| 符号说明 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-70页 |
| ·辣椒疫病发生与防治研究进展 | 第19-24页 |
| ·辣椒疫病的发生危害 | 第19-20页 |
| ·辣椒疫病发生规律和发病条件 | 第20-21页 |
| ·辣椒疫霉及其生物学特性 | 第21页 |
| ·辣椒疫霉的生理分化 | 第21-22页 |
| ·辣椒疫病的防治 | 第22-24页 |
| ·农业防治 | 第22页 |
| ·化学防治 | 第22-23页 |
| ·生物防治 | 第23-24页 |
| ·植物病原真菌致病基因的研究现状 | 第24-35页 |
| ·与侵染结构产生有关的基因 | 第25-26页 |
| ·与角质层及细胞壁降解有关的基因 | 第26-27页 |
| ·真菌毒素类 | 第27-29页 |
| ·与信号传导有关的基因 | 第29-31页 |
| ·与寄主代谢反应相关的基因 | 第31-33页 |
| ·其它致病基因 | 第33-35页 |
| ·辣椒疫病的抗性遗传与抗病基因研究进展 | 第35-37页 |
| ·辣椒对疫病的抗性特点 | 第35-36页 |
| ·抗疫病基因的分子标记与 QTL 定位 | 第36-37页 |
| ·卵菌效应蛋白研究进展 | 第37-43页 |
| ·无毒基因(Avr) | 第38-40页 |
| ·毒素 | 第40-43页 |
| ·NPP 蛋白 | 第40-41页 |
| ·PcF/ScR 蛋白 | 第41页 |
| ·CRN 蛋白 | 第41-42页 |
| ·水解酶以及水解酶抑制子(hydrolase, hydrolase inhibitors) | 第42页 |
| ·蛋白酶抑制子(Proteinase inhibitors) | 第42-43页 |
| ·葡聚糖酶抑制子(Glucanase inhibitor) | 第43页 |
| ·NPP（NEP1-like protein）效应子研究进展 | 第43-49页 |
| ·NPP 的发现与存在 | 第43-44页 |
| ·NPP 蛋白的活性 | 第44-45页 |
| ·NPP 基因结构 | 第45-46页 |
| ·植物对 NPP 的防卫反应 | 第46-47页 |
| ·NPP 蛋白致病功能研究 | 第47-49页 |
| ·农杆菌介导的基因瞬时表达体系 | 第49-51页 |
| ·瞬时表达的优点 | 第49页 |
| ·农杆菌瞬时表达的原理 | 第49-50页 |
| ·PVX 表达载体 | 第50-51页 |
| ·基因沉默技术 | 第51-57页 |
| ·转录水平的基因沉默 | 第52页 |
| ·转录后水平的基因沉默 | 第52-55页 |
| ·基因沉默原因 | 第55-57页 |
| ·DNA 甲基化(DNA methylation) | 第55页 |
| ·重复序列 | 第55-56页 |
| ·同源序列 | 第56页 |
| ·位置效应(position effect) | 第56-57页 |
| ·共抑制现象(co-suppression) | 第57页 |
| ·反义RNA | 第57页 |
| ·卵菌基因沉默研究进展 | 第57-64页 |
| ·卵菌沉默机制 | 第58-60页 |
| ·卵菌稳定沉默 | 第60-61页 |
| ·卵菌瞬时基因沉默 | 第61-62页 |
| ·基因沉默与表型变化的关系 | 第62-64页 |
| ·卵菌转化技术的进程与挑战 | 第64-70页 |
| ·卵菌转化技术研究进展 | 第64-66页 |
| ·卵菌转化载体系统 | 第66页 |
| ·选择性标记 | 第66-67页 |
| ·原生质体转化(protoplast transformation) | 第67-68页 |
| ·农杆菌转化(agrobacterium-mediated transformation) | 第68页 |
| ·粒子轰击方法转化(transformation by bombardent) | 第68-69页 |
| ·电转化(electroporation) | 第69-70页 |
| 2 材料与方法 | 第70-96页 |
| ·材料 | 第70-72页 |
| ·辣椒疫霉菌株 | 第70页 |
| ·菌株与质粒 | 第70页 |
| ·酶和生化试剂 | 第70页 |
| ·仪器 | 第70页 |
| ·培养基 | 第70-71页 |
| ·溶液配制 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-96页 |
| ·辣椒疫霉基因组内诱导坏死蛋白(NPP)基因信息分析 | 第72-73页 |
| ·辣椒疫霉菌株 SD33 诱导坏死蛋白( PCNPP)基因家族成员克隆 | 第73-76页 |
| ·基因克隆引物设计 | 第73-74页 |
| ·辣椒疫霉 DNA 提取 | 第74-75页 |
| ·PcNPP 基因克隆 | 第75-76页 |
| ·辣椒疫霉菌株 SD33 诱导坏死蛋白( PCNPP)基因家族系统进化分析 | 第76-77页 |
| ·辣椒疫霉菌株 SD33 诱导坏死蛋白( PCNPP)基因家族成员在菌丝体内表达 | 第77-81页 |
| ·辣椒疫霉菌株SD33 总RNA 的提取和cDNA 的合成 | 第77-78页 |
| ·紫外检测RNA 产率和纯度 | 第78页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第78-79页 |
| ·RT-PCR | 第79-81页 |
| ·辣椒疫霉菌株 SD33 诱导坏死蛋白(PCNPP)基因家族成员在病原寄主互作过程中表达模式分析 | 第81-83页 |
| ·接种辣椒叶片 | 第81页 |
| ·受试辣椒叶片总 RNA 的提取（Trizol 法） | 第81-82页 |
| ·RNA 紫外检测反转录 | 第82页 |
| ·荧光定量 PCR | 第82-83页 |
| ·辣椒疫霉菌株 SD33 诱导坏死蛋白( PCNPP)基因在植物体内瞬时表达 | 第83-87页 |
| ·农杆菌瞬时表达载体构建引物设计 | 第83-85页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白PVX 表达载体构建 | 第85-86页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白PVX 表达载体农杆菌转化 | 第86-87页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白PVX 表达载体接种辣椒和烟草 | 第87页 |
| ·基因PcNPP1 活性位点定点突变 | 第87-89页 |
| ·PcNPP1 活性位点定点突变引物设计 | 第87-88页 |
| ·PcNPP1 活性位点定点突变基因PVX 载体构建 | 第88-89页 |
| ·PcNPP1 定点突变基因接种烟草辣椒 | 第89页 |
| ·辣椒疫霉菌株 SD33 诱导坏死蛋白(PCNPP)基因稳定沉默 | 第89-94页 |
| ·卵菌稳定转化载体构建引物设计 | 第89-91页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白稳定沉默表达载体构建 | 第91-92页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白稳定沉默重组载体质粒提取 | 第92页 |
| ·辣椒疫霉菌转化步骤 | 第92-94页 |
| ·辣椒疫霉基因沉默转化子的筛选和分子验证 | 第94页 |
| ·辣椒疫霉PCNPP 基因沉默转化子RT-PCR 分析 | 第94页 |
| ·辣椒疫霉PCNPP 基因沉默转化子荧光定量PCR 分析 | 第94页 |
