中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-16页 |
一、还原型β2糖蛋白Ⅰ对糖尿病大鼠视网膜新生血管的影响 | 第16-23页 |
1.1 对象和材料 | 第16-18页 |
1.1.1 研究对象、造模及分组 | 第16页 |
1.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
1.1.3 主要试剂配制 | 第17页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-19页 |
1.2.1 玻璃体腔注射 | 第18页 |
1.2.2 视网膜组织切片的制备 | 第18页 |
1.2.3 HE染色 | 第18-19页 |
1.3 结果 | 第19-22页 |
1.3.1 糖尿病模型的建立 | 第19-20页 |
1.3.2 血清生化指标检测 | 第20-21页 |
1.3.3 视网膜各层组织结构的变化 | 第21-22页 |
1.4 小结 | 第22-23页 |
二、还原型β2糖蛋白Ⅰ对糖尿病大鼠视网膜新生血管的机制 | 第23-37页 |
2.1 对象和材料 | 第23-28页 |
2.1.1 研究对象 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
2.1.2.1 动物模型、玻璃体腔注射所用试剂 | 第23页 |
2.1.2.2 荧光实时定量PCR所用试剂 | 第23-24页 |
2.1.2.3 Western Blot所用试剂 | 第24页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第24-26页 |
2.1.3.1 动物模型、玻璃体腔注射所用试剂配置 | 第24-25页 |
2.1.3.2 荧光实时定量PCR所用试剂配置 | 第25页 |
2.1.3.3 Western Blot所用试剂配置 | 第25-26页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第26-28页 |
2.1.4.1 动物模型、玻璃体腔注射所用仪器 | 第26-27页 |
2.1.4.2 荧光实时定量PCR所用仪器 | 第27页 |
2.1.4.3 Western Blot所用仪器 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-34页 |
2.2.1 玻璃体腔注射 | 第28页 |
2.2.2 实时荧光定量PCR检测VEGF及受体mRNA的表达 | 第28-30页 |
2.2.2.1 视网膜组织细胞RNA提取(Trizol法) | 第28-29页 |
2.2.2.2 RNA纯度鉴定和浓度测定 | 第29页 |
2.2.2.3 RNA完整性鉴定 | 第29页 |
2.2.2.4 RT反应(制备cDNA模板) | 第29-30页 |
2.2.2.4.1 RT反应体系 | 第29页 |
2.2.2.4.2 RT反应条件 | 第29页 |
2.2.2.4.3 产物-20℃冻存,待做定量PCR | 第29-30页 |
2.2.2.5 引物序列 | 第30页 |
2.2.2.6 荧光实时定量PCR | 第30页 |
2.2.2.6.1 荧光实时定量反应体系 | 第30页 |
2.2.2.6.2 荧光实时定量结果分析 | 第30页 |
2.2.3 Western Blot检测VEGF受体后信号通路 | 第30-33页 |
2.2.3.1 组织总蛋白的提取 | 第31页 |
2.2.3.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第31-33页 |
2.2.3.3 SDS-PAGE | 第33页 |
2.2.4 统计学分析 | 第33-34页 |
2.3 结果 | 第34-36页 |
2.3.1 还原型β2糖蛋白Ⅰ对VEGF及其受体mRNA表达的影响 | 第34页 |
2.3.2 还原型β2糖蛋白Ⅰ对PI3K-Akt及MAPK-ERK1/2表达的影响 | 第34-36页 |
2.4 小结 | 第36-37页 |
三、讨论 | 第37-45页 |
3.1 2型糖尿病大鼠模型的建立 | 第37-38页 |
3.2 新生血管与糖尿病视网膜病变 | 第38页 |
3.3 β2糖蛋白Ⅰ、还原型糖蛋白Ⅰ与新生血管 | 第38-40页 |
3.3.1 β2糖蛋白Ⅰ机构、构象及功能 | 第38-39页 |
3.3.2 β2糖蛋白Ⅰ与血管新生 | 第39-40页 |
3.3.3 还原型β2糖蛋白Ⅰ与血管新生 | 第40页 |
3.4 VEGF与血管新生 | 第40-45页 |
3.4.1 VEGF家族 | 第41-42页 |
3.4.2 VEGF与糖尿病视网膜病变 | 第42-43页 |
3.4.3 VEGF下游关键蛋白信号转导通路 | 第43页 |
3.4.4 β2GPI、还原型β2GPI抑制新生血管的异同 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第53-54页 |
综述 糖尿病视网膜病变发病机制的研究进展 | 第54-71页 |
综述参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71页 |