一种检测儿茶酚-O-甲基化转移酶荧光探针的设计合成及其生物应用
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| (一) 前言 | 第11-14页 |
| (二) 材料和方法 | 第14-21页 |
| 1. 材料 | 第14-15页 |
| 2. 仪器 | 第15页 |
| 3. 方法 | 第15-21页 |
| 3.1 S-COMT蛋白的表达与纯化 | 第15-16页 |
| 3.2 甲基化产物的合成 | 第16-17页 |
| 3.3 液相分析 | 第17页 |
| 3.4 COMT反应检测 | 第17页 |
| 3.5 最适pH条件检测 | 第17-18页 |
| 3.6 COMT最低检测下限 | 第18页 |
| 3.7 酶动力学测定 | 第18页 |
| 3.8 化学抑制试验 | 第18-19页 |
| 3.9 蛋白量与活性相关性试验 | 第19页 |
| 3.10 细胞毒性试验 | 第19-20页 |
| 3.11 细胞成像 | 第20页 |
| 3.12 分子对接模型 | 第20页 |
| 3.13 高通量初筛抑制剂 | 第20页 |
| 3.14 高通量抑制剂筛选 | 第20-21页 |
| (三) 结果 | 第21-32页 |
| 1. 探针具有稳定性和高选择性 | 第21-24页 |
| 2. 探针反应与时间和酶浓度呈线性关系 | 第24-26页 |
| 3. 探针能够检测抑制剂对COMT的抑制作用 | 第26页 |
| 4. 探针检测细胞匀浆中COMT活性 | 第26-28页 |
| 5. 使用探针细胞成像检测COMT活性 | 第28-29页 |
| 6. 分子对接模拟 | 第29-30页 |
| 7. 探针的初步应用 | 第30-32页 |
| (四) 讨论 | 第32-33页 |
| (五) 结论 | 第33-34页 |
| (六) 参考文献 | 第34-40页 |
| 综述 | 第40-54页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
