致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第15-50页 |
第一节 免疫系统概述 | 第15-26页 |
一、免疫器官和组织 | 第15-16页 |
二、免疫细胞 | 第16-17页 |
三、免疫分子 | 第17-21页 |
四、软体动物免疫系统的特征 | 第21-26页 |
第二节 免疫系统的发生和发育 | 第26-49页 |
一、亲代免疫及其传代效应 | 第26-30页 |
二、免疫细胞的发生 | 第30-42页 |
三、免疫系统的成熟 | 第42-46页 |
四、软体动物免疫系统发生的研究进展 | 第46-49页 |
第三节 本研究的目的及意义 | 第49-50页 |
第二章 实验材料与方法 | 第50-69页 |
第一节 实验材料 | 第50-54页 |
一、实验动物及菌株 | 第50页 |
二、试剂耗材 | 第50页 |
三、仪器设备 | 第50-54页 |
第二节 实验方法 | 第54-69页 |
一、长牡蛎幼虫及组织总RNA的制备及cDNA的合成 | 第54-56页 |
二、靶基因的PCR扩增 | 第56-57页 |
三、PCR产物回收、连接、转化、测序 | 第57页 |
四、靶基因序列的生物信息学分析 | 第57页 |
五、重组蛋白的原核表达和纯化 | 第57-61页 |
六、多克隆抗体的制备 | 第61页 |
七、Western Blot检测 | 第61-62页 |
八、血细胞滴片、组织石蜡切片及胚胎样品的制备 | 第62-63页 |
九、蛋白免疫荧光定位 | 第63-64页 |
十、长牡蛎RNA干扰实验 | 第64-66页 |
十一、新生细胞EdU增殖检测 | 第66页 |
十二、荧光实时定量PCR检测 | 第66-67页 |
十三、转录组测序 | 第67-68页 |
十四、幼虫的吞噬能力检测 | 第68页 |
十五、酶活力测定(LZM,CAT和Cu/Zn-SOD) | 第68-69页 |
第三章 实验结果 | 第69-93页 |
第一节 长牡蛎早期发育过程中免疫能力的检测 | 第69-78页 |
一、长牡蛎幼虫的吞噬能力 | 第69页 |
二、长牡蛎早期发育过程中的酶活力 | 第69页 |
三、免疫分子在长牡蛎早期发育过程中的表达模式 | 第69-71页 |
四、菌刺激对长牡蛎不同幼虫时期免疫分子表达的影响 | 第71-73页 |
五、长牡蛎不同幼虫时期免疫分子的整体免疫荧光定位 | 第73-74页 |
六、幼虫转录组数据的分析 | 第74-78页 |
第二节 长牡蛎造血相关转录因子的鉴定、表达模式及功能分析 | 第78-93页 |
一、长牡蛎Cg-SCL的鉴定、表达模式及功能分析 | 第78-83页 |
二、长牡蛎Cg-Runt的鉴定及表达模式 | 第83-87页 |
三、长牡蛎Cg-GATA-2/3 的鉴定及功能分析 | 第87-93页 |
第四章 讨论 | 第93-101页 |
第一节 长牡蛎早期发育过程中免疫能力的检测 | 第93-97页 |
第二节 长牡蛎造血相关转录因子的表达模式揭示造血作用的发生和发育 | 第97-101页 |
第五章 结论 | 第101-103页 |
一、母源免疫在个体胚胎期起着重要的保护作用 | 第101页 |
二、长牡蛎的免疫系统在担轮幼虫期开始形成,壳顶期基本发育完善 | 第101页 |
三、转录因子Cg-SCL、Cg-Runt和Cg-GATA-2/3 参与长牡蛎的造血作用 | 第101-102页 |
四、长牡蛎中存在胚胎和幼虫两次造血作用。 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-139页 |
作者简介 | 第139-140页 |
博士期间发表和完成的论文 | 第140页 |