| ·辣椒疫霉 PCNPP 基因沉默转化子筛选及其生物学性状分析 | 第94-96页 |
| ·游动孢子诱导 | 第94-95页 |
| ·转化子表型分析 | 第95页 |
| ·致病性测定 | 第95-96页 |
| 3 结果与分析 | 第96-141页 |
| ·辣椒疫霉基因组信息分析结果 | 第96页 |
| ·辣椒疫霉 PCNPP 基因克隆 | 第96-117页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp1 基因的克隆及其序列分析 | 第97-98页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp2 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第98-99页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp3 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第99-100页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp4 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第100-101页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp5 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第101-102页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp6 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第102-103页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp7 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第103-105页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp8 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第105-106页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp9 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第106-107页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp10 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第107-109页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp11 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第109-110页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp12 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第110-111页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp13 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第111-112页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp14 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第112-113页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp15 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第113页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp16 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第113-114页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp17 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第114-115页 |
| ·辣椒疫霉坏死诱导蛋白pcnpp18 基因的核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第115-117页 |
| ·辣椒疫霉PCNPP 基因系统进化分析 | 第117-123页 |
| ·18 个PcNPP 基因序列比对 | 第117-119页 |
| ·辣椒疫霉PcNPP 基因系统进化分析 | 第119-123页 |
| ·PcNPP 基因在辣椒疫霉菌体内体表达分析 | 第123页 |
| ·PcNPP 基因在辣椒疫霉与寄主互作中表达模式分析 | 第123-126页 |
| ·PcNPP 基因农杆菌瞬时表达 | 第126-129页 |
| ·PcNPP 基因PVX 载体构建及农杆菌转化 | 第126-127页 |
| ·PcNPP 基因农杆菌转化子在辣椒体内瞬时表达 | 第127-128页 |
| ·PcNPP 基因农杆菌转化子在烟草体内瞬时表达 | 第128-129页 |
| ·PcNPP1 基因体外突变 | 第129-133页 |
| ·PcNPP1 基因活性位点突变 | 第129-132页 |
| ·PcNPP1 基因活性位点突变后农杆菌瞬时表达 | 第132-133页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白 PcNPP 基因稳定沉默突变体的获得 | 第133-138页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白 PcNPP 沉默转化子表型分析 | 第138-139页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死蛋白PcNPP 沉默转化子致病性测定 | 第139-141页 |
| 4 结论与讨论 | 第141-147页 |
| ·辣椒疫霉基因组信息分析 | 第141页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死基因确定 | 第141-143页 |
| ·辣椒疫霉12 个诱导坏死基因在病原与寄主互作过程中表达模式异同 | 第143-144页 |
| ·辣椒疫霉12 个诱导坏死基因 PVX 表达后农杆菌接种症状差异 | 第144页 |
| ·辣椒疫霉诱导坏死基因沉默 | 第144-145页 |
| ·辣椒疫霉 PcNPP 基因沉默突变体致病力降低 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-166页 |
| 附录 | 第166-167页 |
| 致谢 | 第167-168页 |
| 攻读博士学位期间发表文章 | 第168-169页 |
| 博士学位论文内容简介及自评 | 第169页 |
