| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第15-17页 |
| 第一章引言 | 第17-36页 |
| 1.1 MRV概述 | 第18-22页 |
| 1.1.1 MRV基本生物学特性 | 第18-19页 |
| 1.1.2 MRV的生活周期 | 第19-22页 |
| 1.2 MRV感染与宿主反应 | 第22-26页 |
| 1.2.1 MRV感染与宿主免疫 | 第22-24页 |
| 1.2.2 MRV感染与细胞应激 | 第24页 |
| 1.2.3 MRV与细胞周期 | 第24-25页 |
| 1.2.4 MRV与细胞凋亡 | 第25-26页 |
| 1.3 天然免疫与病毒感染 | 第26-31页 |
| 1.3.1 经典I型干扰素通路与抗病毒天然免疫 | 第26-27页 |
| 1.3.2 非依赖IFN途径激活ISGs | 第27-28页 |
| 1.3.3 干扰素刺激基因抗病毒作用 | 第28-31页 |
| 1.4 病毒感染与PI3K/Akt信号通路 | 第31-34页 |
| 1.4.1 病毒的入侵 | 第31-32页 |
| 1.4.2 前体mRNA的合成 | 第32-33页 |
| 1.4.3 细胞存活 | 第33-34页 |
| 1.4.4 病毒蛋白的翻译 | 第34页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 MRV诱导干扰素刺激基因表达及其抗病毒作用研究 | 第36-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-40页 |
| 2.1.1 病毒与细胞 | 第36-37页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 病毒滴度测定 | 第37页 |
| 2.1.4 病毒感染试验 | 第37页 |
| 2.1.5 细胞总RNA提取 | 第37-38页 |
| 2.1.6 病毒RNA的提取 | 第38页 |
| 2.1.7 cDNA的合成 | 第38-39页 |
| 2.1.8 真核表达质粒的构建 | 第39页 |
| 2.1.9 细胞处理与转染 | 第39页 |
| 2.1.10荧光定量RT-PCR试验 | 第39页 |
| 2.1.11双荧光素酶报告试验 | 第39-40页 |
| 2.1.12 RNA干扰试验 | 第40页 |
| 2.2 结果 | 第40-43页 |
| 2.2.1 MRV感染对ISRE启动子影响 | 第40-41页 |
| 2.2.2 MRV感染对IFITM1,Viperin和ISG15表达的影响 | 第41页 |
| 2.2.3 干扰素刺激基因IFITM1, Viperin和ISG15对MRV复制的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.4 下调内源性Viperin和ISG15对MRV复制的影响 | 第42-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 经典I型干扰素通路在MRV活化ISGs表达中的作用 | 第45-61页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-49页 |
| 3.1.1 病毒与细胞 | 第45-46页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 3.1.3 淋巴细胞的分离 | 第46页 |
| 3.1.4 真核表达质粒的构建 | 第46-47页 |
| 3.1.5 组织RNA的提取 | 第47-48页 |
| 3.1.6 MAVS及STING亚细胞定位和组织分布 | 第48页 |
| 3.1.7 双荧光素酶报告试验 | 第48页 |
| 3.1.8 干扰素刺激因子Viperin和ISG15的表达量检测 | 第48页 |
| 3.1.9 过表达MAVS和STING对MRV复制的影响 | 第48-49页 |
| 3.1.10 RNA干扰试验 | 第49页 |
| 3.1.11干扰素受体抗体处理试验 | 第49页 |
| 3.2 结果 | 第49-58页 |
| 3.2.1 MAVS和STING分子序列保守性分析 | 第49-51页 |
| 3.2.2 MAVS与STING的亚细胞定位与组织分布 | 第51-52页 |
| 3.2.3 过表达MAVS和STING对宿主I型干扰素通路的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.4 下调内源性MAVS和STING表达对病毒诱导干扰素表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.2.5 过表达MAVS和STING对ISGs表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.6 过表达MAVS和STING对MRV的复制的影响 | 第55-56页 |
| 3.2.7 MAVS和STING与MRV激活ISRE启动子元件 | 第56页 |
| 3.2.8 I型干扰素通路与MRV激活ISRE启动子元件 | 第56-58页 |
| 3.3 讨论 | 第58-61页 |
| 第四章 MRV激活PI3K/Akt/EMSY通路调控抗病毒免疫反应的分子机制 | 第61-80页 |
| 4.1 材料与方法 | 第61-64页 |
| 4.1.1 病毒与细胞 | 第61-62页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第62页 |
| 4.1.3 真核表达质粒的构建 | 第62页 |
| 4.1.4 病毒灭活 | 第62-63页 |
| 4.1.5 病毒感染 | 第63页 |
| 4.1.6 抑制剂药物处理 | 第63页 |
| 4.1.7 RNA干扰试验 | 第63页 |
| 4.1.8 Western blot分析 | 第63-64页 |
| 4.2 结果 | 第64-77页 |
| 4.2.1 MRV感染对细胞内Akt通路的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.2 灭活的MRV病毒对细胞内Akt通路的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.3 MRV感染对细胞内PI3K/Akt通路的影响 | 第66-68页 |
| 4.2.4 MRV感染激活ISRE与PI3K/Akt信号通路 | 第68-70页 |
| 4.2.5 MRV感染激活ISRE启动子依赖于Akt/EMSY通路 | 第70-72页 |
| 4.2.6 MRV激活PI3K/Akt信号通路与病毒内吞途径 | 第72-75页 |
| 4.2.7 MRV激活PI3K/Akt信号通路依赖于FAK磷酸化 | 第75-77页 |
| 4.3 讨论 | 第77-80页 |
| 第五章 全文结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 个人简历 | 第93页 |
