4.4.2 转基因株系耐盐性研究 | 第115-116页 |
4.5 本研究的创新点 | 第116-117页 |
5 结论 | 第117-119页 |
5.1 建立了玉米幼胚和茎尖再生体系 | 第117页 |
5.2 明确了愈伤组织和茎尖分生组织对筛选物的敏感性 | 第117页 |
5.3 优化了不同遗传转化方法的试验条件 | 第117页 |
5.4 获得了整合BcWRKYⅡ基因的纯合植株 | 第117-118页 |
5.5 外源BcWRKYⅡ基因的转化提高了玉米抗旱和耐盐性 | 第118-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-129页 |
附录 | 第129-130页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第130页 |