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辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)肉碱脂酰转移酶基因的克隆与功能研究

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 引言第12-32页
    1.1 辣椒疫霉病发生与防治研究进展第12-19页
        1.1.1 辣椒疫霉的生物学性状第12-14页
        1.1.2 辣椒疫病的危害及主要症状第14-15页
        1.1.3 辣椒疫霉病的发生与防治第15-19页
    1.2 卵菌基因功能研究技术的研究进展第19-25页
        1.2.1 DNA转化第19-20页
        1.2.2 报告基因第20页
        1.2.3 基因沉默第20-23页
        1.2.4 遗传图谱第23页
        1.2.5 基因资源第23-24页
        1.2.6 基因过量表达技术第24页
        1.2.7 基因瞬时表达技术第24-25页
        1.2.8 缺失特定基因第25页
    1.3 疫霉信号转导基因及发育相关基因的研究第25-27页
        1.3.1 疫霉信号转导方面的研究第25-26页
        1.3.2 疫霉发育相关基因的研究进展第26-27页
    1.4 肉碱脂酰转移酶(CAT)基因的研究进展第27-30页
        1.4.1 附着胞介导的植物侵染第27-28页
        1.4.2 CAT类基因的发现第28-29页
        1.4.3 CAT类基因的研究进展第29-30页
    1.5 实验目的及意义第30-32页
2 材料与方法第32-52页
    2.1 材料第32-36页
        2.1.1 辣椒疫霉菌株第32页
        2.1.2 载体与质粒第32页
        2.1.3 常用酶和生化试剂第32-33页
        2.1.4 相关耗材和仪器第33页
        2.1.5 常用培养基及有关溶液的配制第33-34页
        2.1.6 常用溶液和试剂的配制第34-36页
    2.2 实验方法第36-52页
        2.2.1 肉碱脂酰转移酶(CAT)的生物信息学及基本理化性质第36-37页
        2.2.2 引物设计第37-38页
        2.2.3 辣椒疫霉肉碱脂酰转移酶PCCAT基因的克隆第38-43页
        2.2.4 辣椒疫霉PCCAT基因在菌丝体内表达模式分析第43-44页
        2.2.5 辣椒疫霉肉碱脂酰转移酶PCCAT基因的稳定沉默和过表达转化子的获得第44-50页
        2.2.6 稳定沉默和过表达转化子的的生物学性状分析第50-52页
3 结果与分析第52-78页
    3.1 辣椒疫霉PCCAT基因克隆及序列分析第52-59页
        3.1.1 辣椒疫霉PCCAT基因的PCR的检测和克隆第52-57页
        3.1.2 同源性分析第57-58页
        3.1.3 辣椒疫霉PCCAT基因系统进化分析第58-59页
    3.2 辣椒疫霉PCCAT基因在互作过程中表达趋势分析第59页
    3.3 辣椒疫霉PCCAT基因的沉默与过表达转化子的获得第59-66页
        3.3.1 沉默及过表达载体的构建第59-60页
        3.3.2 稳定沉默突变体的获得第60-63页
        3.3.3 过表达转化子的获得第63-66页
    3.4 沉默及过表达转化子的生物学性状分析第66-78页
        3.4.1 菌丝生长速率的对比分析第66-67页
        3.4.2 温度对菌丝生长速率的影响第67-69页
        3.4.3 菌丝形态观察第69-71页
        3.4.4 孢子囊产生时间及数量和形态的比较第71-74页
        3.4.5 游动孢子的诱导及致病性分析第74-75页
        3.4.6 侵染结构的观察第75-78页
4 结论与讨论第78-81页
    4.1 PCCAT1和PCCAT2基因生物信息分析第78页
    4.2 PCCAT1和PCCAT2基因在病原与寄主互作过程中表达模式分析第78-79页
    4.3 PCCAT1和PCCAT2基因在辣椒疫霉菌中的沉默与过表达及生物学表型分析第79页
    4.4 辣椒疫霉PCCAT基因沉默、过表达突变体的致病力检测第79-81页
参考文献第81-92页
致谢第92-93页
攻读硕士学位期间发表文章第93页

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