中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
符号说明 | 第12-14页 |
前言 | 第14-18页 |
材料与方法 | 第18-48页 |
1. 材料 | 第18-24页 |
1.1 生化试剂 | 第18-19页 |
1.2 主要的仪器设备及其它 | 第19-20页 |
1.3 临床组织 | 第20页 |
1.4 细胞系及细胞的培养 | 第20页 |
1.5 常用试剂 | 第20-22页 |
1.6 抗体 | 第22页 |
1.7 PCR引物 | 第22页 |
1.8 质粒和菌种 | 第22-24页 |
2. 方法 | 第24-44页 |
技术路线 | 第24-25页 |
2.1 利用miRNA芯片对miR-29c进行表达分析 | 第25页 |
2.2 对miR-29c靶基因的预测 | 第25页 |
2.3 荧光定量RT-PCR检测miR-29c表达 | 第25-26页 |
2.4 RT-PCR检测TNFAIP3在肝癌细胞系及临床标本中的表达 | 第26-28页 |
2.5 构建miR-29c的表达载体 | 第28-32页 |
2.6 靶基因表达载体的构建 | 第32-35页 |
2.7 转染 | 第35-37页 |
2.8 体外转染miR-29c后TNFAIP3的检测 | 第37-41页 |
2.9 转染pS-miR-29c对HBV DNA复制、抗原表达的影响 | 第41-42页 |
2.10 转染pS-miR-29c对细胞增殖和凋亡的影响 | 第42-43页 |
2.11 数据统计分析 | 第43-44页 |
3. 结果 | 第44-48页 |
3.1 miR-29c在HBV相关性肝细胞癌中的表达下调 | 第44页 |
3.2 miRNA的生物信息学分析 | 第44-45页 |
3.3 TNFAIP3在细胞系及临床标本中的表达 | 第45页 |
3.4 miR-29c表达载体的构建、制备与鉴定 | 第45页 |
3.5 转染后pS-miR-29c表达水平的检测 | 第45-46页 |
3.6 双荧光报告系统的检测 | 第46页 |
3.7 转染miR-29c表达载体后TNFAIP3表达下降 | 第46页 |
3.8 miR-29c表达载体抑制细胞的生长并促进细胞凋亡 | 第46-47页 |
3.9 miR-29c抑制HBV DNA复制和HBsAg,HBeAg表达 | 第47-48页 |
讨论 | 第48-52页 |
结论 | 第52-53页 |
附图 | 第53-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第68-70页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第70页 |