摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第11-12页 |
材料与方法 | 第12-19页 |
1. 实验材料 | 第12-13页 |
1.1 实验对象 | 第12页 |
1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
1.3 实验仪器 | 第13页 |
2. 实验方法 | 第13-19页 |
2.1 细胞培养 | 第13页 |
2.2 临床标本的收集和保存 | 第13-14页 |
2.3 RNA提取和real-time PCR | 第14-16页 |
2.4 RNA标记与芯片杂交 | 第16页 |
2.5 miRNAs沉默,过表达载体的构建 | 第16-17页 |
2.6 Lipofectamine 2000 转染 | 第17页 |
2.7 荧光素酶报告基因实验 | 第17页 |
2.8 RNA干扰 | 第17页 |
2.9 过表达分析 | 第17-18页 |
2.10 CCK-8 检测细胞增殖活性 | 第18页 |
2.11 集落形成实验 | 第18页 |
2.12 体外侵袭实验 | 第18页 |
2.13 免疫印迹分析(Western Blot analysis) | 第18-19页 |
2.14 肿瘤的异种移植模型 | 第19页 |
2.15 组织化学染色分析 | 第19页 |
2.16 计学分析 | 第19页 |
结果 | 第19-30页 |
1. miRNAs在MHCC97-H与MHCC97-L细胞株中的差异表达 | 第19-21页 |
2. 13个miRNAs在细胞株及组织中的表达 | 第21-22页 |
3. miRNAs靶基因的预测及鉴定 | 第22-24页 |
4. miR-26a23p , miR-548l和miR-34a-5p表达对肝癌细胞生物学行为的影响 | 第24-28页 |
4.1 上调miRNAs对肝癌细胞在体外的生物学行为的影响 | 第24-26页 |
4.2 下调miRNAs对肝癌细胞在体外的生物学行为的影响 | 第26-27页 |
4.3 miRNAs对肝癌细胞在体内的生物学行为的影响 | 第27-28页 |
5. ST3GAL5的表达调控对肝癌细胞生物学行为的影响 | 第28-30页 |
5.1 上调ST3GAL5的表达增强肝癌细胞的迁移和侵袭 | 第28-29页 |
5.2 下调ST3GAL5的表达抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第29-30页 |
讨论 | 第30-34页 |
结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
综述 | 第39-48页 |
参考文献 | 第44-48页 |
致谢 | 第48-49页 |